Radiometria kliniczna

Radiometria kliniczna to pomiar radioaktywności całego ciała lub jego części po podaniu RFP. Zazwyczaj w praktyce klinicznej stosuje się radionuklidy emitujące promieniowanie gamma. Po wprowadzeniu do ciała RFP zawierającego taki radionuklid, jego promieniowanie jest wychwytywane przez detektor scyntylacyjny umieszczony nad odpowiednią częścią ciała pacjenta. Wyniki badania są zwykle prezentowane na tablicy świetlnej w postaci liczby impulsów zarejestrowanych przez określony czas lub w postaci prędkości liczenia (w impulsach na minutę). W praktyce klinicznej ta metoda nie ma wielkiego znaczenia. Zwykle stosuje się go w przypadkach, gdy konieczne jest zidentyfikowanie i ocena włączenia radionuklidów w przypadku ich przypadkowego spożycia do organizmu ludzkiego - przez zaniedbanie, w przypadku katastrof.

Bardziej interesującą metodą jest radiometria całego ciała. Po przeniesieniu osoba zostaje umieszczona w specjalnym aparacie o niskim tle, zawierającym kilka specjalnie ukierunkowanych detektorów scyntylacyjnych. Umożliwia to rejestrowanie radioaktywnego promieniowania całego ciała oraz w warunkach minimalnego wpływu naturalnego tła promieniotwórczego, które, jak wiadomo, może być bardzo wysokie w niektórych regionach powierzchni Ziemi. Jeśli jakakolwiek część ciała (narząd) zostanie zamknięta płytką ołowianą podczas radiometrii, możliwe jest oszacowanie udziału tej części ciała (lub znajdującej się pod płytką organową) w całkowitej radioaktywności organizmu. W ten sposób można zbadać metabolizm białek, witamin, żelaza, określić objętość wody pozakomórkowej. Ta metoda jest również stosowana podczas badania osób z przypadkowym włączeniem radionuklidów (zamiast zwykłej radiometrii klinicznej).

Zautomatyzowane radiometry służą do radiometrii laboratoryjnej. W nich na przenośniku umieszczone są probówki z materiałem radioaktywnym. Pod kontrolą mikroprocesora rury są automatycznie podawane do okna szybowca; Po przeprowadzeniu radiometrii lampy są automatycznie zmieniane. Wyniki pomiaru są liczone w komputerze, a po odpowiednim przetworzeniu są podawane do drukarki. W nowoczesnych radiometrach automatyczne obliczenia wykonywane są w skomplikowanych obliczeniach, a lekarz otrzymuje gotowe informacje, na przykład o stężeniu hormonów i enzymów we krwi, wskazując na dokładność pomiarów. Jeżeli objętość prac z radiometrią laboratoryjną jest niewielka, wówczas prostym radiometrom używa się ręcznego przemieszczania rur i ręcznego wykonywania radiometrii w trybie nieautomatycznym.

Diagnostyka radionuklidów in vitro (od łacińskiego vitrum - glass, ponieważ wszystkie badania są wykonywane w probówkach) odnosi się do mikroanalizy i zajmuje pozycję graniczną między radiologią a biochemią kliniczną. Umożliwia wykrycie obecności różnych substancji pochodzenia endogennego i egzogennego w płynach biologicznych (krwi, moczu), znajdujących się w znikomych stężeniach lub, jak mówią chemicy, zanikających stężeniach. Substancje te obejmują hormony, enzymy, leki, wstrzykiwane do organizmu w celach terapeutycznych i inne.

W różnych chorobach, na przykład w raku lub zawale mięśnia sercowego, w organizmie istnieją substancje specyficzne dla tych chorób. Są nazywane markerami (od angielskiego znaku - etykiety). Stężenie markerów jest tak samo nieistotne jak hormony: dosłownie pojedyncze cząsteczki w 1 ml krwi.

Wszystkie one są unikalne w swoich badaniach dokładności można przeprowadzić stosując radioimmunologicznym opracowany w 1960 roku przez amerykańskich naukowców S. Bersonów i R. Yalow, później Nagrodę Nobla powszechne wprowadzenie został nagrodzony za tę pracę w praktyce klinicznej oznaczył sobie rewolucyjny skok mikroanalizy i medycyny nuklearnej dla pierwszych lekarzy w czasie byli w stanie, i bardzo realne, aby rozszyfrować mechanizmy rozwoju wielu chorób i zdiagnozowanie ich w rzece nnih etapy. Endokrynolodzy, terapeuci, położnicy i pediatrzy najwyraźniej odczuli wartość nowej metody.

