Agregacja płytek krwi z ristocetyną (czynnik von Willebranda)

Wartości referencyjne (normy) aktywności czynnika von Willebranda wynoszą 58-166%.

Czynnik von Willebranda jest syntetyzowany przez komórki śródbłonka i megakariocyty. Jest niezbędny do prawidłowej adhezji płytek krwi i ma zdolność do wydłużania okresu półtrwania czynnika VIII. Czynnik krzepnięcia osocza VIII - antyhemofilowa globulina A - krąży we krwi jako kompleks trzech podjednostek oznaczonych jako VIII-k (jednostka krzepnięcia), VIII-Ag (główny marker antygenowy) i VIII-vWF (czynnik von Willebranda związany z VIII-Ag). Uważa się, że czynnik von Willebranda reguluje syntezę części krzepnięcia antyhemofilowej globuliny A (VIII-k) i bierze udział w hemostazie naczyniowo-płytkowej.

Choroba von Willebranda jest chorobą dziedziczną charakteryzującą się wydłużonym czasem krwawienia, obniżoną aktywnością kofaktora ristocetyny i obniżoną (w różnym stopniu) aktywnością koagulantu czynnika VIII. Objawy kliniczne choroby są podobne do objawów trombocytopatii. Jednak u pacjentów ze znacznie obniżoną aktywnością czynnika VIII mogą wystąpić krwiaki i krwotok śródmózgowy.

Na podstawie badań laboratoryjnych pozwalających na określenie struktury i aktywności czynnika von Willebranda wyróżnia się następujące postacie choroby.

• Typ I (70% wszystkich przypadków) charakteryzuje się niewielkim obniżeniem kofaktora ristocetyny (czynnika von Willebranda) i aktywności koagulacyjnej (VIII-k) przy prawidłowej strukturze makromolekularnej czynnika von Willebranda.
• Typ II: opiera się na selektywnym niedoborze wielkocząsteczkowych polimerów czynnika von Willebranda spowodowanym zaburzeniami struktury tego białka.
  • Typ IIB powstaje w wyniku zwiększonej interakcji pomiędzy czynnikiem von Willebranda i płytkami krwi, a zwiększony klirens agregatów płytkowych prowadzi do trombocytopenii.
• Typ III charakteryzuje się ciężkim niedoborem ilościowym czynnika von Willebranda, powodującym klinicznie istotne obniżenie aktywności czynnika VIII (VIII-k).

Zawartość czynnika von Willebranda oznacza się w przypadkach, gdy czas krwawienia jest wydłużony, liczba płytek krwi mieści się w wartościach referencyjnych i nie ma oczywistych przyczyn dysfunkcji płytek krwi. Aby ocenić czynnik von Willebranda, oznacza się ilościową zawartość czynnika von Willebranda (badanie aktywności kofaktora ristocetyny), bada się aglutynację płytek krwi wywołaną ristocetyną i strukturę antygenową czynnika von Willebranda związanego z czynnikiem VIII (VIII-vWF).

Oznaczenie agregacji płytek krwi z ristocetyną w osoczu służy do ilościowej oceny czynnika von Willebranda. Wykazano liniową zależność między stopniem agregacji ristocetyny a ilością czynnika von Willebranda. Metoda opiera się na zdolności tego antybiotyku (ristocetyny) do stymulowania in vitro interakcji czynnika von Willebranda z glikoproteiną płytkową Ib. W większości przypadków choroby von Willebranda obserwuje się upośledzoną agregację ristocetyny przy prawidłowej odpowiedzi na ADP, kolagen i adrenalinę. Upośledzona agregacja ristocetyny jest również wykrywana w makrocytarnej trombodystrofii Bernarda-Souliera (brak receptorów agregacji ristocetyny na błonie płytek krwi). Do różnicowania stosuje się test z dodatkiem normalnego osocza: w chorobie von Willebranda agregacja ristocetyny normalizuje się po dodaniu normalnego osocza, podczas gdy w zespole Bernarda-Souliera tak się nie dzieje.

Badanie można również wykorzystać w diagnostyce różnicowej hemofilii A (niedobór czynnika VIII) i choroby von Willebranda. W hemofilii zawartość VIII-k jest znacznie obniżona, a zawartość VIII-fB mieści się w granicach normy. Klinicznie różnica ta objawia się tym, że w hemofilii występuje typ krwiaka o zwiększonym krwawieniu, a w chorobie von Willebranda typ wybroczynowo-krwiakowy.

Aglutynacja płytek krwi wywołana rystocetyną jest zmniejszona w większości przypadków choroby von Willebranda, z wyjątkiem typu IIB.

Struktura antygenowa czynnika von Willebranda związanego z czynnikiem VIII (VIII-vWF) jest wykrywana różnymi metodami immunologicznymi, a dystrybucja czynnika von Willebranda według wielkości cząsteczek jest określana za pomocą elektroforezy w żelu agarozowym. Testy te są wykorzystywane do ustalenia rodzaju choroby von Willebranda.

Badanie agregacji płytek krwi z różnymi induktorami przeprowadza się nie tylko w celu identyfikacji zaburzeń funkcji agregacji płytek krwi. Badanie to pozwala ocenić skuteczność terapii przeciwpłytkowej, dobrać indywidualne dawki leków i przeprowadzić monitorowanie leków.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]