Wirus grypy A.

Wirus grypy A jest wirionem o kulistym kształcie i średnicy 80-120 nm, jego masa cząsteczkowa wynosi 250 MD. Genom wirusa jest reprezentowany przez jednoniciowe fragmentowane (8 fragmentów) negatywny RNA o całkowitej masie 5 MD. Rodzaj symetrii nukleokapsydu jest spiralny. Wirus grypy ma superkapsyd (membranę) zawierającą dwie glikoproteiny - hemaglutyninę i neuraminidazę, które wystają ponad błonę w postaci różnych kolców. Hemaglutynina ma strukturę trimeryczną o masie 225 kD; m każdego monomeru 75 kD. Monomer składa się z mniejszej podjednostki o masie 25 kD (HA2) i większej podjednostki o masie 50 kD (HA1).

Główne funkcje hemaglutyniny:

• rozpoznaje receptor komórkowy - mukopeptyd, który ma N-acetylneuram - nowy kwas (sialowy);
• zapewnia fuzję błony wirionowej z błoną komórki i membranami jej lizosomów, tj. Jest odpowiedzialny za penetrację wirionu do komórki;
• określa pandemiczną naturę wirusa (zmienia hemaglutyninę - przyczynę pandemii, jej zmienność - epidemie grypy);
• ma największe właściwości ochronne, odpowiedzialne za tworzenie odporności.

W wirusach grypy A człowieka, człowieka i ssaka wykryto 13 typów hemaglutyniny różnicujących antygen, którym przypisano numerację od końca do końca (dH1dH103).

Neuraminidaza (N) to tetramer o masie 200-250 kD, każdy monomer ma masę 50-60 kD. Jego funkcje to:

• zapewnienie rozprzestrzeniania się wirionów przez rozszczepianie kwasu neuraminowego z nowo zsyntetyzowanych wirionów i błony komórkowej;
• razem z hemaglutyniną, definicją pandemii i właściwości epidemicznych wirusa.

Wirus grypy A wykrył 10 różnych wariantów neuraminidazy (N1-N10).

Jądrowy nukleokapsyd składa się z 8 fragmentów vRNA i białek kapsydu tworzących nić spiralną. Na końcach 3 'wszystkich 8 fragmentów vRNA występują identyczne sekwencje 12 nukleotydów. Końce 5 'każdego fragmentu mają również tę samą sekwencję 13 nukleotydów. Końce 5 'i 3' są częściowo komplementarne względem siebie. Ta okoliczność, oczywiście, pozwala regulować transkrypcję i replikację fragmentów. Każdy z fragmentów jest transkrybowany i replikowany niezależnie. Z każdym z nich cztery białka kapsydu są silnie związane: nukleoproteina (NP), spełnia rolę strukturalną i regulacyjną; białko PB1 - transkryptaza; PB2 - endonukleaza i RA - replikaza. Białka PB1 i PB2 mają zasadowe (alkaliczne) właściwości, a PA - właściwości kwasowe. Białka PB1, PB2 i PA tworzą polimer. Nukleokapsyd jest otoczony przez białko macierzy (białko M1), który odgrywa kluczową rolę w wirionu morfogenezę i chroni RNA wirionów. Białka m2 (koduje jeden z ramkami odczytu 7 fragment), a NS1 NS2 (vRNA kodowane ósmy fragment, który posiada, w siódmym fragmentu vRNA dwie ramki odczytu) są syntetyzowane w trakcie replikacji wirusa, a jego konstrukcja nie jest włączone.

[1], [2], [3], [4]

Cykl życia wirusa grypy A.

Wirus grypy jest wchłaniany przez błonę komórkową w wyniku oddziaływania hemaglutyniny z mukopeptydem. Następnie wirus wchodzi do komórki za pomocą jednego z dwóch mechanizmów:

• fuzja błony wirionowej z błoną komórkową lub
• wzdłuż ścieżki frędzlasta fula - graniczny pęcherzyk - endosom - lizosom - fuzja błony wirionowej z błoną lizosomu - wydajność nukleokapsydu w cytozolu komórki.

Drugi etap "odpędzania" wirionu (destrukcja białka macierzy) następuje w drodze do jądra. Specyfika cyklu życiowego wirusa grypy polega na tym, że transkrypcja jego vRNA wymaga wysiewu. Fakt że wirus nie może syntetyzować się „korek” lub korek (angielski cap). - specjalne miejsce na końcu 5 'mRNA, składającej się z metylowanej guaniny i od 10 do 13 nukleotydów, która jest konieczna do uznania rybosom mRNA. Dlatego też poprzez jego ukąszenia białka PB2 nasadkę z mRNA komórek oraz syntezę mRNA w komórkach występuje tylko w jądrze, wirusowe RNA musi koniecznie wnikają najpierw do jądra. Wnika w niego w formie rybonukleoproteiny składającej się z 8 fragmentów RNA związanego z białkami NP, PB1, PB2 i PA. Teraz życie komórki jest całkowicie zależne od interesów wirusa, jego reprodukcji.

