Immunologiczne badania poronień

Wskazania do badania immunologicznego: nawykowe poronienie ciąży o nieznanym pochodzeniu; anembrion w anamnezie; poprzednia ciąża z opóźnieniem w rozwoju wewnątrzmacicznym; wewnątrzmaciczna śmierć płodowa na dowolnym etapie ciąży; choroby i stany autoimmunologiczne; obecność w historii zakrzepicy tętniczej i żylnej; małopłytkowość; brak zapłodnienia in vitro (IVF).

Leczenie antybiotykami, niektóre zabiegi fizykoterapeutyczne prowadzą do obniżenia parametrów odporności komórkowej i humoralnej. Okres powrotu wskaźników odporności do wartości wyjściowej jest różny od 3 do 6 miesięcy, dlatego badania immunologiczne należy przeprowadzić przed rozpoczęciem leczenia.

Jeśli wszystkie parametry odporności ulegną zmniejszeniu, wówczas leczenie środkami przeciwbakteryjnymi musi być połączone ze środkami immunomodulującymi. Aby zalecić ciążę, jest to możliwe dopiero po przywróceniu parametrów odporności komórkowej i humoralnej, ponieważ do prawidłowego przebiegu ciąży konieczna jest odpowiednia reakcja immunologiczna organizmu.

Testy immunologiczne dla pacjentów ze zwykłym poronieniem.

• Immunofenotypowanie

Immunofenotypowanie subpopulacji w kompozycji limfocytów krwi obwodowej pozwala na wykrycie odchyleń od normy, a zwłaszcza oszacowanie poziomu aktywowanych komórek odpowiedzialnych za wytwarzanie prozapalnych cytokin i autoprzeciwciał.

• Definicja przeciwciał.

Istnieje 5 klas przeciwciał:

1. IgM - są pierwszymi, które pojawiają się w odpowiedzi na stymulację antygenową i są skuteczne w wiązaniu i aglutynacji mikroorganizmów (antygenów). Mają większą cząsteczkę niż inne immunoglobuliny i nie przenikają przez łożysko do płodu.
2. IgG - przeciwciała, z odpowiedzią immunologiczną pojawiają się po IgM, przenikają do przestrzeni pozanaczyniowych i przez łożysko przenikają do płodu.
3. IgA - główne przeciwciała zawarte w wydzielinach w jelitach, płucach, moczu. Ich główną funkcją jest zapobieganie wnikaniu antygenów z powierzchni do tkanki.
4. IgE - zwykle stanowią mniej niż 1/10 000 wszystkich immunoglobulin w surowicy, ale z alergiami ich zawartość zwielokrotnia się ponad 30 razy, a zawartość swoistych IgE ponad 100 razy.
5. IgD - działa na powierzchni komórek B, pełniąc funkcję regulacyjną.

Definicja immunoglobulin trzech głównych klas (A, M, G) jest konieczna do oceny statusu immunologicznego. Wzrost poziomu IgM występuje przy pierwotnej infekcji lub zaostrzeniu uporczywej infekcji wirusowej. Niski poziom IgA jest podstawą do odmowy użycia immunoglobuliny podczas leczenia, ponieważ możliwe są powikłania anafilaktyczne. Najważniejsze w praktyce położniczej jest określenie swoistych przeciwciał na infekcje wirusowe, pasożytnicze.

Obecność immunoglobulin klasy IgG swoistych dla wirusa opryszczki pospolitej, wirusem cytomegalii, Toxoplasma oznacza, że pacjent spotykane w przeszłości z tych antygenów i ma odporność i aktywację wirusem opryszczki i / lub zakażenia wirusem cytomegalii u płodu cierpieć trudno nie być, a jeśli nie IgG przeciwciał przeciwko Toxoplasma owoców w ogóle nie zostanie dotknięty chorobą.

Obecność swoistych IgM w nieobecności IgG oznacza, że istnieje pierwotna infekcja. W obecności jednocześnie specyficznych przeciwciał IgM i IgG najczęściej dochodzi do zaostrzenia przewlekłej infekcji wirusowej. Możliwe, że nie ma zaostrzeń, ale istnieje ciągłe utrzymywanie się przeciwciał IgM.

