Ogólna analiza płynu mózgowo-rdzeniowego

Ogólna analiza płynu mózgowo-rdzeniowego obejmuje zliczenie liczby i składu uformowanych elementów krwi. Normalnie 1 μl płynu mózgowo-rdzeniowego zawiera 4-6 komórek (limfocytów). W procesach patologicznych (zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych, zapalenie mózgu, procesy objętościowe, ostra niewydolność krążenia mózgowego) liczba elementów komórkowych wzrasta. W ropnym zapaleniu opon mózgowo-rdzeniowych neutrofile pojawiają się w dużych ilościach w płynie mózgowo-rdzeniowym (do kilkudziesięciu tysięcy w 1 μl), w surowiczym zapaleniu opon mózgowo-rdzeniowych liczba komórek wzrasta od kilkudziesięciu do 1-2 tysięcy za sprawą limfocytów. Stosunek neutrofili do limfocytów oblicza się w procentach (cytogram). Często wykrywa się i liczy liczbę erytrocytów. Ponadto w płynie mózgowo-rdzeniowym można wykryć eozynofile (w chorobach pasożytniczych ośrodkowego układu nerwowego), makrofagi (w przewlekłych procesach zapalnych) i komórki atypowe (w guzach opon mózgowo-rdzeniowych, białaczce). W przypadku podejrzenia obecności komórek atypowych rozmaz płynu mózgowo-rdzeniowego jest badany przez cytologa. Policzenie cytozy i cytogramu ma nie tylko wartość diagnostyczną, ale także pozwala ocenić skuteczność terapii przeciwbakteryjnej w bakteryjnym zapaleniu opon mózgowo-rdzeniowych.

Metody cytochemiczne stosuje się jako badania pomocnicze, które pozwalają ocenić stan czynnościowy komórek płynu mózgowo-rdzeniowego (oznaczanie zawartości glikogenu i aktywności mielopiroksydazy w neutrofilach, aktywności fosfatazy alkalicznej w limfocytach itp.).

Pożądane jest zliczenie komórek w płynie mózgowo-rdzeniowym w ciągu 1-2 godzin po nakłuciu. W późniejszych stadiach skład komórkowy może ulec znacznej zmianie z powodu lizy komórek, wytrącania i tworzenia skrzepów fibrynowych. Ponieważ erytrocyty w płynie mózgowo-rdzeniowym ulegają szybkiej lizie, oznacza się je tylko w obecności świeżej krwi w przestrzeni podpajęczynówkowej: po nakłuciach urazowych, krwotokach podpajęczynówkowych, krwotokach miąższowych z wnikaniem erytrocytów do dróg płynu mózgowo-rdzeniowego, w żylnych niedrożnościach zakrzepowych z obrzękiem żył i wtórną dyfuzją krwinek przez ścianę żylną.

Górna granica prawidłowej liczby leukocytów w płynie mózgowo-rdzeniowym wynosi 5 w 1 μl. Jednak niektórzy syfilolodzy uważają, że górna granica normy to nie 5, a 9 komórek. Nieznaczna pleocytoza do 20 w 1 μl jest zwykle obserwowana po pielografii, znieczuleniu rdzeniowym i udarze. Nieporównywalnie poważniejsze zmiany obserwuje się w chorobach zakaźnych ośrodkowego układu nerwowego. Ostre bakteryjne zapalenie opon mózgowych zwykle towarzyszy znacznie wyraźniejsza pleocytoza niż aseptyczne zapalenie opon mózgowych. Tak więc w większości bakteryjnych zapaleń opon mózgowych występuje pleocytoza powyżej 1000 w 1 μl; jednak we wczesnych stadiach lub w przypadku częściowo leczonego zapalenia opon mózgowych (!) pleocytoza może być mniejsza. W aseptycznym zapaleniu opon mózgowych tak wysoka pleocytoza jest rzadka. W przypadkach, gdy pleocytoza jest szczególnie wysoka (5000-10000 w 1 μl), oprócz zapalenia opon mózgowych, można podejrzewać pęknięcie ropnia śródmózgowego lub okołomózgowego; w takim przypadku zwykle obserwuje się błyskawiczny wzrost objawów klinicznych. Zwiększenie stężenia leukocytów polimorfonuklearnych zwykle obserwuje się w bakteryjnym zapaleniu opon mózgowych. Zwiększona zawartość limfocytów zwykle obserwuje się w przewlekłych zakażeniach (gruźlicze i grzybicze zapalenie opon mózgowych), nieleczonych zakażeniach bakteryjnych, zakażeniach wirusowych, niezakaźnych procesach zapalnych (na przykład zaostrzenie stwardnienia rozsianego). Eozynofilia jest rzadka i wskazuje na robaczycę, w tym wągrzycę, a czasami obserwuje się ją również w gruźliczym zapaleniu opon mózgowych, chłoniakach ośrodkowego układu nerwowego i ciałach obcych.

