Wykorzystanie technologii komórkowych do poprawy wyglądu blizn

Współczesna nauka charakteryzuje się szybkim rozwojem wielu pokrewnych dyscyplin, zjednoczonych pod wspólną nazwą "biotechnologia". Ta gałąź nauki, w oparciu o najnowsze osiągnięcia w dziedzinie biologii, cytologii, genetyki molekularnej, inżynierii genetycznej, transplantantologii, ma na celu wykorzystać ogromny potencjał komórek roślinnych i zwierzęcych - podstawową jednostkę strukturalną wszystkich żywych istot. „Żywa komórka jest gotowy reaktor biotechnologicznym, w którym realizowane są nie tylko procesy, które prowadzą do powstania produktu końcowego, ale także szereg innych systemów ułatwiających utrzymanie aktywności katalitycznej na wysokim poziomie” - John Woodward, 1992. Rozpoczęcie nauki w komórce został wprowadzony w 1665, kiedy angielski fizyk R. Hooke stworzył pierwszy mikroskop i w komórkach znalezionych wtyczek - cellulae ("komórki"). W 1829 r. M. Schleiden i T. Schwann uzasadnili "teorię komórkową", która udowodniła, że wszystkie żywe stworzenia składają się z komórek. R.Virkhov w 1858 roku udowodnił, że w oparciu o wszystkie choroby narusza organizację strukturalną i metabolizm komórek. Stał się założycielem "patologii komórkowej". Podstawowy wkład do nauki komórki powstał w latach 1907-1911. R. Garrison i AA Maksimov, udowadniając możliwość hodowania komórek poza ciałem. Ich praca wykazała, że do hodowli komórek tkanki zwierzęce i części roślin powinny być mechanicznie odłączone na małe kawałki. Aby wyizolować komórki, tkanki wycina się ostrym nożem lub mikrotomem w cienkich odcinkach, około 0,5-1,0 mm. Fizyczny podział komórek nazywa się unieruchomieniem. Wyizolowane komórki otrzymuje się przez enzymatyczną dyspersję kawałków roślin lub tkanek. Po zmiażdżeniu za pomocą ostrych nożyczek kawałki traktuje się trypsyną lub kolagenazą, aby uzyskać zawiesinę - zawiesinę pojedynczych komórek lub ich mikroagregatów w specjalnym podłożu. Żele alginianu (alginian wapnia) są szeroko stosowane do unieruchamiania komórek roślinnych. Udowodniono, że unieruchomione komórki roślinne i zwierzęce zachowują zdolność do biosyntezy. Produkty biosyntezy komórkowej gromadzą się w komórkach, ich ekspresja następuje spontanicznie lub przy pomocy specjalnych substancji, które sprzyjają zwiększonej przepuszczalności błon komórkowych.

Hodowla komórek zwierzęcych jest procesem znacznie bardziej skomplikowanym niż hodowla komórek roślinnych, który wymaga specjalnego nowoczesnego sprzętu, wysokich technologii, obecności różnych pożywek, czynników wzrostu zaprojektowanych w celu zachowania żywotności komórek i utrzymywania ich w stanie wysokiej aktywności funkcjonalnej. Stwierdzono, że większość komórek tkanek twardych, takich jak nerki, wątroba i tkanki skóry, jest zależnych od powierzchni, więc in vitro można je hodować tylko w postaci cienkich warstw lub pojedynczych warstw bezpośrednio przyczepionych do powierzchni podłoża. Długowieczność, proliferacja i funkcjonalna stabilność komórek uzyskanych w wyniku enzymatycznego rozpraszania tkanki zależy w dużym stopniu od podłoża, na którym są hodowane. Wiadomo, że wszystkie komórki uzyskane z tkanek kręgowca mają ujemny ładunek powierzchniowy, tak że dodatnio naładowane substraty są odpowiednie do ich unieruchomienia. Izolowane komórki uzyskane bezpośrednio z całych tkanek można utrzymać w hodowli pierwotnej w stanie unieruchomienia, utrzymując wysoką swoistość i czułość przez 10-14 dni. Unieruchomione, zależne od powierzchni komórki odgrywają dziś ważną rolę w biologii, w szczególności ich rola jest ważna w badaniach klinicznych. Są one wykorzystywane do badania cykli rozwoju komórek, regulacji ich wzrostu i różnicowania, funkcjonalnych i morfologicznych różnic między komórkami prawidłowymi a nowotworowymi. Unieruchomione monowarstwy komórek są wykorzystywane w biotestach, do ilościowego oznaczania substancji biologicznie czynnych, a także do badania wpływu różnych leków i toksyn na nie. Ogromne zainteresowanie komórką, jako urządzeniem medycznym, wykazali lekarze wszystkich specjalności od kilkudziesięciu lat. W tym kierunku szybko rozwijają się technologie komórkowe.