Funkcja transkrypcji

W jądrze syntetyzuje się trzy typy RNA specyficznych dla wirusa: 1) dodatnie komplementarne RNA (mRNA) stosowane jako matryce do syntezy białek wirusowych; zawierają na końcu 5 'nasadkę odszczepioną od końca 5' komórkowego mRNA, a na końcu 3 'sekwencję poli-A; 2) pełnej długości komplementarny RNA (cRNA), który służy jako matryca do syntezy wirionowych RNA (vRNA); na końcu 5 'cRNA nie występuje nakrywka, na końcu 3' nie ma sekwencji poli-A; 3) ujemny RNA wirusa (vRNA), który jest genomem dla nowo zsyntetyzowanych wirionów.

Natychmiast, nawet przed zakończeniem syntezy, vRNA i cRNA wchodzą w połączenie z białkami kapsydu, które wchodzą do jądra z cytozolu. Jednak w wirionach zawarte są tylko rybonukleoproteiny związane z vRNA. Rybonukleoproteiny zawierające cRNA nie tylko nie wchodzą w skład wirionów, ale nawet nie opuszczają jądra komórki. Wirusowe mRNA wchodzą do cytozolu, gdzie ulegają translacji. Nowo zsyntetyzowane cząsteczki vRNA, po połączeniu z białkami kapsydu, migrują z jądra do cytosolu.

[5], [6], [7], [8], [9]

Cechy translacji wirusowych białek

Białka NP, PB1, PB2, RA i M są syntezowane na wolnych polibosomach. Białka NP, PB1, PB2 i RA po syntezie z cytozolu powracają do jądra, gdzie wiążą się z nowo zsyntetyzowanym vRNA, a następnie powracają do cytozolu jako nukleokapsyd. Białko macierzowe po syntezie przesuwa się na wewnętrzną powierzchnię błony komórkowej, wypierając z niej w tym obszarze białka komórkowe. Białka, H i N są syntetyzowane na rybosomach związanych z błony retikulum endoplazmatycznego, transportowanych na nich, poddawane glikozylacji i jest zamontowana na zewnętrznej powierzchni błony komórkowej, tworzących kolce naprzeciwko białek M, znajdujących się na jego powierzchni wewnętrznej. Białko H jest przetwarzane podczas przetwarzania przez cięcie na HA1 i HA2.

Końcowy etap morfogenezy wirionu jest kontrolowany przez białko M. Nucleocapsid wchodzi w interakcje z nim; przechodzi przez błonę komórkową, jest pokryta pierwszym białka M, a następnie komórek warstwy lipidowej i superkapsidnymi glikoprotein, H i N. Cyklu życiowym wirusa trwa 6-8 godzin, po zakończeniu pączkowanie nowo syntetyzowanych wirionu, które są zdolne do zaatakowania komórek innych tkanek.

Stabilność wirusa w środowisku zewnętrznym jest niska. Łatwo ulega zniszczeniu przez ogrzewanie (w temperaturze 56 ° C przez 5-10 minut), pod wpływem światła słonecznego i promieniowania UV i jest łatwo neutralizowany przez środki dezynfekujące.

[10], [11], [12], [13], [14], [15], [16]

Patogeneza i objawy grypy A

Okres inkubacji grypy jest krótki - 1-2 dni. Wirus replikuje się w komórkach nabłonka błony śluzowej dróg oddechowych preferencyjnie zlokalizowane w tchawicy, która jest klinicznie objawia się jako suchy kaszel bolesnej ból wzdłuż tchawicy. Produkty degradacji dotkniętych komórek dostają się do krwioobiegu, powodują poważne zatrucie i wzrost temperatury ciała do 38-39 ° C. Wzrost przepuszczalności naczyń, spowodowany uszkodzeniem komórek śródbłonka, może powodować zmiany patologiczne w różnych narządach: krwotoki z miejsca w tchawicy, oskrzelach, a czasami obrzęk mózgu z wynikiem śmiertelnym. Wirus grypy ma przygnębiający wpływ na układ krwionośny i immunologiczny. Wszystko to może prowadzić do wtórnych infekcji wirusowych i bakteryjnych, które komplikują przebieg choroby.

Odporność poinfekcyjna

Poprzedni pomysł, że po doznaniu grypę pozostaje słaba i krótkotrwała odporność po powrocie obalona wirusa H1N1 w 1977 roku wirus choroby spowodowane głównie u osób poniżej 20 roku życia, co jest. E. Ci, którzy nie są chorzy kiedyś, do 1957 r. W związku z tym odporność poinfekcyjna jest dość intensywna i długotrwała, ale ma wyraźny charakter specyficzny dla rodzaju.

