Hepatitt B -virus

Wirusowe zapalenie wątroby typu B jest chorobą zakaźną osoby charakteryzującej się selektywnym uszkodzeniem wątroby przez wirus. Ta forma zapalenia wątroby jest najgroźniejsza w skutkach wśród wszystkich znanych postaci wirusowego zapalenia wątroby. Jego czynnikiem sprawczym jest wirus zapalenia wątroby typu B (HBV).

Pierwszy antygen z wirusa zapalenia wątroby typu B został wykryty B. Blumberg 1964 w surowicy australijskiego Aborigine i patogen stwierdzono w 1970 roku (D. Dane i in.) I otrzymał nazwę cząstek Dane, ponieważ nie ma pewności, że , że to naprawdę jest wirus, a nie jego składniki. Następnie wszystkie wątpliwości zniknęły, ponieważ w cząstkach Duńczyka znaleziono genomowe DNA i wirusową zależną od DNA polimerazę DNA. Wirion zawiera trzy główne antygeny, dla których w 1974 r. Wprowadzono następujące oznaczenia:

• HBsAg jest antygen powierzchniowy lub rozpuszczalny lub antygen australijski.
• HBcAg jest antygenem rdzeniowym (kogengen).
• HBeAg - antygen E, jest zlokalizowany w jądrze wirionu i, w przeciwieństwie HBcAg nie tylko obecny w wirionu, ale również cyrkuluje we krwi w wolnej postaci lub w postaci kompleksu z przeciwciałami monoklonalnymi anty-HBeAg. Jest wydzielany do krwi z hepatocytów z aktywną replikacją wirusa HBV.

Antygen powierzchniowy - HBsAg - występuje w postaci trzech morfologicznie różnych wariantów: 1) reprezentuje superkapsyd całego wirionu; 2) w dużych ilościach występuje w postaci cząstek o średnicy 20 nm, o kulistym kształcie; 3) w postaci filamentów o długości 230 nm. Chemicznie są identyczne. Kompozycja ma całkowitą antygen HBsAg oraz dwie pary wzajemnie wykluczających się determinantami specyficznego typu: M / r / o, więc istnieją cztery głównym podtypem HBsAg (a zatem i HBV) adw ADR, ayw i aur. Antygen a zapewnia tworzenie wspólnej odporności krzyżowej na wszystkie podtypy wirusa.

W rzeczywistości, wirion, cząstka Daina, ma sferyczny kształt i średnicę 42 nm. Superkapsyd wirionu składa się z trzech białek: głównego (głównego), dużego i średniego. Genom jest zamknięty w kapsydzie i jest reprezentowany przez dwuniciowe pierścieniowe DNA o masie 1,6 MD. DNA składa się z około 3200 nukleotydów, ale jego "plus" jest o 20-50% krótszy niż znak minus. Przy końcu 5 'długiego filamentu białko swoiste wobec wirusa jest kowalencyjnie związane. Końce 5 'obu nici są komplementarne i tworzą "lepkie" sekwencje o długości 300 nukleotydów, tak że filamenty są zamknięte w pierścieniu. Zawartość G + C w DNA wirionowym wynosi 48-49% molowych. W rdzeniu wirionu znajduje się poza tym genomowa DNA-wirusowa zależna od DNA polimeraza DNA. DNA "minus" HBV zawiera tylko cztery geny (S, C, P i X), ale są one zorganizowane bardzo zwięźle. Geny S, C, P, X silnie nakładają się i kontrolują syntezę następujących produktów. Gene S koduje syntezę głównego białka płaszcza i zawiera wszystkie informacje o powierzchniowym antygenie HBsAg. Ponadto koduje syntezę średnich i dużych białek otoczki. Białka zawierają wspólny koniec COOH, ale ich translacja rozpoczyna się od trzech różnych kodonów inicjatorów. Gen C koduje syntezę białek kapsydu (HBcAg i HBeAg); chociaż białka te są kodowane przez pojedynczy gen, sposoby ich translacji są różne. Gene P jest największy. Obejmuje część wszystkich trzech innych genów i koduje enzymy niezbędne do replikacji wirusa. W szczególności koduje on odwrotną transkryptazę, domenę enzymu RNA-aza H, 5'-końcowe białko łańcucha "minus". Gen X koduje białka, które regulują ekspresję (ekspresję) wszystkich genów wirusowych, w szczególności białko o masie 17 kD, które jest transaktywatorem transkrypcji genu.