Wraz z nadejściem terapii tkankowej i komórkowej, nazwa słynnego rosyjskiego naukowca V.P. Filatov, który w roku 1913 podwaliny dla nauk terapii tkanek studiuje rogówki zdrowych dawców do pacjentów z zaćmą .. Podczas działania rogówki przeszczepu, okazało się, że rogówki zachowane na zimno przez 1-3 dni w temperaturze -2 -4 stopnie C jest lepsze niż świeże. Stwierdzono zatem, że właściwości komórek wydzielają w niekorzystnych warunkach niektóre substancje, które pobudzają procesy życiowe w przeszczepionych tkankach i regenerują się w tkankach biorcy. Tkanka i komórki oddzielone od ciała są w stanie doświadczenia, czyli spowolnionego życia. W nich zatrzymuje się krążenie krwi, aw konsekwencji żywienie. Oddychanie tkanek jest niezwykle trudne, unerwienie i trofizm są zdenerwowane. Będąc w nowym stanie jakościowym, dostosowującym się do nowych warunków istnienia komórki, produkują specjalne substancje o właściwościach leczniczych. Substancje o charakterze niebiałkowym nazwane zostały przez V.P. Filatova jako stymulatory biogenne. To V.V.Skorodinskoy zestawie z materiału ze zwierząt i roślin, mogą być dowolnie ţ autoklawowano w temperaturze 120 ° C przez jedną godzinę, po okresie przechowywania w niekorzystnych warunkach, a nie tylko nie tracą aktywność, ale przeciwnie, jest wzmocnione dzięki wydajnością biologiczne stymulanty z tkanek w puszkach. Ponadto utraciły one właściwości antygenowe, co znacznie zmniejszyło możliwość odrzucenia. Sterylizowany materiał puszkowany wstrzykiwano do organizmu poprzez wszczepienie (przesadzanie) pod skórą lub w postaci iniekcji ekstraktów, uzyskując odpowiednie wyniki. Stwierdzono również, że tkanki płodu zawierają znacznie więcej biologicznie aktywnych substancji niż tkanki dorosłe, a niektóre czynniki występują tylko w zarodkach. Zaszczepiono tkanki płodowej organizm biorcy nie postrzegane jako obce na brak w składzie cytoplazmy białek błonowych odpowiedzialnych dla gatunku, tkanek i indywidualnych właściwości białek (głównego kompleksu zgodności tkankowej). W rezultacie inokulacja ludzkich tkanek płodowych do organizmu człowieka nie wyzwala mechanizmów obrony immunologicznej i reakcji niekompatybilności i odrzucenia. VP Filatov w praktyce medycznej szeroko stosowane ludzkie łożysko i skórę. Kursy leczenia składały się z 30-45 iniekcji ekstraktów tkankowych i 1-2 implantów z autoklawowanych tkanek.

Po rozpoczęciu badań z wykorzystaniem ludzkich i zwierzęcych tkanek i komórek, przeniósł swoje uogólnienia do świata roślin. Przeprowadzając eksperymenty z żywymi częściami roślin (aloes, babka, agawa, buraki, ziele dziurawca itp.), Stworzył im niekorzystne warunki, umieszczając wycięte liście w ciemnym miejscu, ponieważ do życia roślina potrzebuje światła. Z błotnistego torfu i torfu otrzymały również biogenne stymulatory, ponieważ powstają muły i torf z udziałem mikroflory i mikrofauny.

Nowa runda terapii tkanek rozwój otrzymała w latach 70., gdy zgromadzona wiedza i wieloletnie doświadczenie pozwoliły na zupełnie nowy poziom korzystania z tkanki i komórki zwierzęce i roślinne w leczeniu ludzi i przedłużyć jego aktywnej długowieczności. Tak więc w niektórych lokalnych klinik i wielu kobiet zagranicznych w fizjologicznej menopauzy, menopauzy lub tła przydatków na spowolnienie procesu starzenia, rozwoju miażdżycy, osteoporozy, zaburzeń układów odpornościowego, endokrynologicznych i nerwowego zaczął trzymać tkanek płodowych terapii tkanek łożyska, podwzgórzu, wątroby, jajniki, grasica i tarczycy. W jednym z najbardziej prestiżowych Gerontiusa-kosmetycznych klinik w Europie Zachodniej w tym samym celu przez dziesięciolecia stosowania ekstraktów zastrzyki, pochodzące z tkanek płodowych gruczołów płciowych owiec.

