Infekcyjna mononukleoza: przeciwciała przeciwko wirusowi Epstein-Barr we krwi

Infekcyjna mononukleoza jest powszechną ogólnoustrojową chorobą limfoproliferacyjną, najczęściej wywoływaną przez wirus Epstein-Barr. Toxoplasma gondii i inne wirusy (CMV, ludzki wirus upośledzenia odporności i ludzki herpeswirus typu 6, uznany za przyczynę nagłej exishema) mogą powodować klinicznie podobne choroby. Te same czynniki etiologiczne są prawdopodobnie zdolne do wywołania rozwoju zespołu chronicznego zmęczenia.

Wirus Epsteina-Barra jest wirusem z grupy opryszczki, ma tropizm wobec limfocytów B, uporczywie utrzymuje się w komórkach gospodarza jako ukryta infekcja. Jest szeroko rozpowszechniony na całym świecie. Ze względu na strukturę i rozmiar, wirus Epsteina-Barr jest nieodróżnialny od innych wirusów opryszczki, ale różni się znacznie od nich pod względem właściwości antygenowych. Wirus posiada antygen błonowy (MA - antygen błonowy), jądrowy antygen (EBNA - Epsteina-Barris nukleinowy antygenu kapsydu) i antygen wirusowy (VCA - antygenu kapsydu wirusa).

Zakażenie występuje, gdy wirus jest przenoszony ze śliną. Wirus Epstein-Barr po spożyciu infekuje nabłonek gardła, powodując zapalenie i typowe dla gorączki kliniczne objawy początku mononukleozy zakaźnej. Ściśle limfotropowy wirus łączenia S3α błonę komórkową receptory limfocytów B indukuje proliferację limfocytów B poliklonalnych z odpowiednim wzrostem migdałków, węzłów chłonnych i śledziony systemowego. Limfocyty B transformowane (nabywają zdolności do nieskończoności podziału), w przypadku braku odpowiedniej komórkowej odpowiedzi immunologicznej, proces ten może zmieniać się oczywiście złośliwych (np związaną z chromosomem X zespół limfoproliferacyjne). Jeśli czynniki odporności komórkowej kontrolują replikację wirusa Epstein-Barr w organizmie, objawy kliniczne mononukleozy zakaźnej stopniowo zanikają.

Podobnie jak inne wirusy opryszczki, wirus Epsteina-Barra, która może trwać do utajonego zakażenia (jej DNA zawarte w rdzeniu małej ilości limfocytów B). Epizodyczny bezobjawowy reaktywacji zakażenia - to zjawisko powszechne, około 20% zdrowych ludzi młodych wydalać wirusa Epsteina-Barr wirus ze śliną. U osób z uszkodzonym odporności komórkowej (na przykład AIDS, zespół ataksja-teleangiektazja, biorców przeszczepu) mogą wykazywać wyraźne reaktywną leukoplakii włochatej zakażenia, śródmiąższowe zapalenie płuc, lub w postaci chłoniaka z komórek B monoklonalnym. W przypadku wirusa Epsteina-Barra etiologia raka nosogardzieli i chłoniaka Burkitta jest ze sobą powiązana.

Jednym z przejawów zakaźnej mononukleozy jest pojawienie się w obwodowej krwi atypowych limfocytów (do 10% całkowitej liczby limfocytów). Nietypowe limfocyty występują we krwi od początku okresu klinicznych objawów zakażenia. Ich zawartość we krwi osiąga szczyt pod koniec drugiego lub na początku trzeciego tygodnia i może utrzymywać się na tym poziomie do 1,5-2 miesięcy, całkowite zniknięcie występuje zwykle na początku 4 miesiąca od wystąpienia choroby. Obecność atypowych limfocytów jest stosunkowo niewrażliwym objawem zakażenia wywołanym wirusem Epsteina-Barra, ale ma całkowitą swoistość około 95%.

Proliferację limfocytów B poliklonalnych w infekcji wywołanych przez wirusa Epsteina-Barr, wytwarza się wiele różnych autoprzeciwciał u pacjenta, takich jak IgM anty-i (na zimno) aglutyniny, czynnika reumatoidalnego, przeciwciał przeciwjądrowych. Większość niezwykłych Ig, które pojawiają się w mononukleozie zakaźnej, nazywa się heterofilnymi przeciwciałami Paul-Bunnel. Przeciwciała te należące do klasy IgM mają powinowactwo do jagnięciny koni czerwonych ciałek krwi, nie są skierowane na dowolny antygen wirusa Epsteina-Barr. Heterofilne przeciwciała - Losowo wybrane produkty B-limfatycznej proliferacji (spowodowane przez wirus Epsteina-Barr), pojawiają się one w pierwszym tygodniu mononukleozy zakaźnej i stopniowo znikają w okresie rekonwalescencji, nie są zwykle wykrywane w 3-6 miesięcy.