Metody immunologiczne

Stosowane są metody oparte na oznaczaniu antygenów patogenów i przeciwciał. Metoda RLA jest najczęściej stosowana do wykrywania antygenów meningokoków, pneumokoków i Haemophilus influenzae typu b. Do diagnozowania gruźliczego zapalenia opon mózgowych stosuje się test immunoenzymatyczny (ELISA); jeśli podejrzewa się opryszczkowe zapalenie mózgu, swoiste przeciwciała oznacza się w płynie mózgowo-rdzeniowym.

Reakcja łańcuchowa polimerazy (PCR) jest szeroko wprowadzana do praktyki, ponieważ pozwala na identyfikację zdecydowanej większości patogenów neuroinfekcyjnych i w warunkach praktycznych ustalenie etiologii neuroinfekcji u 90% pacjentów. Zaletami metody są wysoka czułość i swoistość, możliwość wykrywania fragmentów genomu patogenu w trakcie leczenia i w razie potrzeby określenia obciążenia mikrobiologicznego. Aby obniżyć koszty, zaleca się początkowo przeprowadzenie reakcji z primerami powszechnych patogenów (meningokoki, pneumokoki, Haemophilus influenzae typu b, enterowirusy), a następnie z patogenami rzadszymi (bakterie Gram-ujemne, borrelia, prątki gruźlicy, wirusy opryszczki, wirusy - patogeny dziecięcych zakażeń kropelkowych itp.). Obraz płynu mózgowo-rdzeniowego zależy od czasu badania i leczenia.

Badanie cytologiczne płynu mózgowo-rdzeniowego czasami pozwala na identyfikację komórek atypowych obecnych nawet w minimalnych ilościach. Jest to dość ważna metoda wykrywania zmian nowotworowych ośrodkowego układu nerwowego.

Procesy zapalne z towarzyszącą leukocytozą mogą również mieć pewne cechy cytologiczne. Tak więc limfocyty pojawiające się w płynie mózgowo-rdzeniowym w odpowiedzi na infekcję wirusową mogą mieć wyraźnie widoczne jądra, przez co są czasami mylone z komórkami złośliwymi. Zapaleniu mózgu wywołanemu przez opryszczkę może towarzyszyć pojawienie się dużych wewnątrzjądrowych inkluzji w limfocytach lub ependymocytach; takie stwierdzenie jest patognomoniczne. W zakażeniach kryptokokowych kolonie drożdżopodobne można wykryć albo w stanie wolnym, albo wewnątrzkomórkowo w makrofagach. Krwotok podpajęczynówkowy prowadzi do pojawienia się makrofagów (erytrofagów) rozciągniętych przez wiele wakuoli. Makrofagi są początkowo wypełnione erytrocytami i produktami lipidowymi ich rozpadu, a następnie hemosyderyną. W niektórych chorobach spichrzeniowych, takich jak choroba Taya-Sachsa, wykrywa się makrofagi z piankowatą cytoplazmą wypełnioną produktami rozpadu komórek zwojowych. Identyfikacja komórek nowotworowych opiera się na wykryciu szeregu charakterystycznych dla procesu nowotworowego objawów cytologicznych. Wiarygodność cytologicznej diagnozy guza jest tym większa, im więcej wykrytych objawów nowotworowych. Najczęściej badania cytologiczne płynu mózgowo-rdzeniowego są wykorzystywane do diagnozowania uszkodzeń OUN w ostrej białaczce i chłoniakach, które zwykle rozprzestrzeniają się do przestrzeni podpajęczynówkowej. Do immunodiagnostyki stosuje się specjalne przeciwciała przeciwko limfocytom B i T. Tak więc w ogólnych procesach zapalnych dominują limfocyty T, a w procesach złośliwych obserwuje się dominującą proliferację patologicznych klonów limfocytów B. Badania immunohistochemiczne są wykorzystywane do identyfikacji konkretnej postaci białaczki. Należy jednak pamiętać, że w przypadkach białaczki, której towarzyszy uwolnienie patologicznych komórek do krwiobiegu, wyniki badania płynu mózgowo-rdzeniowego mogą być fałszywie dodatnie z powodu przedostania się tych komórek z krwią. Ważne jest, aby pamiętać, że badanie cytologiczne płynu mózgowo-rdzeniowego jest skuteczne tylko w przypadku procesów złośliwych, w których zaangażowane są opony mózgowe. Karcynomatoza opon mózgowych najczęściej występuje przy przerzutach nowotworów złośliwych płuc, gruczołu piersiowego, jamy brzusznej i czerniaka.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ]