Markery immunohistochemiczne w diagnostyce zmian przedrakowych błony śluzowej jamy ustnej i czerwonej granicy warg

Aktualne i skuteczne rozpoznanie zmian nowotworowych błony śluzowej jamy ustnej (CRS) i obręczy czerwonej wargi (CCG) pozostaje poważnym problemem onkostomatologii. Rak płaskonabłonkowy jamy ustnej zajmuje szóste miejsce na świecie pod względem częstotliwości występowania nowotworów złośliwych wszystkich lokalizacji. W Federacji Rosyjskiej zapadalność na nowotwory złośliwe jamy ustnej wynosi 2-4% ogólnej liczby nowotworów złośliwych człowieka.

W ostatnich latach struktura chorób błony śluzowej jamy ustnej uległa znaczącym zmianom, w szczególności wzrostowi udziału chorób przedrakowych. W związku z tym skuteczne nieinwazyjne wykrywanie oznak złośliwości pozostaje pilnym zadaniem stomatologii.

Pomimo pozornej prostoty klinicznej obrazowania predyktorem zmian błony śluzowej jamy ustnej i CGC w związku z lokalizacji zewnętrznej, determinacji chorobową zmiany przedrakowe, opartej tylko na wrażeniu przez inspekcje i badania palpacyjnego, często prowadzą do błędów diagnostycznych zostały w różnym stopniu rogowacenia lub owrzodzenia nawet elementy markornyh porażka czyni je trudnodifferentsiruemymi. Szczególnie trudne wczesne rozpoznanie nowotworu, ponieważ jej objawy kliniczne pojawiają się nieco później faktycznie doszło transformacji nowotworowej.

Tak więc, badania V.P. Kharchenko i in. Wykazano, że ponad 2/3 pacjentów w momencie leczenia w placówce medycznej i ustalenie rozpoznania ma III-IV stadia choroby. Jednym z powodów późnego leczenia jest "rozmycie" obrazu klinicznego na początkowych etapach choroby. Ponadto udowodniono potrzebę prowadzenia prac organizacyjnych i metodologicznych oraz podniesienia poziomu wiedzy dentystów na temat wczesnych objawów klinicznych chorób przedrakowych błony śluzowej jamy ustnej. Przeprowadzone badania wykazały, że tylko 42,8% dentystów różnicuje wczesne objawy raka jamy ustnej, 4,2% respondentów może prawidłowo przeprowadzić podstawowe środki diagnostyczne do wykrywania raka tej lokalizacji.

Odsetek nieuleczalnych postaci raka błony śluzowej jamy ustnej z powodu błędów diagnostycznych, według różnych autorów, osiąga 58,4-70%. Sytuację komplikuje nierozwiązany problem diagnozy klinicznej prekursora, zwłaszcza trudność w różnicowaniu początku choroby nowotworowej, a także problem wyboru metody leczenia choroby przednowotworowej. Nie ma żadnych bezwzględnych i względnych wskazań do biopsji, szczególnie na etapach leczenia zachowawczego. Do tej pory w piśmiennictwie nie ma jednego przykładu kryterium diagnostycznego poziomu klinicznego, do którego dentysta mógłby się odnieść przy wyborze odpowiedniej metody leczenia konkretnej choroby przednowotworowej.

Rozwiązywanie problemów diagnostycznych, które większość autorów widziała w pomocniczych metodach diagnostycznych (cytologia, cheilostomatoskopia, biomikroskopia, optyczna koherentna tomografia). Jednak metody te są raczej subiektywne, ponieważ mają jedynie opisowy charakter jakościowych zmian w dotkniętych tkankach. Jednym ze sposobów ilościowego określenia zmian morfologicznych jest określenie markerów immunohistochemicznych.

Wprowadzenie do współczesnej praktyki nowoczesnych morfologicznych metod weryfikacji nowotworów znacznie poprawiło jakość diagnostyki i leczenia nowotworów złośliwych. Metodologicznych możliwości nowoczesnej onkologii cząsteczkowej poszerzonym obecnie za pomocą badań immunohistochemicznych można określić nie tylko z histologicznie diagnozę nowotworu, ale również nadać mu właściwości morfofunkcjonalnego pod względem agresywność i rokowaniem w stosunku do stanów przedrakowych i raka już rozwijać.

Według współczesnych pomysłów, podstawą złośliwej transformacji komórek jest aktywacja pojedynczych lub wielu komórkowych onkogenów lub genów supresorowych. Jest obserwowany w 30% ludzkich nowotworów złośliwych i w wielu przypadkach można go wykryć immunohistochemicznie. Badano nowotwory onkogenów ras p21, HER2 / neu, bcl-2 i supresorowe p53 i Rb w różnych nowotworach. Niektóre z wymienionych onkogenów (i geny supresyjne) są niezależnymi znakami prognostycznymi i predykcyjnymi.

