Corynebacterium

Błonica jest ostrą chorobą zakaźną, dotykającą głównie dzieci, która objawia się głębokim zatruciem organizmu toksyną błoniczą i charakterystycznym zapaleniem włóknikowym w miejscu umiejscowienia patogenu. Nazwa choroby pochodzi od greckiego słowa diphthera – skóra, błona, ponieważ w miejscu rozmnażania się patogenu tworzy się gęsty, szarobiały film.

Czynnik wywołujący błonicę - Corynebacterium diphtheriae - został odkryty po raz pierwszy w 1883 roku przez E. Klebsa w skrawkach filmu, a w czystej kulturze został uzyskany w 1884 roku przez F. Lefflera. W 1888 roku E. Roux i A. Yersin odkryli jego zdolność do wytwarzania egzotoksyny, która odgrywa główną rolę w etiologii i patogenezie błonicy. Produkcja surowicy antytoksycznej przez E. Behringa w 1892 roku i jej stosowanie od 1894 roku w leczeniu błonicy umożliwiło znaczne zmniejszenie śmiertelności. Skuteczny atak na tę chorobę rozpoczął się po 1923 roku w związku z opracowaniem przez G. Raiona metody uzyskiwania anatoksyny błoniczej.

Czynnik wywołujący błonicę należy do rodzaju Corynebacterium (klasa Actinobacteria). Morfologicznie charakteryzuje się tym, że komórki mają kształt maczugowaty i są pogrubione na końcach (gr. coryne – maczuga), tworzą rozgałęzienia, zwłaszcza w starych kulturach, i zawierają ziarniste inkluzje.

Rodzaj Corynebacterium obejmuje dużą liczbę gatunków, które dzielą się na trzy grupy.

• Corynebacterium to pasożyty człowieka i zwierząt, dla których są patogenne.
• Corynebacterium jest bakterią chorobotwórczą dla roślin.
• Niepatogenne Corynebacteria. Wiele gatunków Corynebacteria to normalni mieszkańcy skóry, błon śluzowych gardła, nosogardła, oczu, dróg oddechowych, cewki moczowej i narządów płciowych.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ]

Morfologia maczugowców

C. diphtheriae to proste lub lekko zakrzywione nieruchome pałeczki o długości 1,0-8,0 μm i średnicy 0,3-0,8 μm; nie tworzą zarodników ani torebek. Często mają wybrzuszenia na jednym lub obu końcach i często zawierają metachromatyczne granulki - ziarna wolutyny (polimetafosforany), które po zabarwieniu błękitem metylenowym przyjmują niebieskawo-fioletową barwę. Do ich wykrywania zaproponowano specjalną metodę barwienia Neissera. W tym przypadku pałeczki są barwione na słomkowo-żółto, a ziarna wolutyny są ciemnobrązowe i zwykle znajdują się na biegunach. Corynebacterium diphtheriae dobrze barwi się barwnikami anilinowymi, jest Gram-dodatnia, ale w starych kulturach często ulega odbarwieniu i ma negatywną barwę według Grama. Charakteryzuje się wyraźnym polimorfizmem, szczególnie w starych kulturach i pod wpływem antybiotyków. Zawartość G + C w DNA wynosi około 60 mol %.

Właściwości biochemiczne maczugowców

Pałeczka błonicy jest tlenowcem lub fakultatywnym beztlenowcem, optymalna temperatura wzrostu wynosi 35-37 °C (granice wzrostu wynoszą 15-40 °C), optymalne pH wynosi 7,6-7,8. Nie jest bardzo wymagająca co do pożywek, ale lepiej rośnie na pożywkach zawierających surowicę lub krew. Selektywne dla bakterii błonicy są podłoża Roux lub Loefflera ze ściętym osoczem, wzrost na nich pojawia się po 8-12 godzinach w postaci wypukłych kolonii wielkości główki szpilki, o barwie szaro-białej lub żółto-kremowej. Ich powierzchnia jest gładka lub lekko ziarnista, na obwodzie kolonie są nieco bardziej przezroczyste niż w środku. Kolonie nie zlewają się, w wyniku czego kultura nabiera wyglądu skóry szarozielonej. Na wywarze wzrost objawia się równomiernym zmętnieniem, albo wywar pozostaje przezroczysty, a na jego powierzchni tworzy się delikatny film, który stopniowo gęstnieje, kruszy się i opada płatkami na dno.

