Sauzern-blotting
Ostatnia recenzja: 23.04.2024
Cała zawartość iLive jest sprawdzana medycznie lub sprawdzana pod względem faktycznym, aby zapewnić jak największą dokładność faktyczną.
Mamy ścisłe wytyczne dotyczące pozyskiwania i tylko linki do renomowanych serwisów medialnych, akademickich instytucji badawczych i, o ile to możliwe, recenzowanych badań medycznych. Zauważ, że liczby w nawiasach ([1], [2] itd.) Są linkami do tych badań, które można kliknąć.
Jeśli uważasz, że któraś z naszych treści jest niedokładna, nieaktualna lub w inny sposób wątpliwa, wybierz ją i naciśnij Ctrl + Enter.
Southern blotting (opracowany przez E. Southern i R. Daviesa w 1975 r.) Jest główną metodą, dzięki której zidentyfikowane są geny danej choroby. W tym celu DNA z komórek pacjenta jest ekstrahowane i przetwarzane za pomocą jednego z endonukleaz restrykcyjnych (lub kilku). Otrzymane fragmenty poddaje się elektroforezie, co pozwala na ich wymiarowanie (mniejsze fragmenty poruszają się szybciej w porach żelu). Następnie fragmenty są przenoszone (przedrukowane) do filtra nitrocelulozowego, na który nakłada się znakowaną radioaktywnie sondę. Sonda wiąże się tylko z sekwencją komplementarną. Następnie metodą autoradiografii określa się pozycję pożądanego fragmentu genomowego DNA na elektroforegramie.
Hybrydyzacja z preparatów RNA znakowanych sond DNA lub DNA, kap zadawanego stałej matrycy, bez uprzedniego ograniczeń i elektroforezy nazywa Dot i gniazdo hybrydyzacji w zależności od konfiguracji plamek DNA na filtrze (okrągłe lub wydłużone, odpowiednio).
[