Genetycznie zmodyfikowane komórki układu odpornościowego wykazują potencjał zapobiegania odrzuceniu narządu

W czasopiśmie Frontiers in Immunology zaprezentowano terapię komórkową, która może „rozbroić” pacjentów z wysoką immunowrażliwością przed przeszczepem narządu. Naukowcy zmodyfikowali komórki T regulatorowe (Treg) za pomocą chimerycznego receptora przeciwciał anty-HLA (CHAR) – w istocie, za pomocą „przynęty” w postaci białka HLA-A2, które aktywuje limfocyty Treg w kontakcie z limfocytami B wytwarzającymi przeciwciała anty-HLA-A2. In vitro te CHAR-Treg rozpoznawały i hamowały produkcję IgG o wysokim powinowactwie u pacjentów z pre-sensytyzacją, zachowując jednocześnie „tożsamość” limfocytów Treg (FOXP3/HELIOS) i nie zabijając komórek docelowych. Daje to szansę na ukierunkowaną desensytyzację bez całkowitej immunosupresji.

Tło badania

W transplantologii głównym „konfliktem interesów” są przeciwciała przeciwko antygenom HLA dawcy. Po transfuzjach, ciążach lub wcześniejszych przeszczepach u biorcy często rozwija się uczulenie: przeciwciała IgG anty-HLA i komórki pamięci B, gotowe do szybkiego „rozwinięcia się”, krążą już we krwi. Tacy pacjenci są mniej kompatybilni, dłużej czekają na przeszczep i mają wyższe ryzyko ostrego i przewlekłego odrzucenia przeszczepu. Standardowe protokoły odczulania (plazmafereza/immunoadsorpcja, wysokie dawki immunoglobulin dożylnych, rytuksymab, inhibitory proteasomów, imlifidaza) działają szeroko i w sposób ogólny: redukują ogólną pulę przeciwciał lub komórek, ale nie są ukierunkowane na konkretne „niebezpieczne” klony i wiążą się z ryzykiem toksyczności i infekcji.

Układ odpornościowy ma swój własny „hamulec” – limfocyty T regulatorowe (Treg), które utrzymują tolerancję na „obce” czynniki. W ostatnich latach terapia z użyciem limfocytów Treg stała się realną strategią kliniczną, ale w wersji „domyślnej” jest ona nieselektywna: wstrzykiwane komórki nie rozróżniają, przeciwko któremu antygenowi rozwija się reakcja. Dlatego naukowcy próbują „nakręcić cel” – wyposażyć limfocyty Treg w sztuczne receptory, które są aktywowane tylko wtedy, gdy napotkają odpowiedni sygnał. Tak narodził się pomysł receptorów chimerycznych (podobnych w założeniu do technologii CAR), ale zbudowanych nie na bazie anty-CD19, lecz z domen samych cząsteczek HLA, tak aby limfocyty Treg były aktywowane w pobliżu limfocytów B, produkujących odpowiednie przeciwciała anty-HLA.

Krytyczne wymagania dla takich „celowanych” komórek Treg są dwojakie. Po pierwsze, muszą one pozostać prawdziwymi Treg (utrzymać programy FOXP3/HELIOS i supresorowe), nie przechodząc w fenotyp efektorowy na tle silnej stymulacji. Po drugie, ich działanie musi być ukierunkowane: precyzyjnie tłumić allospecyficzne klony B i plazmoblasty, minimalnie ingerując w resztę układu odpornościowego, aby nie zwiększać kosztów leczenia infekcjami i ryzykiem nowotworu. Jeśli ten problem zostanie rozwiązany, pojawi się metoda miękkiej, precyzyjnej desensytyzacji przed przeszczepem i zmniejszenia potrzeby całkowitej immunosupresji po nim.

Wreszcie, kontekst praktyczny: u niektórych pacjentów sensytyzacja jest ukierunkowana na jeden lub dwa „problematyczne” allele (np. HLA-A2), które blokują dostęp do narządów. Terapia komórkowa ukierunkowana na takie „wąskie gardła” może poszerzyć pulę zgodnych dawców, przyspieszyć przeszczep i zmniejszyć częstość odrzutów przeciwciał – szczególnie u dzieci i biorców z długotrwałym „historycznym” kontaktem z obcymi HLA (wielokrotne transfuzje, powtarzane przeszczepy). Dlatego też, udowodnienie słuszności teorii dotyczącej limfocytów Treg indukowanych anty-HLA stanowi ważny krok w kierunku spersonalizowanej immunomodulacji w transplantologii.

Jak zbudowana jest nowa komórka

• Budowa: domena zewnątrzkomórkowa HLA-A2 + zawias CD8 + transbłonowy CD28 + sygnałowy „tandem” CD28-CD3ζ. Receptor ten jest aktywowany, gdy na powierzchni komórki B znajduje się przeciwciało anty-HLA-A2.
• Specyficzność: CHAR-Treg „rozpoczyna” działanie swoiście na limfocytach B anty-A2, nie wpływając na inną odporność.
• Profil Safe Treg: po aktywacji nie tracą znaczników linii (FOXP3, HELIOS), tzn. pozostają „hamulcami” i nie zamieniają się w „gaz”.
• Niecytotoksyczne: W przeciwieństwie do zmodyfikowanych konwencjonalnych komórek CD4 T z tym samym receptorem, komórki CHAR-Treg nie zabijają komórek anty-A2, lecz hamują ich funkcję.