Cechą bakterii błonicy jest ich dobry wzrost na podłożach z krwi i surowicy zawierających takie stężenia tellurynu potasu, że hamują wzrost innych rodzajów bakterii. Wynika to z faktu, że C. diphtheriae redukuje telluryn potasu do metalicznego telluru, który, odkładając się w komórkach drobnoustrojów, nadaje koloniom charakterystyczny ciemnoszary lub czarny kolor. Stosowanie takich podłoży zwiększa odsetek zasiewów bakterii błonicy.

Corynebacterium diphtheriae fermentują glukozę, maltozę, galaktozę z wytworzeniem kwasu bez gazu, ale nie fermentują (z reguły) sacharozy, mają cystynazę, nie mają ureazy i nie tworzą indolu. Pod względem tych cech różnią się od bakterii maczugowatych (diftheroidów), które najczęściej występują na błonie śluzowej oka (Corynebacterium xerosus) i nosogardzieli (Corynebacterium pseiidodiphtheriticum) oraz od innych dyfteroidów.

W naturze istnieją trzy główne warianty (biotypy) pałeczki błonicy: gravis, intermedins i mitis. Różnią się one pod względem morfologicznym, kulturowym, biochemicznym i innymi właściwościami.

Podział bakterii błonicy na biotypy dokonano biorąc pod uwagę formy błonicy u pacjentów, u których są one izolowane z największą częstością. Typ gravis jest najczęściej izolowany od pacjentów z ciężką postacią błonicy i powoduje ogniska grupowe. Typ mitis powoduje łagodniejsze i sporadyczne przypadki choroby, a typ intermedius zajmuje pozycję pośrednią między nimi. Corynebacterium belfanti, wcześniej przypisywany do biotypu mitis, jest izolowany jako niezależny, czwarty biotyp. Jego główną różnicą w stosunku do biotypów gravis i mitis jest zdolność redukcji azotanów do azotynów. Szczepy Corynebacterium belfanti mają wyraźne właściwości adhezyjne, a wśród nich występują zarówno warianty toksynotwórcze, jak i nietoksynotwórcze.

[ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ]

Struktura antygenowa maczugowców

Corynebacterium jest bardzo heterogenna i mozaikowa. U wszystkich trzech typów patogenów błonicy stwierdzono kilkadziesiąt antygenów somatycznych, według których dzielą się na serotypy. W Rosji przyjęto klasyfikację serologiczną, według której wyróżnia się 11 serotypów bakterii błonicy, z czego 7 to główne (1-7), a 4 to dodatkowe, rzadko spotykane serotypy (8-11). Sześć serotypów (1, 2, 3, 4, 5, 7) należy do typu gravis, a pięć (6,8,9,10,11) do typu mitis. Wadą metody serotypowania jest to, że wiele szczepów, zwłaszcza nietoksygennych, wykazuje spontaniczną aglutynację lub poliaglutynację.

[ 11 ]

Typowanie fagowe Corynebacterium diphtheriae

Zaproponowano różne schematy typowania fagów w celu różnicowania bakterii błonicy. Zgodnie ze schematem MD Krylovej, przy użyciu zestawu 9 fagów (A, B, C, D, F, G, H, I, K), możliwe jest typowanie większości toksynotwórczych i nietoksynotwórczych szczepów typu gravis. Biorąc pod uwagę wrażliwość na określone fagi, a także właściwości kulturowe, antygenowe i zdolność do syntezy korycyn (białek bakteriobójczych), MD Krylova zidentyfikowała 3 niezależne grupy maczugowców typu gravis (I-III). Każda z nich zawiera podgrupy toksynotwórczych i ich nietoksynotwórczych analogów patogenów błonicy.

Odporność na Corynebacterium

Corynebacterium diphtheriae wykazuje wysoką odporność na niskie temperatury, ale szybko ginie w wysokich temperaturach: w temperaturze 60 °C - w ciągu 15-20 minut, podczas gotowania - po 2-3 minutach. Wszystkie środki dezynfekujące (lysol, fenol, chloramina itp.) w zwykle stosowanym stężeniu niszczą ją w ciągu 5-10 minut. Jednak patogen błonicy dobrze znosi suszenie i może pozostać żywotny przez długi czas w wysuszonym śluzie, ślinie i cząsteczkach kurzu. W drobnym aerozolu bakterie błonicy pozostają żywotne przez 24-48 godzin.

Czynniki patogeniczności maczugowców

Patogenność Corynebacterium diphtheriae uwarunkowana jest obecnością szeregu czynników.

Czynniki adhezji, kolonizacji i inwazji

Struktury odpowiedzialne za adhezję nie zostały zidentyfikowane, ale bez nich pałeczka błonicy nie byłaby w stanie kolonizować komórek. Ich rolę pełnią niektóre składniki ściany komórkowej patogenu. Inwazyjne właściwości patogenu są związane z hialuronidazą, neuraminidazą i proteazą.

Toksyczny glikolipid zawarty w ścianie komórkowej patogenu. Jest to 6,6'-diester trehalozy zawierający kwas korynemykolowy (C32H64O3) i kwas korynemykolowy (C32H62O3) w stosunkach ekwimolarnych (trehaloza-6,6'-dikorynemikolan). Glikolipid ma destrukcyjny wpływ na komórki tkanki w miejscu rozmnażania patogenu.

Egzotoksyna, która określa patogeniczność patogenu i charakter patogenezy choroby. Nietoksyczne warianty C. diphtheriae nie powodują błonicy.

Egzotoksyna jest syntetyzowana jako nieaktywny prekursor - pojedynczy łańcuch polipeptydowy o masie cząsteczkowej 61 kD. Aktywowana jest przez samą proteazę bakteryjną, która tnie polipeptyd na dwa peptydy połączone wiązaniami disiarczkowymi: A (masa cząsteczkowa 21 kD) i B (masa cząsteczkowa 39 kD). Peptyd B pełni funkcję akceptora - rozpoznaje receptor, wiąże się z nim i tworzy kanał wewnątrzbłonowy, przez który peptyd A wnika do komórki i realizuje aktywność biologiczną toksyny. Peptyd A jest enzymem ADP-rybozylotransferazy, który zapewnia przeniesienie adenozynodifosforanorybozy z NAD na jedną z reszt aminokwasowych (histydynę) białkowego czynnika elongacji EF-2. W wyniku modyfikacji EF-2 traci swoją aktywność, a to prowadzi do zahamowania syntezy białka przez rybosomy na etapie translokacji. Toksyna jest syntetyzowana tylko przez te C. diphtheriae, które niosą geny umiarkowanie konwertującego profaga w swoim chromosomie. Operon kodujący syntezę toksyny jest monocistronowy, składa się z 1,9 tys. par nukleotydów i ma promotor toxP oraz 3 regiony: toxS, toxA i toxB. Region toxS koduje 25 reszt aminokwasowych peptydu sygnałowego (zapewnia on uwolnienie toksyny przez błonę do przestrzeni peryplazmatycznej komórki bakteryjnej), toxA - 193 reszty aminokwasowe peptydu A, a toxB - 342 reszty aminokwasowe peptydu B toksyny. Utrata profaga przez komórkę lub mutacje w operonie tox sprawiają, że komórka staje się lekko toksynogenna. Przeciwnie, lizogenizacja nietoksygennych C. diphtheriae przez konwertującego faga zamienia je w bakterie toksynotwórcze. Zostało to udowodnione jednoznacznie: toksynotwórczość bakterii błonicy zależy od ich lizogenizacji przez konwertujące toksyny korynefagi. Korynefagi integrują się z chromosomem korynebakterii, wykorzystując mechanizm rekombinacji miejscowo-specyficznej, a szczepy bakterii błonicy mogą zawierać 2 miejsca rekombinacji (attB) w swoich chromosomach, a korynefagi integrują się z każdym z nich z tą samą częstotliwością.

Analiza genetyczna szeregu nietoksygennych szczepów bakterii błonicy, przeprowadzona przy użyciu znakowanych sond DNA niosących fragmenty operonu toks korynefaga, wykazała, że ich chromosomy zawierają sekwencje DNA homologiczne do operonu toks korynefaga, ale albo kodują nieaktywne polipeptydy, albo są w stanie „cichym”, czyli nieaktywnym. W związku z tym pojawia się bardzo ważne pytanie epidemiologiczne: czy nietoksygenne bakterie błonicy mogą przekształcić się w toksynotwórcze w warunkach naturalnych (w organizmie człowieka), podobnie jak dzieje się to in vitro? Możliwość takiej transformacji nietoksygennych kultur maczugowców w toksynotwórcze przy użyciu konwersji fagowej wykazano w eksperymentach na świnkach morskich, zarodkach kurzych i białych myszach. Jednak czy zachodzi to w trakcie naturalnego procesu epidemii (i jeśli tak, to jak często) nie zostało jeszcze ustalone.

