Skórny odpowiednik. Historia i wyniki badań klinicznych

Pod koniec lat 80. Na Uniwersytecie Stanforda opracowano ciekłą postać kolagenu wołowego, która w temperaturze ciała została przekształcona w miękkie elastyczne podłoże. Lek został zarejestrowany i dopuszczony do stosowania w kilku krajach europejskich jako wszczepialny lek o nazwie Zyderm Collagen Implantant. Ten lek był pierwszym implantem. Później pojawiły się inne środki do plastyki konturu, takie jak restylane, perlene, żel farmaceutyczny, artekol, żel biopolimerowy i inne. Leki te zaczęły być stosowane nie tylko do modelowania konturu i korekcji związanych ze starzeniem się zmian w skórze, ale także do leczenia, a raczej do wyrównania ulgi blizn. Wszyscy zostali wstrzyknięci na dno żwacza.

Poszukiwanie lepszych metod leczenia niedorozwojowych blizn doprowadziło nas do pomysłu wykorzystania w tym celu sztucznie wytworzonego analogu skóry - "odpowiednika skóry" (DE), w którym również zastosowano płynny kolagen. Warianty sztuczne substytuty skóry było wiele, ale idea sumie - do tworzenia elementów strukturalnych skóry właściwej podobnej do tkanki skórnej, która nie zostanie odrzucony w przypadku przeszczepów i miał dobre podłoże do kiełkowania własnych składników skóry właściwej i naskórka. Wiadomo, że podstawowymi składnikami strukturalnymi skóry właściwej są elementy komórkowe, włókniste i substancja śródmiąższowa. Elementy włókniste to głównie włókna kolagenu i elastyny, substancja śródmiąższowa - glikoproteiny, proteoglikany i glikozoaminoglikany. Głównym funkcjonalnym elementem komórkowym skóry właściwej jest fibroblast, populacja komórek fibroblastów jest źródłem prawie wszystkich składników strukturalnych skóry właściwej. Dlatego podczas tworzenia "substytutu skóry" większość naukowców używa substratu kolagenowego wymieszanego z fibroblastami i glikozoaminoglikanami. Powyżej w takiej czy innej postaci warstwy keratynocytów zastosowano do tworzenia polnosloynoy skóry i szybsze przywrócenie zdolność przeżywania przeszczepionych równoważnik skóry, co jest ułatwione przez liczne keratynocytów wydzielanych czynników wzrostu. Jeden z pierwszych wariantów "żywego odpowiednika skóry" zaproponowali w 1983 r. E.Bell i współautorzy. Fibroblasty skóry zmieszano z kolagenem, osoczem i podłożem wzrostowym, co doprowadziło do powstania żelu, na powierzchni którego hodowano keratynocyty. Wszystko to było hodowane przez 1-2 tygodnie w żyle, po czym odpowiednik skóry był uważany za dojrzały i był żywą tkanką w postaci półprzezroczystej elastycznej masy. Autorzy zaproponowali przeniesienie pełnej struktury skóry na powierzchnie rany u pacjentów palących. Jako podstawę dla równoważnik skóry, niektórzy autorzy stosowali gąbki kolagenowej lub matrycę kolagenu, proteoglikany i pokryte wypełniane fibroblastów hodowanych na szczycie którego autologicznych keratynocytów. W rezultacie powstał tak zwany trójwymiarowy model skóry. Do hodowli keratynocytów, przed przekazaniem ich do powierzchni rany, niektórzy autorzy także używany jako sztuczne osnowy podłoża kolagenu i glikozaminoglikanów chitozanu zwłok skóry świńskiej. 7-14 dni po rozpoczęciu hodowli, przeszczepiony na pełną skalę szczep zawierający skórę właściwą i naskórek przeszczepiono ranom pacjentów lub zwierząt.

Sztuczny substytut skóry został użyty nie tylko do przywrócenia skórze spalonej, ale także do testowania leków na cytotoksyczność, do badania czynników wzrostu in vitro.

Niewystarczające, w naszego punktu widzenia dermabrazja efektywności operacyjnej głębokich blizn hypotrophic w połączeniu z transferem IPC dał okazję spróbować wyrównać topografii skóry przez zaszczepienie wgłębienie hypotrophic blizna analogowy odpowiednik skórną. Substratem do utworzenia odpowiednika dermalnego był ciekły kolagen, uzyskany drogą laboratoryjną, w którym wprowadzono zawiesinę fibroblastów. Równoważnik skórę, jak również IPC utworzony w wyspecjalizowanym laboratorium biegłego w tej działalności i na dzień i na godzinę eksploatacji dostarczono w szklanej fiolce, w pojemniku z lodem do kliniki.

Operacyjne blizny szlifowania prowadzone w zwykły sposób po antyseptycznego traktowania skóry i znieczuleniu 2% lidokainy lub Novocaine lub artykainy. Po zmieleniu powierzchnia żwacza została wyrównana i w tym samym czasie stworzono warunki do wszczepiania hodowanych komórek lub kompozycji komórkowych. Następnie płynny żel kolagenowy chłodnia zaszczepiano fibroblastami został zastosowany w sterylnej łopatki na wypolerowanej powierzchni hypotrophic blizn (blizn w zagłębieniu), gdzie znajduje się pod wpływem temperatury polimeryzacji ciała.

W rezultacie, po 5-10 minutach, z kolagenu w stanie ciekłym z fibroblastami spolimeryzowanymi do postaci gęstego żelu. Po zagęszczeniu DE nałożono z góry bandaż z zawiesiną lub IPC na podłożu.

Ustalono wielowarstwowy sterylny opatrunek, podobnie jak przy transplantacji IPC. W zależności od powierzchni blizny, pokrycia rany, na której znajdowały się keratynocyty i rodzaju mielenia, bandaż został oderwany w ciągu 7 do 12 dni.