Co dokładnie zostało sprawdzone?

• Model pacjenta ex vivo: mononuklearne komórki krwi pacjentów uwrażliwionych na HLA-A2 zostały przygotowane za pomocą stymulatorów (HLA-A2-K562), następnie dodano CHAR-Treg i zmierzono IgG (ELISA) oraz skład komórek B (spektralna cytometria przepływowa, UMAP).
• Wynik: po 48 godzinach i 5 dniach produkcja IgG uległa znacznemu zmniejszeniu (w 2 z 3 próbek pacjentów), odsetek komórek B ogólnie zmniejszył się bez wyraźnego „wyboru” między podtypami (naiwne, pamięciowe, strefy brzeżnej, plazmoblasty).
• Interpretacja autorów: Czułość testu można zwiększyć, stosując test ELISA specyficzny dla przeciwciał A2 oraz oddzielną ocenę klas IgG; konieczne jest przeprowadzenie badania u większej liczby pacjentów i w celu wykrycia innych alleli HLA (np. A24).

Dlaczego jest to ważne w przypadku przeszczepów?

Obecnie 20% biorców pierwotnych i do 75% biorców powtórnych ma już przeciwciała anty-HLA, co drastycznie zawęża pulę odpowiednich dawców i wymusza stosowanie wysokich dawek immunosupresji. Nieselektywne protokoły odczulania (plazmafereza, „zerowanie” limfocytów B) nie działają sprawnie i są obarczone powikłaniami – od infekcji po nefrotoksyczność i neurotoksyczność (szczególnie u dzieci). Celowane limfocyty Treg, działające wyłącznie przeciwko „niebezpiecznym” klonom B, teoretycznie umożliwiają szerszy dostęp do narządów i zmniejszenie ogólnej toksyczności po przeszczepie.

• Główne potencjalne korzyści:
  • Przed przeszczepem: „usuń” uczulenie na konkretny antygen HLA i porównaj pacjenta z pacjentem nieuczulonym.
  • Po przeszczepie: należy zmniejszyć dawki podstawowych leków immunosupresyjnych i ryzyko przewlekłego odrzucenia przeszczepu przez przeciwciała.
  • Poza przeszczepem: Podejście to ma potencjalne zastosowanie w leczeniu zakażenia wirusem WZW typu C, a nawet w przypadkach poronień, gdy u matki wytwarzają się przeciwciała przeciwko antygenowi HLA ojca.

Co mówią sami autorzy i doniesienia prasowe

Zespół MUSC (USA) nazywa tę pracę „pierwszym krokiem w kierunku ukierunkowanej immunosupresji: tłumienia dokładnie tych komórek B, które zagrażają przeszczepowi, przy jednoczesnym pozostawieniu reszty układu odpornościowego w spokoju”. W komunikacie podkreślono potencjał ograniczenia skutków ubocznych i „wyrównania szans” dla osób, u których przeszczep jest obecnie praktycznie niemożliwy z powodu silnego uczulenia.

Gdzie są granice i co dalej?

• To dowód słuszności koncepcji in vitro/ex vivo na niewielkiej liczbie próbek pacjentów: jest za wcześnie, aby mówić o klinice. Potrzebne są pierwsze badania na ludziach, walidacja dla różnych HLA i dogłębna analiza mechanistyczna (czynniki wydzielane, supresja zależna od kontaktu, transkryptomika CHAR-Treg).
• Ważne jest, aby określić swoistość i bezpieczeństwo: upewnić się, że supresja jest ściśle ukierunkowana na antygen i nie zaburza innych gałęzi odporności.

O czym pamiętać

• Limfocyty Treg zmodyfikowane przy użyciu „przynęty” HLA-A2 rozpoznają i tłumią limfocyty B, które są niebezpieczne dla przeszczepu.
• W warunkach in vitro zmniejszają one produkcję IgG u pacjentów uczulonych i utrzymują stabilność fenotypu Treg bez cytotoksyczności.
• To ukierunkowana alternatywa dla nieselektywnej desensytyzacji, która może potencjalnie zmniejszyć dawki leków immunosupresyjnych i zwiększyć dostęp do przeszczepów. Kolejnym krokiem są badania kliniczne.

Źródło: Valentín-Quiroga J. i in. Chimeryczne ludzkie limfocyty T regulatorowe, zmodyfikowane genetycznie przeciwko receptorowi przeciwciała anty-HLA, hamują limfocyty B specyficzne dla alloantygenów u biorców przeszczepów poddanych wstępnej sensytyzacji. Frontiers in Immunology, opublikowano 15 sierpnia 2025 r. DOI: 10.3389/fimmu.2025.1601385