Ze względu na fakt, że toksyna błonicza w organizmie chorych działa selektywnie i swoiście na określone układy (głównie na układ współczulno-nadnerczowy, serce, naczynia krwionośne i nerwy obwodowe), oczywistym jest, że nie tylko hamuje ona biosyntezę białek w komórkach, ale także powoduje inne zaburzenia w ich metabolizmie.

Do wykrywania toksyczności bakterii błonicy można stosować następujące metody:

• Badania biologiczne na zwierzętach. Śródskórne zakażenie świnek morskich przesączem z hodowli bulionowej bakterii błonicy powoduje martwicę w miejscu wstrzyknięcia. Jedna minimalna dawka śmiertelna toksyny (20-30 ng) zabija świnkę morską ważącą 250 g po wstrzyknięciu podskórnym w 4-5 dniu. Najbardziej charakterystycznym objawem działania toksyny jest uszkodzenie nadnerczy, które są powiększone i ostro przekrwione.
• Zakażenie zarodków kurzych. Toksyna błonicza powoduje ich śmierć.
• Zakażenie kultur komórkowych. Toksyna błonicza wywołuje wyraźny efekt cytopatyczny.
• Test immunoenzymatyczny w fazie stałej z użyciem antytoksyn znakowanych peroksydazą.
• Zastosowanie sondy DNA do bezpośredniego wykrywania operonu tox w chromosomie bakterii błonicy.

Jednak najprostszą i najpowszechniejszą metodą określania toksyczności bakterii błonicy jest metoda serologiczna - metoda precypitacji żelowej. Jej istota jest następująca. Pasek sterylnej bibuły filtracyjnej o wymiarach 1,5 x 8 cm zwilża się antytoksyczną surowicą przeciwbłoniczą zawierającą 500 AE w 1 ml i nakłada na powierzchnię pożywki w szalce Petriego. Szalkę suszy się w termostacie przez 15-20 minut. Kultury testowe zaszczepia się płytkami po obu stronach papieru. Na jednej szalce zaszczepia się kilka szczepów, z których jeden, ewidentnie toksyczny, służy jako kontrola. Płytki z kulturami inkubuje się w temperaturze 37 °C, wyniki uwzględnia się po 24-48 godzinach. Ze względu na przeciwną dyfuzję antytoksyny i toksyny w żelu w miejscu ich interakcji tworzy się wyraźna linia precypitacji, która łączy się z linią precypitacji kontrolnego szczepu toksynogennego. Niespecyficzne pasma precypitacji (tworzą się, gdy oprócz antytoksyny w surowicy obecne są niewielkie ilości innych przeciwciał przeciwdrobnoustrojowych) pojawiają się późno, są słabo wyrażone i nigdy nie łączą się z pasmem precypitacji szczepu kontrolnego.

Odporność po zakażeniu

Silne, uporczywe, praktycznie dożywotnie, powtarzające się przypadki choroby obserwuje się rzadko - u 5-7% osób, które przeszły chorobę. Odporność ma głównie charakter antytoksyczny, przeciwciała przeciwdrobnoustrojowe mają mniejsze znaczenie.

Test Schicka był wcześniej szeroko stosowany do oceny poziomu odporności przeciw błonicy. W tym celu dzieciom wstrzykiwano śródskórnie 1/40 toksyny świnki morskiej w objętości 0,2 ml. W przypadku braku odporności przeciw toksycznej, w miejscu wstrzyknięcia po 24-48 godzinach pojawia się zaczerwienienie i obrzęk o średnicy większej niż 1 cm. Taka dodatnia reakcja Schicka wskazuje albo na całkowity brak antytoksyny, albo na to, że jej zawartość jest mniejsza niż 0,001 AE/ml krwi. Ujemną reakcję Schicka obserwuje się, gdy zawartość antytoksyny we krwi jest wyższa niż 0,03 AE/ml. Jeśli zawartość antytoksyny jest niższa niż 0,03 AE/ml, ale wyższa niż 0,001 AE/ml, reakcja Schicka może być dodatnia lub czasami ujemna. Ponadto sama toksyna ma wyraźne właściwości alergizujące. Dlatego też, aby określić poziom odporności przeciwbłoniczej (ilościową zawartość antytoksyny) lepiej jest stosować RPGA z erytrocytem diagnostycznym uczulonym toksoidem błoniczym.