Zasada testu radioimmunologicznego polega na konkurencyjnym wiązaniu pożądanych stabilnych i podobnych substancji znakowanych z konkretnym systemem wykrywania.

W celu przeprowadzenia tej analizy wydawane są standardowe zestawy odczynników, z których każdy służy do oznaczania stężenia dowolnej konkretnej substancji.

Jak można zobaczyć na rysunku, układ wiązania (najczęściej są to swoiste przeciwciała lub surowice odpornościowe) współdziała równocześnie z dwoma antygenami, z których jeden jest poszukiwany, a drugi jest jego znakowanym analogiem. Zastosuj roztwory, w których znakowany antygen jest zawsze czymś więcej niż przeciwciałami. W tym przypadku rozgrywa się prawdziwa bójka wyznakowanych i nieznakowanych antygenów związanych z przeciwciałami. Te ostatnie należą do immunoglobulin klasy G.

Muszą być ściśle określone; reagować tylko z badanym antygenem. Przeciwciała akceptują na swoich otwartych stronach wiążących (miejsca) tylko określone antygeny i w ilościach proporcjonalnych do ilości antygenów. Mechanizm ten jest określany jako przenośni zjawiska „zamka i klucza”, im wyższa początkowa zawartość żądanego antygenu w roztworze poddaje się reakcji, tym mniej radioaktywnego antygenu będą przechwytywane przez układ analogowy i łączenia większość to pozostaje niezwiązany.

Równocześnie z określeniem stężenia poszukiwanej substancji we krwi pacjenta, w tych samych warunkach i przy użyciu tych samych odczynników, testuje się standardową surowicę o dokładnie takim stężeniu pożądanego antygenu. Przez stosunek radioaktywności przereagowanych składników konstruuje się krzywą kalibracji, która odzwierciedla zależność radioaktywności próbki od stężenia badanej substancji. Następnie, porównując radioaktywność próbek materiału uzyskanego od pacjenta, z krzywą kalibracji, określa się stężenie substancji poszukiwanej w próbce.

Analiza radionuklidów in vitro stała się znana jako test radioimmunologiczny, ponieważ opiera się na zastosowaniu immunologicznych odpowiedzi antygen-przeciwciało. Jednak w przyszłości powstały inne rodzaje badań, które były podobne pod względem celu i metodologii, ale różniły się szczegółami in vitro. Tak więc, jeśli jako znakowaną substancję stosuje się przeciwciało, a nie antygen, analizę nazywa się immunoradiometryczną; Jeśli receptory tkankowe są brane jako układ wiążący, mówią o analizie radio-receptorowej.

Test radionuklidów in vitro składa się z 4 etapów.

• Pierwszy etap to mieszanie analizowanej próbki biologicznej z odczynnikami z zestawu zawierającego surowicę odpornościową (przeciwciało) i układ wiążący. Wszystkie manipulacje z roztworami wykonywane są za pomocą specjalnych półautomatycznych mikropipet, w niektórych laboratoriach przeprowadzane są za pomocą automatycznych urządzeń.
• Drugim etapem jest inkubacja mieszaniny. Trwa ona do momentu osiągnięcia równowagi dynamicznej: w zależności od swoistości antygenu jego czas trwania waha się od kilku minut do kilku godzin, a nawet dnia.
• Trzeci etap to oddzielenie wolnej i związanej materii radioaktywnej. W tym celu stosuje się sorbenty dostępne w zestawie (żywice jonowymienne, węgiel itp.), Które wytrącają cięższe kompleksy antygen-przeciwciało.
• Czwarty etap to radiometria próbek, konstrukcja krzywych kalibracyjnych, określenie stężenia poszukiwanej substancji. Wszystkie te prace wykonywane są automatycznie za pomocą radiometru wyposażonego w mikroprocesor i urządzenie drukujące.

Jak można zauważyć z powyższego, test radioimmunologiczny opiera się na użyciu radioaktywnej etykiety antygenów. Jednak w zasadzie inne substancje, w szczególności enzymy, substancje luminescencyjne lub cząsteczki o wysokiej fluorescencji, mogą być stosowane jako antygen lub etykieta przeciwciała. Na tych nowych metodach mikroanalizy opierają się: immunoenzym, immunoluminescencyjny, immunofluorescencyjny. Niektóre z nich są bardzo obiecujące i konkurują z testem radioimmunologicznym.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8]