Ekspert medyczny artykułu
Nowe publikacje
Reakcja łańcuchowa polimerazy (PCR) w diagnostyce chorób zakaźnych
Ostatnia recenzja: 05.07.2025

Cała zawartość iLive jest sprawdzana medycznie lub sprawdzana pod względem faktycznym, aby zapewnić jak największą dokładność faktyczną.
Mamy ścisłe wytyczne dotyczące pozyskiwania i tylko linki do renomowanych serwisów medialnych, akademickich instytucji badawczych i, o ile to możliwe, recenzowanych badań medycznych. Zauważ, że liczby w nawiasach ([1], [2] itd.) Są linkami do tych badań, które można kliknąć.
Jeśli uważasz, że któraś z naszych treści jest niedokładna, nieaktualna lub w inny sposób wątpliwa, wybierz ją i naciśnij Ctrl + Enter.
PCR jest jedną z metod diagnostyki DNA, która pozwala zwiększyć liczbę kopii wykrytego odcinka genomu (DNA) bakterii lub wirusów milion razy przy użyciu enzymu polimerazy DNA. Badany odcinek kwasu nukleinowego specyficzny dla danego genomu jest wielokrotnie namnażany (amplifikowany), co pozwala na jego identyfikację. Najpierw cząsteczka DNA bakterii lub wirusów jest dzielona na dwa łańcuchy poprzez ogrzewanie, następnie w obecności syntetyzowanych primerów DNA (sekwencja nukleotydów jest specyficzna dla oznaczanego genomu) wiążą się one z komplementarnymi odcinkami DNA, a drugi łańcuch kwasu nukleinowego jest syntetyzowany po każdym primerze w obecności termostabilnej polimerazy DNA. Otrzymuje się dwie cząsteczki DNA. Proces jest powtarzany wielokrotnie. Do diagnostyki wystarczy jedna cząsteczka DNA, czyli jedna cząsteczka bakterii lub wirusa. Wprowadzenie do reakcji dodatkowego etapu - syntezy DNA na cząsteczce RNA przy użyciu enzymu odwrotnej transkryptazy - umożliwiło badanie wirusów RNA, takich jak wirus HCV. PCR to trzyetapowy proces, który powtarza się cyklicznie: denaturacja, wyżarzanie primerów, synteza DNA (polimeryzacja). Zsyntetyzowana ilość DNA jest identyfikowana za pomocą ELISA lub elektroforezy.
Do badania PCR można wykorzystywać różne materiały biologiczne - surowicę lub osocze krwi, zeskrobiny z cewki moczowej, biopsję, płyn opłucnowy, płyn mózgowo-rdzeniowy itp. PCR stosuje się przede wszystkim w diagnostyce chorób zakaźnych, takich jak wirusowe zapalenie wątroby typu B, wirusowe zapalenie wątroby typu C, wirusowe zapalenie wątroby typu D, zakażenie wirusem CMV, choroby przenoszone drogą płciową (rzeżączka, zakażenia chlamydią, mykoplazmą, ureaplazmą), gruźlica, zakażenie wirusem HIV itp.
Zalety metody PCR w diagnostyce chorób zakaźnych w porównaniu z innymi metodami badawczymi są następujące:
- czynnik zakaźny można wykryć w dowolnym środowisku biologicznym organizmu, także w materiale pobranym podczas biopsji;
- możliwe jest rozpoznanie chorób zakaźnych na najwcześniejszym etapie choroby;
- możliwa jest ilościowa ocena wyników badań (ile wirusów lub bakterii znajduje się w badanym materiale);
- wysoka czułość metody; przykładowo czułość PCR w wykrywaniu DNA wirusa zapalenia wątroby typu B we krwi wynosi 0,001 pg/ml (ok. 4×10 2 kopii/ml), natomiast czułość metody hybrydyzacji DNA z wykorzystaniem sond rozgałęzionych wynosi 2,1 pg/ml (ok. 7×10 5 kopii/ml).