Szczególną uwagę należy zwrócić na pacjentów, którzy nie mają przeciwciał przeciwko takim zakażeniom, które w czasie ciąży mogą spowodować poważne uszkodzenie płodu - HSV, CMV, toksoplazmozę, różyczkę. Tych pacjentów nazywa się seronegatywnymi. Po kontakcie z czynnikiem zakaźnym po raz pierwszy pojawia się zakażenie i, odpowiednio, wytwarzanie przeciwciał. Najpierw pojawiają się przeciwciała klasy IgM, następuje tak zwana konwersja, a pacjent z seronegatywny staje się seropozytywny dla określonej infekcji. W takim przypadku, jeśli infekcja powoduje wady rozwojowe płodu, częściej niż ciąża jest przerywana i nie zachowana, zwłaszcza jeśli konwersja była obserwowana w pierwszym trymestrze ciąży.

Dlatego przy określaniu nośnika wirusa w tym samym czasie konieczne jest określenie obecności i klasy swoistych przeciwciał.

Ocena statusu interferonu wydaje się niezwykle ważnym punktem badania.

Interferon-y. - grupy białek wytwarzanych w odpowiedzi na zakażenie wirusowe, a także pod wpływem lipolisaharina etc., są wytwarzane przez makrofagi-A IFN fibroblastów IFN-P i komórki T (Th-1 komórek pomocniczych) z IFN-y. Interferony stymulują komórki do izolowania białek, które blokują transkrypcję informacyjnego RNA wirusa. Interferony są bardziej specyficzne gatunkowo niż inne cytokiny.

Wysoki poziom interferonu w surowicy zakłócają normalnego rozwoju placentation, trofoblastu inwazji ograniczający oraz umieszczenie na zarodek bezpośredniego działania toksycznego. Oszacowanie interferonu w surowicy, spontaniczna IFN leukocytów produkty reakcji leukocytów IFN-a, w indukcji wirusa choroby Newcastle (NDV), produkty alfa i beta, interferonu na modulatory immunologiczne do wyboru najbardziej wydajne cewek indukcyjnych dla danego pacjenta (Neovir, polyoxidonium, tsikloferon, ridostin, lorifan, imunofan, derinat Temur); Wytwarzanie limfocytów IFN-y pod wpływem indukcji fitohemaglutyniną (PHA) konkvalinom (Con A), enterotoksynę gronkowcową (SEA).

Brak równowagi w układzie interferonu jest dostępny u prawie wszystkich kobiet z nawracającymi poronieniami, szczególnie z przewlekłą infekcją wirusową i zaburzeniami autoimmunologicznymi. Ten brak równowagi objawia się ostrym wzrostem interferonu w surowicy lub ostrym spadkiem produkcji wszystkich typów interferonu przez komórki krwi w odpowiedzi na różne induktory.

• Poziom prozapalnych i regulatorowych cytokin określa się za pomocą testu immunoenzymatycznego (Elisa) w surowicy, śluzie i komórkach kanału szyjki macicy, supernatantach aktywowanych in vitro limfocytów.

Obecnie znanych jest ponad 30 cytokin. Tradycyjnie, w oparciu o efekty biologiczne, zwyczajowo oddziela się:

• interleukiny - czynniki regulatorowe leukocytów (przebadano 17 z nich);
• interferony - cytokiny o przeważającej aktywności przeciwwirusowej;
• czynniki martwicy nowotworów, które zapewniają immunoregulacyjne i bezpośrednie działanie cytotoksyczne;
• czynniki stymulujące kolonię - cytokiny krwiotwórcze;
• chemokiny;
• czynniki wzrostu.

Cytokiny różnią się strukturą, aktywnością biologiczną i pochodzeniem, ale mają wiele podobnych cech charakterystycznych dla tej klasy cząsteczek bioregulacyjnych.

Funkcjonowanie układu cytokin normalnie charakteryzuje się: indywidualnym charakterem powstawania i odbiorem cytokin; Kaskadowy mechanizm działania; miejsce funkcjonowania; nadmiarowość; wzajemne powiązania i interakcje komponentów. Normalnie, cytokiny utworzone przez pierwotną odpowiedź immunologiczną praktycznie nie wchodzą do krwioobiegu, nie wywierają skutków ogólnoustrojowych, tj. Istnieje lokalny charakter ich akcji.

Oznaczanie wysokich poziomów cytokin w krwi obwodowej zawsze wskazuje na naruszenie zasady lokalizacji funkcjonowania sieci cytokin, co obserwuje się przy intensywnych, długotrwałych zapalnych chorobach autoimmunologicznych, którym towarzyszy uogólniona aktywacja komórek układu immunologicznego.