Białka tworzące antygen powierzchniowy występują w postaci glikozylowanej (gp) i nieglikozylowanej. Glikozylowane są gp27, gp33, gp36 i gp42 (liczby są oznaczone jako mw kD). Supercapsid HBV składa się z głównego lub podstawowego białka S (92%); średnie białko M (4%) i duże lub długie białko L (1%).

• Główne białko, p24 / gp27 lub główne białko (białko S), jest głównym składnikiem otoczki HBV. W przypadku braku innych białek otoczki ulega polimeryzacji i tworzy sferyczne cząstki o średnicy 20 nm, które składają się ze 100 cząsteczek polipeptydu.
• Duże białko p39 / gp42 lub długie białko (białko L) występuje we wszystkich trzech formach HBsAg. Odgrywa ważną rolę w morfogenezie wirionów i ich wyjściu z komórki. L-białko zawiera sekwencję białka M, które są uzupełnione przez sekwencji N-końcowych 108 (ayw) lub 119 (adw ADR, ayr) reszty aminokwasowe kodowane obszar NPE-Sl-S-genów.
• Środkowe białko - gp33 / gp36 lub białko M jest również obecne we wszystkich trzech formach morfologicznych HBsAg. Białko M zawiera na N-końcu region o długości 55 aminokwasów kodowany przez region pre-52 genu S. Zakłada się, że miejsce to odgrywa ważną rolę w rozpoznawaniu wirusa zapalenia wątroby typu B przez komórki wątroby o ograniczonym zasięgu gospodarza (człowiek, małpa szympansa). Sekwencje białkowe kodowane przez regiony npe-S genu S mają wysoką immunogenność, a ich determinanty znajdują się na powierzchni wirionu. Dlatego przeciwciała przeciwko tym antygenom odgrywają ważną rolę w tworzeniu odporności na wirusowe zapalenie wątroby typu B.

Synteza białek wirusowych jest ściśle kontrolowana na poziomie transkrypcji i translacji. W transkrypcji genomu wirusa syntetyzuje się dwa typy mRNA:

• mniejsza - 2100 nukleotydów - koduje główne i środkowe białka błony;
• duże - 3500 nukleotydów, tj. Dłuższe niż sam genomowy DNA; zawiera końcowe powtórzenia o długości 100 nukleotydów.

Ten rodzaj mRNA koduje białko kapsydu i produkty genu P. Jest także matrycą do replikacji wirusowego DNA. Jako część genomu znajdują się wzmacniacze (wzmacniacze transkrypcji) - elementy regulatorowe, które aktywują ekspresję wszystkich genów wirusowych i działają głównie w komórkach wątroby. W szczególności gen S ulega ekspresji na bardzo wysokim poziomie tylko w komórkach wątroby i pod wpływem hormonów steroidowych. Ta okoliczność wyjaśnia, dlaczego przewlekłe wirusowe zapalenie wątroby typu B i rak wątroby (wątrobiak) obserwuje się częściej u mężczyzn niż u kobiet z niższym poziomem hormonów steroidowych.

Inne elementy regulatorowe wirusa zapalenia wątroby B modulują (kontrolują) poziomy syntezy poszczególnych białek. Na przykład duże białko syntetyzuje się tylko w niewielkich ilościach. Większość na powierzchni zakaźnych wirionów. A główne białko i, w mniejszym stopniu, środkowe białko są syntetyzowane w ogromnych ilościach i pozostawiają komórki w powierzchniowych cząstkach antygenu, które w surowicy zawierają wiele razy więcej niż dojrzałe wiriony. Liczba cząstek antygenu powierzchniowego może wynosić 1011-1013 na 1 ml krwi (kilkaset μg).

