Rhabdowirusy są czynnikami wywołującymi wściekliznę i pęcherzykowe zapalenie jamy ustnej

Wścieklizna to ostra choroba zakaźna wywoływana przez rabdowirusa, która występuje, gdy człowiek zostanie ugryziony przez chore zwierzę lub gdy ślina chorego zwierzęcia wejdzie w kontakt z uszkodzoną skórą lub błonami śluzowymi. Ta infekcja ośrodkowego układu nerwowego jest prawie zawsze śmiertelna.

Pierwsze wzmianki o chorobie przenoszonej przez ugryzienie psa i bardzo podobnej w opisie do wścieklizny znajdują się na glinianych tabliczkach klinowych starożytnej Mezopotamii, datowanych na III tysiąclecie p.n.e. Wirus został wyizolowany i osłabiony przez przejścia przez mózg królika w 1882 r. przez I. Pasteura.

Zapalenie pęcherzykowe jamy ustnej - choroba koni, bydła i świń, czasami ludzi, która przebiega łagodnie - jest również wywoływana przez rabdowirusa. Wirus ten jest słabo patogenny dla ludzi. Został zbadany lepiej niż wszystkie rabdowirusy.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ]

Cykl życia

Rabdowirusy to rodzina obejmująca trzy rodzaje: Vesiculovirus (10 wirusów ssaków, typowym jest wirus zapalenia pęcherzykowego jamy ustnej, czyli VSV); yssavirus (6 serologicznie powiązanych wirusów, typowym jest wirus wścieklizny); Sigmavirus (jedynym przedstawicielem jest wirus sigma-Drosophila). Sześć wirusów wywołujących choroby ryb i 13 wirusów atakujących rośliny pozostaje niesklasyfikowanych. Rabdowirusy charakteryzują się wirionem w kształcie pręta lub pocisku: 60-400 nm długości i 60-85 nm szerokości. Cząsteczki są otoczone dwuwarstwową błoną lipidową podobną do błony z wystającymi kolcami o długości 10 nm i szerokości 3 nm. Pod błoną znajduje się rybonukleokapsyd o symetrii helisy, w której paski są widoczne pod mikroskopem elektronowym. Genom rabdowirusów jest reprezentowany przez negatywną jednoniciową liniową niefragmentowaną cząsteczkę RNA o masie cząsteczkowej 3,8 MDa; znaleziono pięć genów kodujących syntezę białek strukturalnych i ustalono kolejność ich ułożenia. Na końcu 3' znajduje się gen białka nukleokapsydu N (50 kDa). Następnie znajduje się gen białka NSV (30 kDa), jednego ze składników wirusowej transkryptazy, który jest częścią nukleokapsydu. Następny gen koduje białko macierzy M (30 kDa) i wyścieła dwuwarstwową błonę lipidową od wewnątrz. Następnie znajduje się gen białka G (65 kDa), zewnętrznego glikoproteiny wirusowego superkapsydu. Na końcu 5' znajduje się gen wysokocząsteczkowego składnika wirusowej transkryptazy, białka L (160 kDa).

Oddziaływanie rabdowirusów z komórkami i ich rozmnażanie przebiega według następującego schematu: adsorpcja wirusa na komórce (glikoproteina G) - wniknięcie do komórki przez endocytozę - fuzja z błoną lizosomu - deproteinizacja wirusa. Pod wpływem transkryptazy wirionu (polimerazy RNA) powstaje cRNA, które służy jako matryca do syntezy vRNA i pełni funkcję mRNA. Następnie na rybosomach komórki gospodarza syntetyzowane są białka specyficzne dla wirusa. Białka M i G są osadzone w błonie plazmatycznej. Nukleokapsyd powstały podczas oddziaływania vRNA z białkami N, L i NS, przechodząc przez błonę, zostaje otoczony superkapsydem. Dojrzały wirion oddziela się od komórki przez pączkowanie.

Wirus wścieklizny jest bardzo podobny do wirusa pęcherzykowego zapalenia jamy ustnej pod względem struktury i cech reprodukcji wewnątrzkomórkowej. Ważną cechą tych wirusów jest wyraźne hamowanie procesów biosyntezy białek w komórce gospodarza poprzez blokowanie inicjacji translacji. Istnieje kilka serowariantów wirusów pęcherzykowego zapalenia jamy ustnej, które różnią się białkiem G, które jest również antygenem ochronnym.

Wirusy te dobrze rozmnażają się w zarodkach kurcząt, komórkach nerek nowonarodzonych chomików i w hodowlach ludzkich komórek diploidalnych. W hodowlach komórkowych wirus zapalenia pęcherzykowego jamy ustnej zwykle powoduje efekty cytopatyczne i śmierć komórek, a czasami symplastogenezę.