W naszym kraju szeroko stosowane jest również leczenie biostymulujące. Pacjentów z różnymi chorobami do niedawna aktywne podawano zastrzyki łożyska ekstraktów, aloes, kolanhoe, stonecrops dużych (biosed) FIBS, peloidodistillyat, peloidin, torfot, gumizol wytworzono procedurą Filatov. Obecnie w aptekach jest prawie niemożliwe, aby kupić te wysokiej wydajności i niskich kosztów tkanek domowe przetwory pochodzenia zwierzęcego, roślinnego i mineralnego.

Bazowy uzyskanie różnych preparatów odżywczych z tkanek i narządów człowieka importowanych jak Rumalon (z tkanki chrzęstnej i szpiku kostnego) aktovegin (z krwi cielęcej) (bydło wyciąg krwi) solkoseril i leków krajowych - szklisty ( oko szkliste bydło) kerakol (od rogówki bydła) splenin (od śledzionie bydła) epitalyamin (od regionu epitalyamo-nasadowej) również znajdują się badania Filatov. Wspólną właściwością wszystkich preparatów tkankowych jest ogólny wpływ na cały organizm. Tak więc, „terapia tkanka” akademik Filatov był podstawą większości współczesnych wydarzeń i trendów w chirurgii, ginekologii i immunologii, ginekoloii, gerontologii, combustiology, dermatologii i komórki oraz produktów związanych z jej biosyntezy-kosmetologii.

Problem przeszczepiania tkanek niepokoił ludzkość od czasów starożytnych. Tak więc w papirusie Ebersa, datowanym na 8000 pne, już wspomniano o transplantacji tkanek, aby zrekompensować defekty w poszczególnych częściach ciała. W "Księdze życia" indyjskiego naukowca Sushruty, który żył na 1000 litrów. BC istnieje szczegółowy opis przywrócenia nosa ze skóry na policzkach i czole.

Zapotrzebowanie na skórę dawcy wzrosło proporcjonalnie do wzrostu liczby operacji plastycznych i rekonstrukcyjnych. W związku z tym zaczął stosować skórę ze zwłok i płodu. Nie było potrzeby ochrony zasobów dawców i określić możliwości ludzkich tkanek skóry zwierząt zamiennych, różnych postaciach symulacji skóry. I to właśnie w tej dziedzinie naukowców pracujących w 1941 roku, kiedy po raz pierwszy pokazał P.Medovar zasadniczą możliwość wzrostu keratynocytów in vitro. Kolejnym ważnym etapem w rozwoju technologii komórkowej była praca Karasek i M. Charlton, który w 1971 przeprowadzonego pierwszego pomyślnego przeszczepiania autologicznych keratynocytów z hodowli pierwotnej ran królika stosując jako substrat do hodowli KC żelu kolagenowego, poprawiając w ten sposób proliferacji komórkowej w kulturze. J.Rheinvvald. H Zielony. Opracowali technologię do seryjnej uprawy dużych ilości ludzkich keratynocytów. W 1979 roku Green i współpracownicy odkryli perspektywy zastosowań medycznych hodowli komórkowej keratynocytów w odbudowie skóry z rozległymi oparzeniami, po czym technika ta jest stale poprawie, to zaczął być używany przez chirurgów spalić ośrodki za granicą iw naszym kraju.