Epidemiologia błonicy

Jedynym źródłem zakażenia jest człowiek - osoba chora, osoba zdrowiejąca lub zdrowy nosiciel bakterii. Zakażenie następuje poprzez unoszące się w powietrzu kropelki, unoszący się w powietrzu kurz oraz poprzez różne przedmioty używane przez chorych lub zdrowych nosicieli: naczynia, książki, pościel, zabawki itp. W przypadku skażenia produktów spożywczych (mleko, kremy itp.) możliwe jest zakażenie drogą pokarmową. Największe wydalanie patogenu następuje w ostrej postaci choroby. Największe znaczenie epidemiologiczne mają jednak osoby z utajonymi, nietypowymi postaciami choroby, ponieważ często nie są hospitalizowane i nie są od razu wykrywane. Chory na błonicę jest zakaźny przez cały okres choroby i część okresu rekonwalescencji. Średni okres nosicielstwa bakterii u osób zdrowiejących waha się od 2 do 7 tygodni, ale może trwać do 3 miesięcy.

Zdrowi nosiciele odgrywają szczególną rolę w epidemiologii błonicy. W warunkach sporadycznej zachorowalności są głównymi dystrybutorami błonicy, przyczyniając się do zachowania patogenu w naturze. Średni czas trwania nosicielstwa szczepów toksynotwórczych jest nieco krótszy (około 2 miesięcy) niż nietoksynotwórczych (około 2-3 miesięcy).

Przyczyna powstawania zdrowego nosicielstwa toksynotwórczych i nietoksynotwórczych bakterii błonicy nie została w pełni ujawniona, ponieważ nawet wysoki poziom odporności antytoksycznej nie zawsze zapewnia całkowite uwolnienie organizmu od patogenu. Być może poziom odporności antybakteryjnej ma pewne znaczenie. Pierwszorzędne znaczenie epidemiologiczne ma nosicielstwo toksynotwórczych szczepów bakterii błonicy.

[ 12 ], [ 13 ], [ 14 ], [ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ]

Objawy błonicy

Na błonicę podatne są osoby w każdym wieku. Patogen może przedostać się do organizmu człowieka przez błony śluzowe różnych narządów lub przez uszkodzoną skórę. W zależności od lokalizacji procesu wyróżnia się błonicę gardła, nosa, krtani, ucha, oka, narządów płciowych i skóry. Możliwe są formy mieszane, na przykład błonica gardła i skóry itp. Okres inkubacji wynosi 2-10 dni. W klinicznie wyrażonej postaci błonicy w miejscu lokalizacji patogenu rozwija się charakterystyczne włóknikowe zapalenie błony śluzowej. Toksyna wytwarzana przez patogen najpierw atakuje komórki nabłonkowe, a następnie pobliskie naczynia krwionośne, zwiększając ich przepuszczalność. Wypływający wysięk zawiera fibrynogen, którego koagulacja prowadzi do powstania szarobiałej błoniastej powłoki na powierzchni błony śluzowej, która jest ściśle zespolona z tkanką podścielającą i po oderwaniu powoduje krwawienie. Konsekwencją uszkodzenia naczyń krwionośnych może być rozwój miejscowego obrzęku. Szczególnie niebezpieczna jest błonica gardła, która może powodować krztusiec błoniczy z powodu obrzęku błony śluzowej krtani i strun głosowych, z powodu którego 50-60% dzieci chorych na błonicę umierało w wyniku uduszenia. Toksyna błonicza, przedostając się do krwi, powoduje ogólne głębokie zatrucie. Dotyczy głównie układu sercowo-naczyniowego, współczulno-nadnerczowego i nerwów obwodowych. Tak więc objawy błonicy składają się z połączenia objawów miejscowych zależnych od lokalizacji wrót wlotowych oraz objawów ogólnych spowodowanych zatruciem toksyną i objawiających się w postaci adynamii, letargu, bladości skóry, niskiego ciśnienia krwi, zapalenia mięśnia sercowego, porażenia nerwów obwodowych i innych zaburzeń. Błonica u zaszczepionych dzieci, jeśli jest obserwowana, przebiega zwykle w postaci łagodnej i bez powikłań. Przed wprowadzeniem seroterapii i antybiotykoterapii śmiertelność wynosiła 50-60%, obecnie wynosi 3-6%.

Diagnostyka laboratoryjna błonicy

Jedyną metodą diagnostyki mikrobiologicznej błonicy jest diagnostyka bakteriologiczna, z obowiązkowym badaniem wyizolowanej hodowli maczugowców pod kątem toksyczności. Badania bakteriologiczne błonicy przeprowadza się w trzech przypadkach:

• w diagnostyce błonicy u dzieci i dorosłych z ostrymi procesami zapalnymi w obrębie gardła, nosa i nosogardła;
• według wskazań epidemiologicznych osób, które miały kontakt ze źródłem patogenu błonicy;
• osób nowo przyjętych do domów dziecka, przedszkoli, szkół z internatem i innych placówek specjalnych dla dzieci i dorosłych, w celu wykrycia wśród nich ewentualnych nosicieli prątka błonicy.