Nabłonek błony śluzowej jamy ustnej jest locus praedifectionis powstawania guzów nowotworowych. Czynniki zewnętrzne (urazowe strony zamknięcia w ostre krawędzie uzupełnień niewypłacalny konstrukcja ortopedycznych irracjonalna indywidualnie do higieny jamy ustnej, zapalne i przyzębia destrukcyjne zmian genetycznych) wraz z (czynników dziedzicznych) mogą odgrywać istotną rolę w powstawaniu raka tej lokalizacji. W rozwoju płaskonabłonkowego raka błony śluzowej jamy ustnej, uszkodzenia mogą być zaangażowane w mechanizmy kontrolujące procesy rozrostu nabłonkowego i metaplazji komórek płaskokomórkowych.

Morfologiczne cechy nabłonka błony śluzowej jamy ustnej podczas nowotworu związanego ze zmianami w zestawie różnicowania (fenotyp cytokeratyny głównie warstwa nabłonkowa) markerów ekspresji CEA, jak również jako wskaźnik proliferacji Ki - 67.

P53 jest genem supresorowym guza, którego białkowy produkt jest jądrowym czynnikiem transkrypcyjnym o wielu funkcjach, w tym blokowaniu przechodzenia komórek przez cykl komórkowy i indukcji apoptozy. Białko p53 ulega ekspresji we wszystkich komórkach ciała. W przypadku braku uszkodzenia aparatu genetycznego, białko p53 jest w stanie nieaktywnym, a po uszkodzeniu DNA DNA ulega aktywacji. Aktywacja polega na nabyciu zdolności do wiązania DNA i aktywacji transkrypcji genów, które zawierają sekwencję nukleotydową w regionie regulatorowym, która jest oznaczona przez element odpowiedzi p53. Mutacja p53 w komórkach występuje około 50% nowotworów prowadzi do syntezy białka z utraty jego funkcji, ale o wysokiej stabilności i gromadzenia się w jądrze, które immunohistochemiczne ekspresji w odrębnym barwienia jądrowego.

Typ "dziki" genu nadekspresyjnego wt-53 i kodowanego przez niego białka p53 odgrywa główną rolę w rozwoju apoptozy. Gdy DNA ulega uszkodzeniu, następuje ekspresja genu wt53 i odpowiedniego białka. Ten ostatni blokuje cykl komórkowy w fazie G1-S i w ten sposób hamuje dalszą replikację uszkodzonego DNA, który jest syntetyzowany w fazie S, i tworzy warunki dla usuwania uszkodzonego miejsca i naprawy jego zmienionego miejsca. Jeśli nastąpi naprawa, komórka nadal dzieli i generuje zdrowe komórki. Jednakże, jeżeli reparacja nie występuje, wówczas włączane są inne mechanizmy zapewniające zniszczenie takiej komórki z uszkodzonym (mutagennym) DNA, tj. Rozwija się program genetyczny śmierci komórki - apoptoza.
W ostatnich latach zasugerowano, że status p53 może być decydującym czynnikiem określającym wrażliwość guza na chemio- i radioterapię. Potwierdzeniem tego założenia są liczne badania dowodzące, że zmutowany p53 jest czynnikiem złego rokowania i nieskuteczności terapii adiuwantowej dla różnych nowotworów błony śluzowej jamy ustnej.

Markery proliferacji są także wysoce informacyjną wartością diagnostyczną w przewidywaniu przebiegu nowotworów złośliwych. Aktywność proliferacyjna jest wiodącym czynnikiem zarówno w mechanizmie złośliwej transformacji komórek, jak iw biologicznym zachowaniu się już pojawiających się guzów. Obiecującym markerem aktywności proliferacyjnej jest antygen Ki-67, który ulega ekspresji praktycznie we wszystkich fazach cyklu komórkowego i odpowiednio odzwierciedla wielkość puli proliferacyjnej. Gen kodujący Ki-67 znajduje się na długim ramieniu chromosomu 10. Ki-67 odnosi się do białek regulatorowych. Jego pojawienie się zbiega się z wejściem komórki do mitozy, co umożliwia jej wykorzystanie jako uniwersalnego wskaźnika proliferacji w ocenie rozwoju nowotworów złośliwych.