W studiując żywych komórek wykazały, że komórki nie tylko dostarczyć biogenne stymulatory pochodzenia nie-białkowego, ale również wiele cytokin, neuroprzekaźniki, czynniki wzrostu, polipeptydy, które odgrywają ważną rolę w regulacji homeostazy całego organizmu. Stwierdzono, że w różnych komórkach i tkankach zawarte są bioregulatory peptydowe. Które mają szeroki zakres efektów biologicznych i koordynują rozwój i funkcjonowanie systemów wielokomórkowych. Rozpoczęła się era stosowania kultury komórkowej jako środka terapeutycznego. W naszym kraju tansplantatsiyu zawieszenia fibroblastów i komórek keratynocytów warstwy laminowane w ostatniej dekadzie mamy przyjęte combustiology. Taki aktywny udział w transplantacji komórek skóry spalane ze względu na konieczność szybkiego zamknięcia dużych powierzchni spalania i deficytu dawcy skóry. Możliwość kawałek skóry wielkości odróżnić komórki, które pokrywają powierzchnię rany w 1000 roku, a nawet 10 000 razy większa niż powierzchnia skóry dawcy bardzo atrakcyjny i ważne Combustiology i spalają pacjentów. Procent warstw wszczepieniu keratynocytu zależy od strefy spalania, wieku i stanu zdrowia pacjenta, od 71,5 do 93,6%. Zainteresowanie transplantacji keratynocytów i fibroblastów związany nie tylko ze zdolnością do szybkiego zamknięcia ubytku w skórze, ale również na fakt, że te przeszczepy mają silne bioaktywny potencjalnie poprawić wygląd tkanek pochodzących od transplantacji. Nowotwór naczyń krwionośnych, usuwanie niedotlenienie poprawy troficznych, przyspieszone dojrzewanie niedojrzałego tkanki - że podstawa morfo funkcyjne tych pozytywnych zmian zachodzących w wyniku uwalniania przeszczepionych komórek, czynniki wzrostu i cytokiny. W ten sposób, dzięki wprowadzeniu do praktyki klinicznej nowoczesnych komórkowych technologie przeszczepie wielokomórkowych warstw autologicznych i allogenicznych keratynocytów i fibroblastów na rozległych powierzchniach ran, Combustiology mieli okazję nie tylko do zmniejszenia śmiertelności zwolniony z dużym odsetkiem zmian skórnych, ale także do poprawy tkanki jakość blizn, które w sposób nieunikniony występuje w miejscu oparzeń IIb i IIIa i 6 stopni. Combustiologists Doświadczenie uzyskane w leczeniu ran powierzchni u pacjentów po oparzeniach zaproponował pomysł wykorzystania jest już zmodyfikowana metoda Greena w dermatologii i praktyce chirurgicznej w różnych skóry i patologii kosmetycznego (owrzodzeń troficznych, bielactwo, znamię, naskórka, usuwania tatuaży, związane z wiekiem zmiany skórne, jak również poprawić wygląd blizn).

Zastosowanie allogenicznych keratynocytów w chirurgii, dermatologii i combustiology ma kilka zalet w stosunku primeneiya autologicznych keratynocytów jako materiał komórkowy mogą być przygotowane z wyprzedzeniem w nieograniczonych ilościach, zachowane i używane w razie potrzeby. Wiadomo również, że allogeniczne KC mają zmniejszoną aktywność antygenową, ponieważ komórki Langerhansa, nośniki antygenów kompleksu HLA, są tracone w hodowli in vitro. Na korzyść stosowania allogenicznego KC, mówi się również, że są one zastępowane przez autologiczne po przeszczepie, zgodnie z danymi różnych autorów w zakresie od 10 dni do 3 miesięcy. W związku z tym banki komórkowe powstały w wielu krajach, dzięki czemu komórki mogą być produkowane we właściwej ilości i we właściwym czasie. Takie banki znajdują się w Niemczech, USA, Japonii.

Zainteresowanie wykorzystaniem technologii komórkowych w dermatologii i kosmetologii ze względu na fakt, że „kompozycja komórkowa” Carry silny potencjał bioenergetyczny i informacyjną, dzięki której możliwe jest uzyskanie jakościowo nowe wyniki leczenia. Autiny uwalniane przez przeszczepione komórki (czynniki wzrostu, cytokiny, tlenek azotu itp.) Działają przede wszystkim na własne fibroblasty, zwiększając ich aktywność syntetyczną i proliferacyjną. Fakt ten jest szczególnie atrakcyjny dla naukowców, ponieważ fibroblast jest kluczową komórką skóry właściwej, której stan funkcjonalny zależy od stanu wszystkich warstw skóry. Wiadomo również, że po urazie skóry Cauter, laserowego, igły i inne narzędzia, od szpiku kostnego, tkanki tłuszczowej i kapilarnej perycyty jest uzupełniana ze świeżych prekursorów macierzystych fibroblastów skóry, która promuje „odmłodzenie” puli własnych komórek. Aktywnie zaczynają syntezy czynników, kolagen, elastyna, enzymy, glikozaminoglikany, wzrostu i inne biologicznie aktywne cząsteczki, które prowadzą do zwiększenia nawilżenia i unaczynienie w skórze właściwej, poprawiając jego wytrzymałość