Materiałem do badania jest śluz z gardła i nosa, błona z migdałków lub innych błon śluzowych, które są punktem wejścia dla patogenu. Wysiew odbywa się na surowicy tellurytowej lub krwi i jednocześnie na skrzepniętej surowicy Roux (skrzepniętej surowicy końskiej) lub Loefflera (3 części surowicy bydlęcej + 1 część bulionu cukrowego), na której wzrost maczugowców pojawia się po 8-12 godzinach. Wyizolowaną kulturę identyfikuje się na podstawie kombinacji właściwości morfologicznych, kulturowych i biochemicznych, stosując, o ile to możliwe, metody serotypowania i fagotypowania. We wszystkich przypadkach obowiązkowy jest test toksyczności z wykorzystaniem jednej z powyższych metod. Cechy morfologiczne maczugowców najlepiej badać za pomocą trzech metod barwienia preparatu rozmazu: Grama, Neissera i błękitu metylenowego (lub błękitu toluidynowego).

Leczenie błonicy

Specyficznym leczeniem błonicy jest stosowanie surowicy przeciwbłoniczej zawierającej co najmniej 2000 IU na 1 ml. Surowicę podaje się domięśniowo w dawkach od 10 000 do 400 000 IU w zależności od ciężkości choroby. Skuteczną metodą leczenia jest stosowanie antybiotyków (penicylin, tetracyklin, erytromycyny itp.) oraz sulfonamidów. Aby pobudzić produkcję własnych antytoksyn, można stosować anatoksynę. Aby pozbyć się nosicielstwa bakteryjnego, należy stosować antybiotyki, na które dany szczep maczugowców jest wysoce wrażliwy.

Profilaktyka specyficzna błonicy

Podstawową metodą walki z błonicą jest masowe, planowe szczepienie populacji. W tym celu stosuje się różne warianty szczepionek, w tym łączone, czyli ukierunkowane na jednoczesne wytworzenie odporności przeciwko kilku patogenom. Najbardziej rozpowszechnioną szczepionką w Rosji jest DPT. Jest to zawiesina bakterii krztuśca zaadsorbowana na wodorotlenku glinu, zabita formaliną lub tiomersalem (20 mld w 1 ml) i zawierająca toksoid błoniczy w dawce 30 jednostek flokulujących i 10 jednostek wiążących toksoidu tężcowego w 1 ml. Dzieci szczepi się od 3 miesiąca życia, a następnie przeprowadza się szczepienia przypominające: pierwsze po 1,5-2 latach, kolejne w wieku 9 i 16 lat, a następnie co 10 lat.

Dzięki masowym szczepieniom, które rozpoczęto w ZSRR w 1959 r., zapadalność na błonicę w kraju do 1966 r. w porównaniu z 1958 r. zmniejszyła się 45-krotnie, a jej wskaźnik w 1969 r. wynosił 0,7 na 100 tys. ludności. Późniejsze zmniejszenie liczby szczepień w latach 80. doprowadziło do poważnych konsekwencji. W latach 1993–1996 Rosję ogarnęła epidemia błonicy. Zachorowali dorośli, głównie ci, którzy nie zostali zaszczepieni, oraz dzieci. W 1994 r. zarejestrowano prawie 40 tys. chorych. W związku z tym wznowiono masowe szczepienia. W tym okresie zaszczepiono 132 mln osób, w tym 92 mln dorosłych. W latach 2000–2001 odsetek dzieci zaszczepionych w ustalonym terminie wynosił 96%, a zaszczepionych powtórnie – 94%. Z tego powodu częstość występowania błonicy w 2001 r. zmniejszyła się 15-krotnie w porównaniu z 1996 r. Jednak aby ograniczyć występowanie do przypadków izolowanych, konieczne jest zaszczepienie co najmniej 97-98% dzieci w pierwszym roku ich życia i zapewnienie masowych szczepień uzupełniających w kolejnych latach. Jest mało prawdopodobne, aby błonica została całkowicie wyeliminowana w nadchodzących latach ze względu na powszechne nosicielstwo toksynotwórczych i nietoksynotwórczych bakterii błonicy. Rozwiązanie tego problemu również zajmie trochę czasu.