Przeprowadzono wiele badań, które badają wartość diagnostyczną markerów immunohistochemicznych w przewidywaniu przebiegu przedrakowych zmian błony śluzowej jamy ustnej i czerwonej granicy warg. Murti PR i in. Badali ekspresję p53 z czerwonym SSRI o stałej szybkości. Gdy określono metodę immunohistochemiczną, ekspresja p53 nie ujawniła złośliwego statusu prekursora błony śluzowej jamy ustnej. Autorzy sugerują, że szczyt nadekspresji p53 jest bliski czasowi transformacji prekursora w raka i nie można go zastosować jako wczesnego markera do przewidywania złośliwości prekursora błony śluzowej jamy ustnej. Inni badacze odkryli, że ludzki gen TP53 koduje co najmniej 9 różnych izoform. Inny członek rodziny p53, p63, zawiera 6 różnych izoform i odgrywa kluczową rolę w rozwoju błony śluzowej jamy ustnej, gruczołów ślinowych, zębów i skóry. Sugerowano, że p63 jest związane z rozwojem płaskonabłonkowego raka głowy i szyi. Jednak nie zaobserwowano statystycznie istotnych zmian w ekspresji nowych izoform p53 i p63 w prekursorach SSRI w porównaniu z niezmodyfikowaną tkanką. Badania przeprowadzone przez De Sousę FA potwierdziły znaczenie prognostyczne markera p53 w określaniu potencjału złośliwej transformacji prekursora błony śluzowej jamy ustnej. Jednocześnie niektórzy autorzy uważają, że p53 nie może być stosowany jako pojedynczy marker do przewidywania rozwoju raka.

Równie obiecujące prognostyczny immunohistochemiczne płaszczyzny detekcji jest przedstawiony w badanych próbkach tkanek podoplanina - integralne błony mukoproteinę wyrażony jako niezmieniony i zmianie zapalne i nowotworowe komórki śródbłonka kapilar limfatycznych. Badacze stwierdziliśmy istotną statystycznie podoplanina ekspresji związek iABCG2 (wiążąca ATP podgrupy białko G2) z ryzykiem transformacji złośliwej liszaja płaskiego (ryzyko była znacznie większa w koekspresji podoplanina i ABCG2, niż bez koekspresji podoplanina i ABCG2) i stwierdził, że podoplanin i ABCG2, mogą być stosowane jako markerów do oceny ryzyka złośliwej transformacji przedrakowych RBCU

Badania zagranicznych naukowców potwierdziły znaczenie diagnostyczne ekspresji Fas / FasL jako biomarkerów rozwoju raka. Fas jest glikoproteiną typu (synonimy APO-I, CD95), i wywołuje apoptozę w komórkach po oddziaływaniu z ligandu Fas (FasL) lub agonistycznego przeciwciała monoklonalnego przeciwko Fas.

W tym samym czasie wiadomo, że Fas ulega ekspresji w praktycznie wszystkich typach tkanek. Zwiększoną ekspresję Fas obserwuje się w nerkach, wątrobie, sercu i grasicy. Ponadto receptor ten ulega ekspresji na wielu nowotworach, a także komórkach zakażonych wirusem. Przyczyną oporności różnych typów komórek na apoptozę zależną od Fas może być zwiększona produkcja rozpuszczalnego Fas przez te komórki. Rozpuszczalny Fas jest produktem alternatywnego splicingu i jest zdolny do hamowania apoptozy indukowanej przez agonistyczne przeciwciała monoklonalne przeciwko Fas lub FasL.

Tak więc, niejednoznaczne interpretacja wyników badań przeprowadzonych przez różnych autorów, prowadzi do wniosku, że w obecnym stanie onkologii cząsteczkowej wykorzystać znacznik immunohistochemiczne prospektywnie w połączeniu z innymi metodami diagnostyki i prognozowania przednowotworowych zmian błony śluzowej jamy ustnej.

Szczególne znaczenie ma kwestia uszeregowania markerów immunohistochemicznych pod kątem istotności diagnostycznej. Uważamy, że w kolejności malejącej ważności mogą one być ułożone w następującej kolejności:

1. Markery immunohistochemiczne o wysokim znaczeniu diagnostycznym: subplanina, ABCG2, bcl-2;
2. Markery immunohistochemiczne o średnim stopniu istotności diagnostycznej: Bax, MMP-9;
3. Obiecujące markery immunohistochemiczne, których znaczenie diagnostyczne wymaga dalszych badań: MMP-2, MT1-MMP, Fas / FasL;
4. Nie udowodniono markerów immunohistochemicznych, których znaczenie diagnostyczne do przewidywania przebiegu chorób przedrakowych: p53, p63.

Na podstawie analizy danych literaturowych można stwierdzić, że określenie immunohistochemicznych markerów nie powinny być traktowane jako jedynej metody prognozowania przebiegu przedrakowych zmian błony śluzowej jamy ustnej i identyfikacji ryzyko przemiany nowotworowej, ale mimo to metoda ta ma wysoką wartość diagnostyczną w połączeniu z innymi metody przewidywania przebiegu chorób przedrakowych.

Starszy badacz Kuznetsova Roza Gilevna. Markery immunohistochemiczne w diagnostyce zmian przedrakowych błony śluzowej jamy ustnej i czerwonych brzegów ust // Medycyna praktyczna. 8 (64) grudnia 2012 r. / Tom 1

[1], [2], [3], [4], [5]