PCR av hepatitt C

HCV w materiale zazwyczaj nie występuje.

W przeciwieństwie do serologicznych metod diagnozy wirusowego zapalenia wątroby typu C, w którym wykrywa się przeciwciała przeciwko HCV, PCR może bezpośrednio wykryć obecność HCV RNA i określić jego stężenie w badanym materiale. Test ma specyficzną specyficzność i wysoką czułość: dziesięć cząsteczek RNA HCV w materiale testowym wystarcza do jego wykrycia. Wykrywanie przeciwciał przeciwko HCV potwierdza tylko fakt zakażenia pacjenta, ale nie pozwala na ocenę aktywności procesu zakaźnego (o replikacji wirusa) i prognozy choroby. Ponadto, przeciwciała HCV wykrywano w krwi pacjentów z ostrym i przewlekłym zapaleniem wątroby, a także u pacjentów, którzy są chorzy i odzyskiwane, a często przeciwciała występują we krwi kilka miesięcy po wystąpieniu objawów klinicznych choroby, co czyni go trudnym do zdiagnozowania. Wykrywanie HCV we krwi za pomocą PCR jest bardziej informacyjną metodą diagnostyczną. Wykrywanie HCV RNA w PCR świadczy o wiremii, pozwala ocenić replikację wirusa w ciele i służy jako jedno z kryteriów skuteczności terapii antywirusowej. Wykrywanie HCV RNA przez PCR we wczesnych stadiach rozwoju infekcji wirusowej na tle całkowitego braku jakichkolwiek markerów serologicznych może służyć jako najwcześniejszy dowód zakażenia. Jednak wyizolowane wykrywanie RNA HCV na tle całkowitego braku jakichkolwiek innych markerów serologicznych nie może całkowicie wyeliminować fałszywie dodatniego wyniku PCR. W takich przypadkach konieczna jest kompleksowa ocena badań klinicznych, biochemicznych i morfologicznych, z powtarzanym powtarzanym potwierdzeniem obecności zakażenia PCR.

Ogromne znaczenie ma zastosowanie metody PCR u pacjentów z przewlekłym wirusowym zapaleniem wątroby typu C, ponieważ w większości z nich nie ma korelacji między obecnością replikacji wirusa a aktywnością enzymów wątrobowych. W takich przypadkach tylko PCR pozwala na ocenę obecności replikacji wirusa, szczególnie jeśli wynik końcowy jest wyrażony ilościowo. W większości przypadków zniknięcie HCV RNA z surowicy krwi następuje później niż normalizacja enzymów wątrobowych, więc ich normalizacja nie może służyć jako podstawa do zaprzestania leczenia przeciwwirusowego.

Jest praktycznie ważne, aby wykryć HCV RNA w celu zbadania metodą PCR nie tylko surowicy, ale także limfocytów, hepatobiobaptamu. Wirusy można wykryć 2-3 razy częściej w tkance wątroby niż w surowicy. Oceniając wyniki testu surowicy krwi na HCV RNA, należy pamiętać, że wiremia może mieć charakter fluktuacyjny (jak zmiana aktywności enzymu). Dlatego po pozytywnych wynikach badania PCR można uzyskać wynik ujemny i na odwrót. W takich przypadkach, aby rozwiać wątpliwości, które się pojawiają, lepiej jest badać hepatobiobaty.

Wykrywanie HCV RNA w materiale za pomocą PCR służy do następujących celów:

• rozwiązanie wątpliwych wyników badań serologicznych;
• różnicowanie wirusowego zapalenia wątroby typu C z innych postaci zapalenia wątroby;
• wykrycie ostrego stadium choroby w porównaniu z przeniesioną infekcją lub kontaktem; stopień zakażenia noworodków matek seropozytywnych HCV;
• monitorowanie skuteczności leczenia przeciwwirusowego.

Pacjenci z podejrzeniem wirusowego zapalenia wątroby typu C:

• dawcy;
• osoby z czynnikami ryzyka;
• osoby o zwiększonej aktywności ALT;
• pacjenci z ostrym zapaleniem wątroby

Wszystkie powyższe cechy oceny wyników i podejścia do diagnozy HCV za pomocą PCR odnoszą się również do innych infekcji.

Metoda PCR umożliwia nie tylko wykrycie RNA HCV w badanym materiale, ale także ustalenie jego genotypu. Oznaczenie genotypu wirusa ma ogromne znaczenie dla selekcji pacjentów z przewlekłym wirusowym zapaleniem wątroby typu C w celu prowadzenia leczenia interferonem alfa i rybawiryną. Wskazania laboratoryjne do leczenia przewlekłego wirusowego zapalenia wątroby typu C z interferonem alfa są następujące:

• zwiększona aktywność transaminazy;
• obecność HCV RNA we krwi;
• genotyp 1 HCV;
• wysoka wiremia we krwi (ponad 8 × 10 ⁵ kopii / ml).

Obecnie zawartość RNA HCV w surowicy krwi można oznaczyć ilościowo metodą PCR, co ma ogromne znaczenie dla kontroli leczenia interferonem alfa. Poziom wiremii ocenia się następująco: dla RNA HCV od 10 ² do 10 ⁴ kopii / ml - słabe; od 10 ⁵ do 10 ⁷ kopii / ml - średnia, powyżej 10 ⁸ kopii / ml - wysoka. Przy skutecznym leczeniu zmniejsza się poziom wiremii.

[1], [2], [3], [4]