Główną rolę w tworzeniu nabytej odporności mają przeciwciała neutralizujące wirusy, które blokują hemaglutyninę i neuraminidazę, a także immunoglobuliny sekrecyjne IgA.

Epidemiologia grypy A

Źródłem zakażenia jest osoba, choroba lub nosiciel, rzadko zwierzęta (domowe i dzikie ptaki, świnie). Zakażenie przez ludzi następuje w postaci kropelek w powietrzu, okres inkubacji jest bardzo krótki (1-2 dni), więc epidemia rozprzestrzenia się bardzo szybko i może rozwinąć się w pandemię w przypadku braku zbiorowej odporności. Odporność jest głównym regulatorem epidemii grypy. Wraz ze wzrostem odporności zbiorowej epidemia maleje. Jednocześnie, ze względu na tworzenie odporności, wybiera się szczepy wirusa o zmodyfikowanej strukturze antygenowej, głównie hemaglutyniny i neuraminidazy; wirusy te nadal powodują wybuchy aż do pojawienia się przeciwciał. Takie dryfowanie antygenowe i utrzymuje ciągłość epidemii. Jednak w wirusie grypy A odkryto inną formę zmienności, zwaną przesunięciem lub ścinaniem. Jest to związane z całkowitą zmianą jednego rodzaju hemaglutyniny (rzadziej - i neuraminidazy) na inny.

Wszystkie pandemie grypy były spowodowane przez wirusy grypy A, które przeszły schiltosis. 1918 pandemia została spowodowana przez wirusa H1N1 fenotypu (zginęło około 20 milionów ludzi) pandemii w 1957 roku - wirus H3N2 (chory z więcej niż połowa ludności świata), 1968 - wirus H3N2.

Aby wyjaśnić przyczyny ostrej zmiany w typach wirusów grypy A, zaproponowano dwie główne hipotezy. Według hipotezy AA Smorodintsev, epidemia wirusa wyczerpał swoje możliwości, nie znikają, ale nadal krążą w grupie bez istotnych ognisk lub długo utrzymują się w organizmie człowieka. W ciągu 10-20 lat, kiedy pojawi się nowe pokolenie ludzi, którzy nie mają odporności na tego wirusa, staje się on przyczyną nowych epidemii. Na korzyść tej hipotezy jest fakt, że wirus grypy A H1N1 z fenotypem, zniknęła w 1957 roku, kiedy to zastąpił wirusa H3N2, pojawił się po 20-letniej nieobecności w 1977 roku

Według innej hipotezy, opracowany i wspierany przez wielu autorów, nowych typów wirusa grypy typu A są na ponowne skojarzenie genomów między wirusy grypy u ludzi i ptaków pomiędzy wirusem ptasiej grypy wśród wirusów grypy ptaków i ssaków (świnie), z pomocą konstrukcji segmentowej wirusowego genomu (8 kawałków ).

Zatem wirus grypy A ma dwa sposoby zmiany genomu.

Mutacje punktowe powodujące dryf antygenowy. Przede wszystkim podatne są na to geny hemaglutyniny i neuraminidazy, szczególnie w wirusie H3N2. Dzięki temu wirus H3N2 spowodował 8 epidemii w okresie 1982-1998 i do tej pory pozostaje epidemią.

Reasocjacja genów między ludzkimi wirusami grypy a wirusami grypy ptaków i świń. Uważa się, że ponowne połączenie genomów wirusów grypy A z genomami wirusa grypy ptaków i świń jest główną przyczyną pojawienia się pandemicznych wariantów tego wirusa. Dryf antygenowy pozwala wirusowi przezwyciężyć istniejącą odporność u ludzi. Przesunięcie antygenowe tworzy nową sytuację epidemiczną: większość ludzi nie ma odporności na nowego wirusa i pojawia się pandemia grypy. Możliwość doświadczania takich asocjacji genomów wirusów grypy A została udowodniona eksperymentalnie.

Ustalono, że epidemie grypy u ludzi są powodowane przez wirusy typu A zawierające tylko 3 lub 4 fenotypy: H1N1 (H0N1); h3N2; H3N2.