Wirus Hepatitis B jest izolowany w nowej rodzinie wirusów - Hepadnaviridae, rodzaj Orthohepadnavirus. Podobne hepadnawirusy znaleziono u różnych zwierząt (białek ziemskich, świstaków, wiewiórek, kaczek po pekińsku).

Reprodukcja hepadnawirusów odbywa się w niecodzienny sposób. W szczególności replikacja genomowego DNA zachodzi poprzez pośredni związek - RNA, tj. Z mechanizmem odwrotnej transkrypcji.

Cykl życia wirusa zapalenia wątroby typu B.

• Adsorpcja w komórce.
• Penetracja do komórek poprzez mechanizm mediacji przez receptor endocytozę (graniczy dołu -> graniczy fiolki -> -> lizosomów wyjścia i wejścia nukleokapsydu wirusowego genomu do jąder hepatocytów).
• Rozmnażanie wewnątrzkomórkowe.

Podczas penetracji do komórki, krótki ("plus") łańcuch DNA wydłuża się (kończy). W jądrze komórkowa zależna od DNA polimeraza RNA syntetyzuje RNA o długości 3500 nukleotydów (pregenes) i mniejszych mRNA do syntezy białek wirusowych. Następnie pregene i wirusową polimerazę DNA pakuje się do nowo zsyntetyzowanego kapsydu, który przenosi się do cytoplazmy. Tutaj dochodzi do odwrotnej transkrypcji pregenoma. To syntetyzuje nowy "minus" - definicja DNA. Po zakończeniu syntezy minusowego DNA pregenomowy RNA ulega zniszczeniu. Wirionowa polimeraza DNA w łańcuchu "minus" syntetyzuje łańcuch "plus". Wirusowy DNA, teraz dwuniciowy, może istnieć w komórce przez dość długi czas i powrócić do jądra w następnym cyklu replikacji. Jeżeli nowa cząstka wirusa nie poddaje się dalszej replikacji nukleokapsydu przepuszczając przez błonę komórkową, pokryte superkapsidom, pączek z komórki i jest natychmiast zatrzymywany krótkie rozszerzenie „plus” łańcuch DNA. Dlatego długość tego wątku jest różna. W typowej postaci ostrego zapalenia wątroby B markerów serologicznych następujących kolejno występują we krwi: HBsAg, HBeAg i przeciwciała (IgM, IgG) anty-HBcAg. Anty-HBeAg i anty-HBsAg.

Kompozycja wirusa zapalenia wątroby typu B mają onkogen, ale stwierdzono, że wnikając do chromosomu komórkowego (w różnych jego sekcjach), wirusowy DNA może wywołać u nich różnymi ustawieniami genetycznego - usunięciu, translokację, amplifikacji, który może prowadzić do rozwoju raka wątroby - jeden najpoważniejszych skutków wirusowego zapalenia wątroby typu B.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8],

Oporność wirusa zapalenia wątroby typu B.

Wirus zapalenia wątroby typu B jest wysoce oporny. W temperaturze pokojowej zachowuje żywotność przez 3 miesiące, w stanie zamrożonym - przez kilka lat. Wirus jest całkowicie inaktywowany w autoklawie (120 ° C) pod chłodnicą zwrotną przez 30 minut, a suche powietrze, w temperaturze 180 „C w ciągu 60 minut, w temperaturze 60 ° C. - przez 10 godzin odpornych w środowisku kwaśnym, lecz jest zniszczona w środowisku alkalicznym. Wirus umiera po potraktowaniu H202, chloraminą, formaliną, fenolem i promieniowaniem UV.