Gdy początkowy ostry etap infekcji staje się utajony, genomy wirusa Epsteina-Barra (unikalne antygeny) pojawiają się w dużych ilościach we wszystkich komórkach, a antygen jądrowy jest uwalniany do środowiska. W odpowiedzi na antygen syntetyzuje się specyficzne przeciwciała - cenne markery stadium choroby. Krótko po zakażeniu limfocytów B wykrywa się wczesny antygen (EA), białko wymagane do replikacji wirusa Epsteina-Barra (a nie strukturalny składnik wirusowy). Do wczesnego antygenu w ciele pacjenta syntetyzuje się przeciwciała klas IgM i IgG. Wraz z pełną wiremią wirusa Epsteina-Barr pojawiają się antygeny wirusowego kapsydu (VCA) i antygenu błonowego (MA). Gdy proces infekcyjny ustępuje, niewielki procent limfocytów B zainfekowanych wirusem Epstein-Barr pozwala uniknąć zniszczenia immunologicznego i zatrzymuje genom wirusa w formie utajonej. Antygen jądrowy (EBNA) wirusa Epstein-Barr jest odpowiedzialny za jego powielanie i przeżycie.

Testy laboratoryjne mogą wykrywać przeciwciała przeciwko różnym antygenom.

Z serologicznych metod diagnozowania zakaźnej mononukleozy reakcja Paul-Bunnel (aglutynacja) jest najczęstsza, mająca na celu wykrycie heterofilnych przeciwciał w surowicy. Miano heterofilnych przeciwciał 1: 224 i wyższych w surowicy pacjenta uznaje się za istotne diagnostycznie, potwierdzając rozpoznanie mononukleozy zakaźnej. Heterofilowa aglutynacja jest dodatnia u 60% młodych ludzi po 2 tygodniach i 90% po 4 tygodniach od wystąpienia objawów klinicznych choroby. Dlatego też, aby zdiagnozować mononukleozę zakaźną, potrzeba kilku badań: w pierwszym tygodniu choroby (reakcja może być ujemna) i 1-2 tygodnie później (reakcja może stać się dodatnia). Zawartość przeciwciał heterofilnych zmniejsza się po zakończeniu ostrego okresu procesu zakaźnego, ale ich miano można określić w ciągu 9 miesięcy od pojawienia się objawów klinicznych. Reakcja Paul-Bunnel może zmienić się z pozytywnej na negatywną, nawet na tle pozostałych objawów hematologicznych i klinicznych u pacjenta. Czułość metody u dorosłych wynosi 98%, swoistość wynosi 99%. U dzieci z mononukleozą zakaźną przed 2 rokiem życia, przeciwciała heterofilne można wykryć tylko u 30% pacjentów, w wieku 2-4 lat - w 75%, w ciągu 4 lat - w ponad 90%. Czułość metody u dzieci jest mniejsza niż 70%, swoistość wynosi 20%. Redukcja, a następnie ponowne zwiększenie miana heterofilnych przeciwciał może wystąpić w odpowiedzi na inną infekcję (najczęściej w infekcjach wirusowych górnych dróg oddechowych). Odpowiedź Paul-Bunnel nie jest specyficzna dla wirusa Epstein-Barr. Miano heterofilnych przeciwciał nie daje reakcji krzyżowej i nie koreluje ze specyficznymi przeciwciałami przeciw wirusowi Epsteina-Barr, ani nie koreluje z ciężkością przebiegu choroby. Test jest bezużyteczny w diagnozowaniu przewlekłej postaci zakaźnej mononukleozy (dodatni średnio tylko u 10% pacjentów).

Miana 1:56 lub mniej można znaleźć u zdrowych ludzi i pacjentów z innymi chorobami (reumatoidalne zapalenie stawów, różyczka). Fałszywie pozytywne wyniki testu są spotykane bardzo rzadko.

Obecnie metoda "pojedynczego plamki" (aglutynacja szkiełkowa) jest stosowana do oznaczania przeciwciał przeciwko erytrocytom tryka, jest ona początkowo stosowana jako test przesiewowy. Według czułości jest to porównywalne z reakcją Paul-Bunnel. Ślizgowe fałszywie pozytywny może wynosić od około 2% do badań (białaczka, złośliwy chłoniak, malaria, różyczki, wirusa zapalenia wątroby, rak trzustki), jak i fałszywie ujemne dorosłych - 5-7% przypadków.

Należy zauważyć, że spektrum diagnostycznych systemów testowych produkowanych przez firmy w oparciu o oznaczanie miana przeciwciał jest bardzo szerokie, dlatego konieczne jest skupienie się na miano diagnostycznym przeciwciał określonych w instrukcjach dla systemów testowych.

