Ekspert medyczny artykułu
Nowe publikacje
Southern blotting
Ostatnia recenzja: 05.07.2025
Cała zawartość iLive jest sprawdzana medycznie lub sprawdzana pod względem faktycznym, aby zapewnić jak największą dokładność faktyczną.
Mamy ścisłe wytyczne dotyczące pozyskiwania i tylko linki do renomowanych serwisów medialnych, akademickich instytucji badawczych i, o ile to możliwe, recenzowanych badań medycznych. Zauważ, że liczby w nawiasach ([1], [2] itd.) Są linkami do tych badań, które można kliknąć.
Jeśli uważasz, że któraś z naszych treści jest niedokładna, nieaktualna lub w inny sposób wątpliwa, wybierz ją i naciśnij Ctrl + Enter.
Blotowanie Southerna (opracowane przez E. Southerna i R. Davisa w 1975 r.) jest główną metodą obecnie stosowaną do identyfikacji genów konkretnej choroby. W tym celu DNA jest ekstrahowane z komórek pacjenta i traktowane jedną lub kilkoma endonukleazami restrykcyjnymi. Powstałe fragmenty są poddawane elektroforezie, która umożliwia ich rozdzielenie według wielkości (mniejsze fragmenty przemieszczają się przez pory żelu szybciej). Następnie fragmenty są przenoszone (przedrukowywane) na filtr nitrocelulozowy, na którym nakładana jest radioaktywnie znakowana sonda. Sonda wiąże się tylko z sekwencją komplementarną. Następnie za pomocą autoradiografii określa się pozycję pożądanego fragmentu genomowego DNA na elektroforogramie.
Hybrydyzacja z użyciem znakowanej sondy DNA, preparatów DNA lub RNA nanoszonych kroplami na stałą matrycę bez wstępnego restrykcji i elektroforezy, nazywana jest hybrydyzacją punktową lub szczelinową, w zależności od konfiguracji plamki DNA na filtrze (odpowiednio okrągła lub podłużna).
[