Wirus wścieklizny ma szeroki zakres żywicieli. Wszystkie zwierzęta stałocieplne są na niego wrażliwe. Stopień patogeniczności różnych szczepów wirusów wścieklizny dla różnych zwierząt nie jest taki sam. U niektórych gatunków nietoperzy wirus przystosował się tylko do gruczołów ślinowych, nie powodując objawów choroby; zakażenie innych zwierząt zawsze prowadzi do śmierci.

Szczepy wirusów wścieklizny krążące w naturze wśród zwierząt nazywane są szczepami ulicznymi. Powodują one choroby o dość długim okresie inkubacji i zwykle tworzą specyficzne ciała inkluzyjne w cytoplazmie komórek. Zakażone zwierzęta mogą doświadczać długiego okresu pobudzenia i agresywności. Wirus może przenikać do gruczołów ślinowych i ośrodkowego układu nerwowego. Kolejne przejścia w mózgu królików prowadzą do powstania utrwalonego wirusa, który nie jest w stanie dalej się rozmnażać w żadnych komórkach poza komórkami nerwowymi. Utrwalony wirus rozmnaża się szybko, okres inkubacji jest krótki, wtrącenia w komórkach występują rzadko. Wirus ten jest patogenny tylko dla królików.

Wirus wścieklizny nie jest zbyt stabilny w środowisku zewnętrznym, szybko ulega inaktywacji pod wpływem promieni ultrafioletowych lub światła słonecznego. Po ugotowaniu ginie po 2 minutach, w temperaturze 60 °C - po 5 minutach. Szybko ulega inaktywacji pod wpływem roztworów lizolu, chloraminy, fenolu, rozpuszczalników tłuszczowych i trypsyny. W zwłokach zwierząt, szczególnie w niskich temperaturach, przeżywa do 4 miesięcy.

Odporność

Ponieważ wścieklizna jest śmiertelna, nie badano odporności po zakażeniu. Ustalono, że przeciwciała mogą tworzyć się w trakcie choroby i po szczepieniu. Odporność po szczepieniu trwa do 1 roku.

Epidemiologia wścieklizny

Wścieklizna jest typową chorobą odzwierzęcą. Głównym źródłem i rezerwuarem wirusa są dzikie i domowe zwierzęta mięsożerne: psy, koty, wilki, szakale, lisy, skunksy, mangusty, nietoperze. Choroba jest zwykle przenoszona przez ugryzienie lub ślinienie się na uszkodzonej skórze lub błonach śluzowych, ponieważ wirus namnaża się w gruczołach ślinowych zwierzęcia. Chore zwierzę jest zaraźliwe nie tylko w czasie choroby, ale także w okresie inkubacji trwającym 2-3 dni, czasami dłużej, zanim pojawią się pierwsze objawy choroby.

[ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ]

Objawy wścieklizny

Pierwotna reprodukcja wirusa wścieklizny zachodzi w tkance mięśniowej w pobliżu bramek wejściowych, następnie patogen wnika do receptorów obwodowych nerwów czuciowych i wchodzi do ośrodkowego układu nerwowego poprzez endoneurium komórek Schwanna lub przestrzenie okołonerwowe. Tam wirus reprodukuje się w neuronach hipokampa, rdzenia przedłużonego, nerwach czaszkowych i zwojach współczulnych, powodując zmiany zapalne, dystroficzne i martwicze w układzie nerwowym. W tym okresie wirus reprodukuje się również w komórkach gruczołów ślinowych.

Najkrótszy okres inkubacji występuje przy ukąszeniach głowy i rąk, dłuższy - przy ukąszeniach kończyn dolnych; na ogół waha się od 8 do 90 dni. W rozwoju choroby wyróżnia się trzy stadia: prekursorowe (depresja), pobudzenie, paraliż. Na początku pojawia się niepokój, strach, lęk, nieprzyjemne odczucia w okolicy ukąszenia. Po 1-3 dniach występuje wyraźne pobudzenie, skurcze mięśni oddechowych i połykania, pojawia się wyraźny wołofobia (wodofobia to druga nazwa tej choroby). Charakterystyczne dla tego okresu są agresja, halucynacje słuchowe i wzrokowe. Następnie rozwija się paraliż, a po 5-7 dniach od wystąpienia choroby następuje śmierć z powodu porażenia ośrodków sercowego lub oddechowego.