Redundancja układu cytokin przejawia się w fakcie, że każdy rodzaj komórek układu odpornościowego jest zdolny do wytwarzania kilku cytokin, a każda odmiana cytokin może być wydzielana przez różne komórki. Ponadto, dla wszystkich cytokin, charakterystyczna jest wielofunkcyjność z silnymi nakładającymi się efektami. Zatem pojawienie się powszechnych i miejscowych oznak zapalenia powoduje powstanie wielu cytokin: il-1, il-6, il-8, TNFα, czynników stymulujących wzrost kolonii.

W proliferacji limfocytów T uczestniczy il-2, il-4, il-7, il-9, il-13, il-15, TNFα. To powielenie zapewnia niezawodność działania kaskady cytokin. Pod wpływem specyficznych antygenów T-helper różnicowanie występuje w dwóch subpopulacjach: Th1 i Th2, różniących się antygenami głównego kompleksu zgodności tkankowej i wytwarzających cytokiny. Th1 wydziela głównie prozapalne cytokiny i regulację Th2, powodując głównie reakcje humoralne hemopozy, angiogenezę.

Ogólny charakter uwalniania cytokin przejawia się szeregiem efektów ogólnoustrojowych. Wiadomo, że śmiertelność w szoku septycznym jest determinowana nie tyle przez działanie endotoksyny, co przez podwyższony poziom prozapalnych cytokin, które powstają w odpowiedzi na jej podawanie.

Najważniejszymi antagonistami prozapalnych cytokin są cytokiny regulatorowe - il-4, il-10.

Tak więc system cytokin dla całej różnorodności jest pojedynczą i zintegrowaną siecią, której zakłócenia mogą prowadzić do załamania samoregulacji, zmiany kierunku odpowiedzi immunologicznej, co staje się szczególnie ważne we wczesnych stadiach rozwoju zarodka.

Dlatego niezwykle ważne jest, aby wszystkie parametry cytokin znajdowały się w prawidłowym zakresie przed zajściem w ciążę. Normalny przebieg ciąży jest w dużej mierze zdeterminowany przez stosunek efektów immunomodulujących i immunosupresyjnych w endometrium, trofoblastu, a następnie w łożysku, w regulacji którego bezpośredni udział biorą składniki układu cytokin.

• Badanie autoprzeciwciał.

Autoimmunity - lustrzane odbicie tolerancji, wskazuje na utratę tolerancji przez organizm, odporność na własne antygeny. Normalnie, układ odpornościowy hamuje autoreaktywność limfocytów poprzez regularne mechanizmy. Naruszenie ich może prowadzić do patologii autoimmunologicznej. W literaturze opisano wiele opcji rozwoju autoimmunizacji. Zakłada się, że wewnątrzkomórkowa infekcja wirusowa zmienia charakter antygenowy "własnej" komórki, w wyniku czego mogą pojawić się przeciwciała przeciwko "własnej" komórce. Jest możliwe, że mikroorganizmy mają wspólne antygeny z ludzkim ciałem, w tym przypadku nie ma wystarczającej eliminacji wszystkich autoreaktywnych limfocytów B i występowania autoprzeciwciał. Przyjmij obecność czynników genetycznych na poziomie limfocytów B, subpopulacji limfocytów T, makrofagów, tkanek docelowych i hormonów.

Choroby autoimmunologiczne są częstsze i cięższe u kobiet. W ostatnich latach uwaga światowych naukowców skupiała się na procesach autoimmunologicznych w organizmie człowieka, a w szczególności w praktyce położniczej. Przeprowadzono wiele badań, aby zrozumieć znaczenie tych zaburzeń, w tym patologii położniczej.

Najbardziej znaczącym zaburzeniem autoimmunologicznym w praktyce położniczej jest zespół antyfosfolipidowy. Częstość występowania zespołu antyfosfolipidowego wśród pacjentów ze zwykłym poronieniem wynosi od 27-42%.

Definicja toczeń antykoagulant prowadzi metody hemostatycznych. W praktyce położniczej wielkie znaczenie antykoagulant tocznia. Uważa się, że wykrywanie toczeń przeciwzakrzepowego w krwi jakościowa ekspresja działania pewnych poziomach autoprzeciwciał fosfolipidów (kardiolipina, phosphatidylethanol, fosfatydylocholina, fosfatydyloseryna, fosfatidilinazitol, kwas fosfotidilovaya) do hemostazy.