Patogeneza i objawy zapalenia wątroby typu B

Wirus jest hematogennie wstrzykiwany bezpośrednio do wątroby. W patogenezie zapalenia wątroby ważną rolę odgrywa odpowiedź autoimmunologiczna humoralna i komórkowa. Zakłada się, że utrata hepatocytów spowodowane nie tyle z bezpośredniego działania samego wirusa, ale gospodarza immunologiczne reakcje, które występują w związku ze zmianą w błonie komórkowej białka wirusowe, które powodują pojawienie się przeciwciał do komórek wątroby. Dlatego rozwój przewlekłego zapalenia wątroby i marskości wątroby można uznać za chorobę autoimmunologiczną.

Komórkowe reakcje autoimmunologiczne na białka wirusowe zawarte w błonie hepatocytowej są mediowane przez limfocyty T-cytotoksyczne i inne komórki zabójców wątroby. Dlatego też, ostrą dystrofię wątroby można uznać za reakcję odrzucenia swoistego heterograftu.

Okres inkubacji trwa od 45 do 180 dni, średnio od 60 do 90 dni. Przebieg kliniczny zapalenia wątroby typu B charakteryzuje się dużą różnorodnością; Choroba ta może wystąpić: w formie utajonej, wykrywalny za pomocą metod laboratoryjnych, w typowej formie żółtaczkowe i złośliwych postaci zabójczo zakończenia. Czas trwania fazy przed ozimą wynosi od jednego dnia do kilku tygodni. Okres icteric jest zwykle długi i charakteryzują się dobrze zdefiniowanymi objawów (żółtaczka, hiperbilirubinemii, ciemnego moczu, żółtaczka twardówki). Forma przewlekły obserwuje się u 15-20% pacjentów, a 90% z nich do rozwoju przewlekłego zapalenia wątroby typu B. Pacjenci z przewlekłą postaci jaka jest często obserwowane procesów autoimmunologicznych towarzyszy wysokiej zawartości przeciwciał protivopechenochnyh, które są wykrywane przez enzymatyczny test immunosorpcyjny (IPM). U dzieci, zapalenie wątroby typu B występuje w formie łagodnej, a często bez rozwoju żółtaczki u niemowląt - najczęściej bezobjawowy.

Oporność poinfekcyjna (humoralna i komórkowa) jest długa, przez całe życie, z powodu przeciwciał neutralizujących wirusa (anty-HBsAg) przy braku antygenu powierzchniowego we krwi. Często obserwowano ukrytą immunizację z powodu wielokrotnego kontaktu z HBV, co jest przyczyną powszechnej odporności na wirusa wśród populacji. Zazwyczaj pacjenci z ostrą postacią wirusowego zapalenia wątroby typu B wracają do zdrowia w miarę gromadzenia się przeciwciał. Jednak w niektórych przypadkach, pomimo wysokiego poziomu antygenu wirusowego we krwi (okoliczność wyjaśniająca, dlaczego najczęściej występuje infekcja pozajelitowa), przeciwciała przeciwko niemu nie są wytwarzane. Wirus pozostaje w wątrobie, a osoba przez długi czas, czasami na całe życie, staje się chronicznym nosicielem. Ta okoliczność jest oczywiście związana ze słabą odpowiedzią immunologiczną. Jednym z najczęstszych wyników przewlekłego wirusowego zapalenia wątroby typu B jest marskość i rak wątroby, który rozwija się po okresie utajonym do 30-50 lat.

Epidemiologia zapalenia wątroby typu B

Źródłem zakażenia wirusem zapalenia wątroby typu B jest tylko osoba. W przeciwieństwie do poprzednich reprezentacje, że zakażenie wirusem zapalenia wątroby typu B zachodzi wyłącznie drogą pozajelitową, jest obecnie udowodniono, że znajduje się w różnych wydzielin i wydalin :. Wydzielania śliny, nosogardzieli, kał, płyn łzowy, nasienia, krew menstruacyjna, i tak dalej,, zakażenie następuje nie tylko drogą pozajelitową, a także seksualną i pionowo (z matki na płód), T, np. Praktycznie zakażenie wirusem zapalenia wątroby typu B mogą na wiele sposobów.

Wirusowe zapalenie wątroby typu B na świecie zabiło tak wielu ludzi, jak podczas wszystkich lat II wojny światowej. Liczba nosicieli HBV, według WHO, wynosi od 0,1 do 20% populacji różnych krajów lub regionów.