Diagnostyka laboratoryjna wścieklizny

Wściekliznę diagnozuje się metodami wirusoskopowymi, biologicznymi i serologicznymi. Tkanka mózgowa (kora mózgowa i móżdżek, róg Ammona, rdzeń przedłużony) oraz tkanka gruczołów ślinowych badane są w preparatach histologicznych lub rozmazach martwych zwierząt i ludzi. Specyficzne inkluzje eozynofilowe (ciałka Babesha-Negriego) znajdują się w komórkach piramidalnych tkanki mózgowej. Znajdują się one w cytoplazmie w pobliżu jądra i są skupiskami wirusowych nukleokapsydów. Ich pojawienie się jest spowodowane trudnym dojrzewaniem wirionów w komórkach nerwowych. Ciała Babesha-Negriego wykrywa się za pomocą specjalnych metod barwienia (Romanovsky-Giemsa, Mann, Turevich, Muromtsev itp.). Mają one charakterystyczną ziarnistą strukturę z granulkami zasadochłonnymi na tle acidofilnym, ich wielkość wynosi 4-10 μm. Wadą tej metody jest to, że można ją stosować dopiero po śmierci człowieka lub zwierzęcia.

Antygen wirusowy można wykryć w tych samych preparatach za pomocą bezpośredniej lub pośredniej reakcji immunofluorescencyjnej.

Wirus wścieklizny można wyizolować ze śliny chorych ludzi lub zwierząt, a także ze świeżego materiału autopsyjnego (tkanki mózgowej, tkanki podżuchwowej ślinianki) poprzez zakażenie śródmózgowe białych myszy i królików lub chomików - domięśniowo. U zwierząt rozwija się paraliż, a następnie śmierć. Mózg martwego zwierzęcia należy zbadać w celu wykrycia ciałek Babesa-Negriego lub antygenu wirusowego za pomocą reakcji immunofluorescencyjnej.

Przeciwciała można wykryć u osób zaszczepionych za pomocą neutralizacji, wiązania dopełniacza, immunofluorescencji i reakcji immunosorbentu (RIM i IFM).

Konkretne zapobieganie i leczenie wścieklizny

Zapobieganie wściekliźnie polega na zwalczaniu wścieklizny u zwierząt i zapobieganiu rozwojowi choroby u osób, które zostały ugryzione lub polizane przez chore zwierzę. Program eliminacji wścieklizny u zwierząt lądowych należy rozpatrywać w dwóch aspektach:

1. eradykacja wścieklizny u psów w miastach i
2. poprawa naturalnych ognisk zakażenia wścieklizną.

Doświadczenia wielu krajów przekonująco dowodzą możliwości kontrolowania miejskich epizootii poprzez rejestrowanie i szczepienie psów. Jednak w celu całkowitego wyeliminowania zakażenia wścieklizną konieczne jest udoskonalenie jej naturalnych ognisk, a eksterminacja dzikich drapieżników daje jedynie tymczasowy i lokalny efekt i grozi rozwojem niepożądanych skutków środowiskowych. Za granicą istnieje już duże pozytywne doświadczenie w zapobieganiu wściekliźnie wśród zwierząt dzikich (lisów, szopów) poprzez karmienie ich przynętami zawierającymi szczepionkę. Doustne szczepionki przeciw wściekliźnie są uważane za bardzo obiecujące w tym względzie: żywa modyfikowana szczepionka z całego wirionu z atenuowanych szczepów szczepionkowych (SAD-Bern, Vnukovo-32) oraz rekombinowana genetycznie modyfikowana szczepionka doustna wykorzystująca wirusa ospy jako wektor, ekspresująca gen białka G wirusa wścieklizny.

W przypadku ukąszeń lub ślinienia się należy dokładnie umyć ranę lub skórę w miejscu kontaktu śliny wodą z mydłem, przypalić ranę roztworem jodu w alkoholu i rozpocząć profilaktykę swoistą szczepionką przeciw wściekliźnie i gamma-globuliną przeciw wściekliźnie. Zamiast wcześniej stosowanej wysoce reaktogennej szczepionki Fermiego (z tkanki mózgowej owiec zakażonych utrwalonym wirusem), obecnie w celu zapobiegania chorobie zaleca się szczepionkę przeciw wściekliźnie inaktywowaną hodowlą, którą wykonuje się na hodowli komórkowej zakażonej atenuowanym wirusem wścieklizny (szczep Wnukowo-32). Szczepienie terapeutyczne i profilaktyczne w nagłych przypadkach przeprowadza się szczepionką lub szczepionką w połączeniu z gamma-globuliną przeciw wściekliźnie według schematów określonych w instrukcji ich stosowania. Schemat szczepienia ustala się na podstawie ciężkości ukąszenia, jego lokalizacji, czasu, jaki upłynął od ukąszenia, informacji o ukąszonym zwierzęciu i innych okoliczności.