Grupa ryzyka przez obecność autoprzeciwciał do fosfolipidów to kolejna kategoria pacjentów z wywiadem jest dostępny: nawykowe poronienia nieznanego pochodzenia, śmierci płodu w II i III trymestrze ciąży, tętniczych i zakrzepicy żylnej, choroby naczyń mózgowych, anemia niewiadomego pochodzenia, fałszywie dodatnie reakcje na syfilis, Zatrucie początku drugiej połowie ciąży, wewnątrzmacicznego opóźnienia wzrostu, i chorób autoimmunologicznych.

Przeciwciała antykardiolipinowe, przeciwciała wobec innych fosfolipidów, fosfoetanoloaminy, fosfotydylocholiny, fosfatydyloseryny i kwasu fosfotydowego są oznaczane za pomocą testu immunologicznego enzymu Elisa.

Zdaniem naukowców ta sama pula komórek układu odpornościowego produkuje nie tylko przeciwciała przeciwko fosfolipidom, ale także inne przeciwciała: przeciwciała anty-DNA, przeciwciała przeciwjądrowe, przeciwtarczycowe, antyspołeczne. Uważa się, że przeciwciała te stanowią do 22% nawykowych poronień genetyki immunologicznej i około 50% niepłodności niejasnej genezy i niepowodzeń IVF.

Te przeciwciała mogą być skierowane zarówno przeciwko podwójnej cząsteczce DNA, jak i pojedynczej, a także przeciwko polinukleotydom i histonom. Najczęściej są wykrywane w chorobach autoimmunologicznych, ale mogą istnieć przeciwciała bez manifestacji choroby autoimmunologicznej. Inni badacze nie podzielają tego widoku. Zgodnie z ich danymi badawczymi, te autoprzeciwciała są niespecyficzne, często przejściowe, nie ma danych naukowych wyjaśniających mechanizm ich działania w nawykowych poronieniach. Według badań, przeciwciała te muszą mieć na uwadze, ponieważ mogą one być markerami autoimmunologicznego kłopoty, i chociaż naukowe wyjaśnienie mechanizmu działania ma ciąża przebiega z powikłaniami są zawsze w postaci łożyska niewydolności, wewnątrzmacicznego opóźnienia wzrostu.

W ostatnich latach pojawiły się prace nad znaczeniem przeciwciał przeciwko hormonom. Pula komórek produkujących przeciwciała CD 19 + 5 +. Aktywacja tych komórek prowadzi do pojawienia się przeciwciał przeciw hormonów, które są krytyczne dla prawidłowego przebiegu ciąży: estradiol, progesteron, gonadotropina kosmówkowa, hormon tarczycy, hormon wzrostu.

Z nadmiarem CD19 + 5 ze względu na obecność autoprzeciwciał hormonów zaobserwowano kilka klinicznych objawów tego zespołu: niewydolności fazy lutealnej, nieodpowiedniej odpowiedzi zespołu stymulacji owulacji „odpornych jajników” przedwczesne „starzenie się” jajników i przedwczesną menopauzę. Gdy przeciwciała działania aktywowanego CD19 + 5 + prowadzi do przedwczesnego naruszenia implantację do martwicy i zapalenia doczesnej, do przerwania tworzenia zwyrodnienie włóknikopodobne, nadmierne osadzanie fibryny. Gdy in vitro w tych pacjentów wykazuje powolne podział i fragmentacji zarodkami, poziom gonadotropiny kosmówkowej powolny wzrost ciąży, żółtko uszkodzenia woreczka, poziom krwiak subchorial.

W naszej klinice możemy jedynie zidentyfikować przeciwciała przeciwko gonadotropinie kosmówkowej i przywiązywać wielką wagę do tego aspektu w przypadku nawrotu ciąży.

Ta sama pula komórek produkuje autoprzeciwciała dla neuroprzekaźników, w tym serotoniny, endorfin i enkefalin. W obecności tych przeciwciał jest oznaczony odporność na stymulacji jajników, zmniejszenie krążenia krwi w macicy, jest zmniejszenie grubości błony śluzowej macicy, często mają depresję, fibromyalgia, zaburzenia snu, w tym poty nocne, ataki paniki, etc.

Niestety wiele metod identyfikacji autoprzeciwciał nie jest wystandaryzowanych, wymagają one bardziej precyzyjnego mechanizmu działania. Praktyczni lekarze powinni zdawać sobie sprawę z istnienia tego obszaru badań, gdy poronienia o nieznanej genezie są wysyłane do wyspecjalizowanych laboratoriów i oddziałów, zamiast rozwiązywać ten problem, zalecając brak shpy i progesteronu.

[1], [2], [3], [4], [5], [6],