Metody leczenia skojarzonego hypotrophic blizn z zastosowaniem dermabrazja operacyjnego, a następnie przesunięcie w żwaczu wgłębienia „równoważnik skóry” i keratynocytach w wielowarstwowego zbiornika uprawianych na specjalnych powłok rany lub w postaci zawiesiny, można znacznie lepiej kosmetycznie dopuszczalne wyniki z zmniejszenie lub całkowite zniknięcie (osiągnąć -) szmatką. Skórny odpowiednik tworzy własną tkankę (skórę właściwą), blizny pozostają poniżej nowo utworzonej tkanki. IPC tworzy normalną grubość i aktywność funkcjonalną naskórka, dzięki czemu ogólny wygląd blizny na to wydaje się być znacząca poprawa przez kilka miesięcy.

Taką taktykę leczenia blizn hypotroficznych można obecnie nazwać optymalnymi w rozwiązywaniu tego problemu. Jednak wersja DE używana przez nas w postaci żelu kolagenowego z zaszczepionymi do niego fibroblastami nie jest bardzo wygodna w pracy. DE do pracy z bliznami hypotroficznymi powinno początkowo być grubsze, aby można je było umieścić w pogłębieniu blizn, rozprowadzić je. Po czym górna rana została nawinięta na keratynocyty. Można więc powiedzieć, że ten kierunek w pracy z bliznami hipotonicznymi jest tylko planowany, ale prognozy dotyczące jego dalszego rozwoju i badań są bardzo optymistyczne.

Złożoność i wysokie koszty uzyskania wielowarstwowych warstw keratynocytów, jako materiału terapeutycznego, stymulowały potrzebę poszukiwania innych wariantów kompozycji komórkowych. Naukowcy są zainteresowani hodowlą fibroblastów, które po przeszczepieniu na powierzchnie rany mają pod wieloma względami podobny efekt do wyników transplantacji keratynocytów, ale są znacznie prostszym i tańszym materiałem komórkowym. W naszych badaniach przeprowadziliśmy kilku pacjentów z hypotroficznymi bliznami za pomocą mezoterapii z użyciem zawiesiny fibroblastów do blizn.

Zawiesina fibroblastów w pożywce wzrostowej z 1,5-2 milionami komórek na ml. Podawano pod blizny za pomocą technik mezoterapii (mikropapulmonary, infiltrative). Liczba sesji terapeutycznych od 4 do 10, w zależności od okresu przedawnienia żwacza, wieku pacjenta i głębokości wady. Przerwa między sesjami to 7-10 dni. Z reguły wprowadzeniu zawiesiny autologicznych i allogenicznych fibroblastów towarzyszyła niewielka, szybko płynąca reakcja naczyniowa.

W wyniku badań klinicznych stwierdzono, że pod wpływem przeszczepionego IPC czas trwania reakcji zapalnej w skórze i blizny po dermabrazji operacyjnej zmniejsza się, a epitelializacja powierzchni rany przyspiesza średnio o 3-4 dni.

Podczas pracy z bliznami normotroficznymi i hipertroficznymi największe znaczenie ma przyspieszenie gojenia się nadżerek pooperacyjnych, ponieważ w tym tkwi możliwość uzyskania optymalnego efektu terapeutycznego.

Przeszczepienie odpowiednika dermalnego spowodowało wypełnienie (-) tkanki hypotroficznych blizn, wygładzenie ich reliefu, wygładzenie otaczającą skórą, co znacznie zmniejszyło powierzchnię blizn.

Wprowadzenie zawiesiny fibroblastów w blizny hypotroficzne również doprowadziło do wyrównania reliefu skóry i zmniejszenia obszaru blizn.

We wszystkich przypadkach transplantacji materiału komórkowego zauważono efekt działania, gdy przez kilka miesięcy dochodziło do poprawy estetycznego wyglądu blizn, które miały tendencję do przekształcania się w strukturę przypominającą dermoid.

Wszystkie obserwowane przez nas efekty są związane z realizacją potencjału biostymulacyjnego przez przeszczepione komórki. Nie mniej ważną rolę, jak nam się wydaje, ma fakt, że liczba warstw komórek w przeszczepach z reguły jest o 10-30% wyższa. W związku z tym całkowity potencjał komórkowy na jednostkę powierzchni jest już o 10-30% wyższy niż normalnie. Ponadto, najlepsze wyniki w transplantacji keratynocytów i fibroblastów uzyskano przez przeszczepienie materiału komórkowego od młodych zdrowych ludzi. Ten fakt nawiasem mówiąc przemawia na korzyść wykorzystania kultury alogenicznej uzyskanej od młodych i zdrowych dawców. Potencjał bioenergetyczny i informacyjny takiej kultury jest przenoszony do własnych komórek, czasem bardzo młodych odbiorców, dzięki czemu poprawia się "jakość" własnych tkanek i komórek.

Tak więc zastosowanie hodowli keratynocytów i fibroblastów pozwala:

• Przyspieszenie epitelializacji blizn po dermabrazji.
• Zmniejszają wygląd blizn, nie tylko ze względu na wyrównanie ich powierzchni z powierzchnią otaczającej skóry, ale również ze względu na tworzenie się na nich pełnego naskórka.
• Aby poprawić wyniki dermabrazji operacyjnej ze względu na wpływ cytokin przeszczepionych komórek na blizny, która ostatecznie przekształca się w strukturę przypominającą skórę.
• Aby uzyskać estetycznie o wiele bardziej akceptowalne wyniki leczenia pacjentów z bliznami i rozstępami o charakterze normotroficznym, hypotroficznym, przerostowym, atroficznym.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8], [9], [10], [11]