Jednak wirus drobiu (ptasiego) stanowi również poważne zagrożenie dla ludzi. Ogniska ptasiej grypy niejednokrotnie obserwowano w szczególności wirusa H5N1 kurczaka spowodował milion epizootiami spośród ptaków domowych i dzikich od 80 do 90% śmiertelności. Ludzie zarazili się kurczakami; więc w 1997 r. Z kur zarażonych zostało 18 osób, jedna trzecia zmarła. Szczególnie duży wybuch nastąpił w okresie styczeń-marzec 2004 r. Dotknął prawie wszystkich krajów Azji Południowo-Wschodniej i jednego z amerykańskich stanów i spowodował ogromne straty gospodarcze. 22 kurczaki zostały zarażone i zabite. ścisła kwarantanna, wyeliminowanie wszystkich ptaków populacji we wszystkich ośrodkach, hospitalizacji i izolacji pacjentów i wszystkie osoby z gorączką, a także osoby, które były w kontakcie z pacjentami, zakaz importu mięsa drobiowego z nich: dla eliminacji wybuchu wzięto najbardziej poważne i zdecydowane działania ponad krajami ścisły nadzór medyczny i weterynaryjny nad wszystkimi pasażerami i pojazdami przybywającymi z tych krajów. Szeroki zakres grypy wśród ludzi nie wystąpił, ponieważ nie było ponownego połączenia genomu wirusa grypy drobiowej z genomem ludzkiego wirusa grypy. Jednak niebezpieczeństwo takiego ponownego połączenia pozostaje realne. Może to doprowadzić do pojawienia się nowego niebezpiecznego pandemicznego wirusa grypy ludzkiej.

W imię wykrytych szczepów wirusa grypy wskazać serotyp wirusa (A, B, C), właściciel formularza (jeśli nie jest to osoba), miejsce odosobnienia, numer szczepu, rok jego wydania (ostatnie 2 cyfry) i fenotyp (w nawiasach). Na przykład: "A / Singapur / 1/57 (h3N2), A / Kaczka / ZSRR / 695/76 (H3N2)".

[17], [18], [19], [20], [21],

Diagnostyka laboratoryjna grypy A

Materiał do badania służy jako odłączalny nosogardzieli, który jest uzyskiwany albo przez spłukiwanie, albo przy użyciu tamponów bawełnianych i krwi. Metody diagnostyki mają zastosowanie:

• Virological - infekcja zarodków kurcząt, hodowle komórek nerkowych zielonych małp (Vero) i psów (MDSK). Hodowle komórkowe są szczególnie skuteczne do izolacji wirusów A (H3N2) i B.
• Serologiczne - wykrywanie swoistych przeciwciał i wzrost ich miana (w parach surowicy) za pomocą RTGA, RSK, metoda immunologiczna.
• Jako przyspieszoną diagnozę stosuje się metodę immunofluorescencyjną, która pozwala szybko wykryć antygen wirusowy w rozmazach - wydruki z błony śluzowej nosa lub w popłuczynach z nosogardzieli pacjentów.
• W celu wykrycia i identyfikacji wirusa (antygenów wirusowych) zasugerowano metody sondy RNA i PCR.

Leczenie grypy A

Leczenie grypy, co powinno być rozpoczęte już możliwe, jak również zapobieganie grypy i innych wirusowych ARI opiera się na wykorzystaniu dibazola, interferon i ich induktorów amiksina i Arbidol szczególnego systemu, i do leczenia lub zapobiegania grypie u dzieci w wieku od 1 roku - Alguire (rimantadyna ) za pomocą specjalnych programów.

Szczególne zapobieganie grypie A

Każdego roku na świecie setki milionów ludzi cierpi na grypę, która powoduje ogromne szkody dla zdrowia ludności i gospodarki każdego kraju. Jedynym niezawodnym sposobem jej zwalczania jest stworzenie zbiorowej odporności. W tym celu proponuje się i stosuje następujące rodzaje szczepionek:

1. żyją z atenuowanego wirusa;
2. zabił cały wirion;
3. Subvirion vaccine (from split wirions);
4. szczepionka podjednostkowa zawierająca tylko hemaglutyninę i neuraminidazę.

W naszym kraju ustalone i stosuje polimerem podjednostkę szczepionki trójwartościowe ( „Grippol”), w którym koniugat białka sterylnej powierzchni A i B, wirusy związane jest z polioksidoniem kopolimeru (immunostymulator).

Dzieci od 6 miesięcy. Do 12 lat, zgodnie z zaleceniami WHO, powinna być szczepiona tylko szczepionka podjednostkowa jako najmniej reaktogenna i toksyczna.

Głównym problemem w zwiększaniu skuteczności szczepionek przeciw grypie jest zapewnienie ich specyficzności wobec rzeczywistego wirusa, czyli wariantu wirusa, który spowodował epidemię. Innymi słowy, szczepionka musi zawierać specyficzne antygeny rzeczywistego wirusa. Głównym sposobem poprawy jakości szczepionki jest stosowanie najbardziej konserwatywnego i powszechnego dla wszystkich antygenowych wariantów epitopów wirusa A, które mają maksymalną immunogenność.