[9], [10], [11], [12], [13], [14], [15], [16],

Rozpoznanie WZW typu B

Obecnie główną metodą diagnozy zapalenia wątroby typu B jest zastosowanie odwrotnej pasywnej reakcji hemaglutynacji (ROSGA) w celu wykrycia wirusa lub jego powierzchniowego antygenu, HBsAg. Jak już wspomniano, krew z powierzchniowego antygenu zawiera wiele razy więcej niż sam wirus (100-1000 razy). W przypadku reakcji ROPGA erytrocyty uczula się za pomocą przeciwciał przeciw wirusowi zapalenia wątroby typu B. Jeśli we krwi znajduje się antygen, następuje reakcja hemaglutynacji. ROPGA jest prosty, wygodny, bardzo specyficzny. W celu wykrycia przeciwciał antygenu wirusa HBsAg stosuje się różne metody immunologiczne (DSC, RPGA, IFM, RIM itp.). Dodatkowo, do wykrywania HBV i jego antygenów stosuje się warianty PCR.

Do wykrywania przeciwciał przeciwko wirusowemu antygenowi (HBsAg) w surowicy pacjenta można stosować różne metody immunologiczne (DSC, RPGA, reakcja strącania, IFM, RIM, itd.).

[17], [18], [19], [20], [21], [22],

Szczególne zapobieganie wirusowemu zapaleniu wątroby typu B

Biorąc pod uwagę wysoką zachorowalność na wirusowe zapalenie wątroby typu B, a także fakt, że na świecie istnieje wiele nosicieli HBV, szczepienia WHO przeciwko wirusowemu zapaleniu wątroby typu B są obowiązkowe i muszą być przeprowadzone w pierwszym roku życia. Do szczepienia sugeruje się dwa typy szczepionek. Aby przygotować jedną z nich, jako nośnik surowca stosuje się osocze nośników wirusów, ponieważ antygen wirusa jest zawarty w ilościach wystarczających do przygotowania szczepionki. Głównym warunkiem przygotowania tego typu szczepionki jest ich całkowite bezpieczeństwo, tj. Całkowita inaktywacja wirusa, którą zapewnia technologia przygotowania szczepionki. Aby wytworzyć szczepionkę innego typu, stosuje się metody inżynierii genetycznej, w szczególności, do wytworzenia materiału antygenowego stosuje się rekombinowany klon drożdży, który wytwarza antygen powierzchniowy wirusa zapalenia wątroby typu B.

Obie szczepionki są bardzo skuteczne (chronią 95% zaszczepionych). Czas trwania odporności poszczepiennej wynosi nie mniej niż 5-6 lat. Opracowano szczepionki zarówno dla dorosłych, jak i dla niemowląt i małych dzieci - najważniejszy element globalnej walki z wirusowym zapaleniem wątroby typu B. Pełny przebieg szczepienia składa się z trzech wstrzyknięć:

Dawkuję - zaraz po urodzeniu; II dawka - po 1-2 miesiącach; III dawka - do końca pierwszego roku życia.

Szczepionki zawarte w rozszerzonego programu immunizacji WHO i wyrównany z kalendarzem jego wykonania (zgodnie z zaleceniami WHO na 1 roku życia prowadzono szczepień przeciwko gruźlicy, polio, wirusem zapalenia wątroby typu B, odrze, tężcowi, błonicy, krztuścowi).

Gammaglobulin, zawierający przeciwciała przeciwko HBV, jest stosowany do immunoprofilaktyki biernej u osób, które miały kontakt z pacjentem z zapaleniem wątroby typu B.

W leczeniu zapalenia wątroby typu B (ostre i przewlekłe formy) należy stosować interferon i amiksynę (w celu indukcji syntezy endogennej). W leczeniu przewlekłego wirusowego zapalenia wątroby typu B skuteczny jest nowy lamiwudyna (syntetyczny nukleozyd).