Jeśli heterofilne przeciwciała nie są identyfikowane, a obraz kliniczny odpowiada mononukleoza zakaźna, konieczne jest zbadanie surowicy dla konkretnych przeciwciał IgM i IgG. Do detekcji specyficznych przeciwciał przeciwko wirusowi Epsteina-Barr, stosując metody immunofluorescencyjne pośrednich (pozwala na wykrycie przeciwciał skierowanych przeciwko antygenom VCA i EA) antialexin-immunofluorescencji (wykrycia przeciwciał EA VCA i antygenu EBNA) i IFA.

Przeciwciała na składnik antygenu EA (anty-EA-D) pojawiają się nawet w ukrytym okresie pierwotnej infekcji i szybko zanikają wraz z odzyskiem.

Przeciwciała przeciw składnikowi antygenu EA (anty-EA-R) można wykryć 3-4 tygodnie po klinicznych objawach choroby. Utrzymują się w surowicy krwi przez około rok, często wykrywane z nietypowymi lub przewlekłymi prądami zakaźnej mononukleozy. Zazwyczaj przeciwciała te można znaleźć w przypadku chłoniaka Burkitta.

Przeciwciała przeciwko IgM klasy VCA (IgM anty-VCA) pojawiają się bardzo wcześnie, zwykle do objawów klinicznych, są wykrywane na początku choroby w 100% przypadków. Wysokie miana występują w 1-6 tygodniu od początku infekcji, zaczynają zmniejszać się od 3 tygodnia i zwykle znikają po 1-6 miesiącach. IgM anty-VCA prawie zawsze występuje w surowicy z aktywną infekcją, więc metoda ich wykrywania jest bardzo wrażliwa i specyficzna dla ostrego epizodu zakaźnej mononukleozy.

Przeciwciała przeciwko IgG klasy VCA (anty-VCA IgG) mogą pojawić się wcześnie (w 1-4 tygodniu), ich ilość osiąga maksimum w drugim miesiącu choroby. Na początku choroby występują w 100% przypadków. Tylko 20% pacjentów wykazało 4-krotny wzrost miana w badaniu sparowanych surowic. Miano zmniejsza się z odzyskiem, ale występuje w ciągu kilku lat po zakażeniu, dlatego jest bezużyteczne w diagnozowaniu mononukleozy zakaźnej. Obecność przeciwciał IgG przeciwko VCA wskazuje na stan po infekcji i odporności.

Przeciwciała przeciwko EBNA (anty-EBNA) pojawiają się później niż wszystkie, rzadko występują w ostrej fazie choroby. Ich zawartość wzrasta w okresie rekonwalescencji (w ciągu 3-12 miesięcy), mogą utrzymywać się we krwi przez wiele lat po chorobie. Brak anty-EBNA w obecności IgM anty-VCA i anty-EA IgM wskazuje na obecne zakażenie. Wykrywanie anty-EBNA po uprzedniej negatywnej reakcji wskazuje na istniejącą infekcję. Podczas stosowania metody ELISA możliwe jest jednoczesne wykrywanie obecności klas IgM i IgG przeciwko EBNA. Jeśli ilość IgM anty-EBNA jest większa niż IgG anty-EBNA, należy rozważyć ostrą infekcję, z odwrotną zależnością poprzednią.

Na korzyść ostrej pierwotnej infekcji, jeden lub więcej z następujących objawów wskazuje na obecność:

• IgG anty-VCA (wykryte wcześnie, a później zawartość jest zmniejszona);
• Wysokie miano (więcej niż 1: 320) lub 4-krotne zwiększenie miana IgG przeciw VCA podczas choroby;
• przejściowy wzrost miana przeciwciał anty-EA-D (1:10 lub więcej);
• wczesne anty-VCA IgG bez anty-EBNA, a później - pojawienie się anty-EBNA.

Ostre lub pierwotne zakażenie powodowane przez wirusa Epsteina-Barr, wykluczono miana anty-VCA i IgG anty-EBNA w surowicy nie ulegają zmianie w czasie badania (w ostrej fazie i odzysku).

Stała obecność wczesnego antygenu i anty-VCA IgG w wysokich mianach wskazuje na przewlekłą fazę infekcji.

Wykrywanie przeciwciał przeciwko wirusowi Epstein-Barr jest stosowane do diagnozowania mononukleozy zakaźnej i przewlekłych zakażeń wywołanych wirusem Epstein-Barr.

Przeciwciała przeciwko wirusowi Epsteina-Barr można wykryć w następujących chorób: wtórnego niedoboru odporności, w tym zakażeń HIV, raka nosowej części gardła, chłoniak Burkitta, infekcji CMV, kiła, choroba z Lyme, brucelozy, i inne.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7]