Agregacja płytek za pomocą rystocetyny (czynnik von Willebranda)
Ostatnia recenzja: 23.04.2024
Cała zawartość iLive jest sprawdzana medycznie lub sprawdzana pod względem faktycznym, aby zapewnić jak największą dokładność faktyczną.
Mamy ścisłe wytyczne dotyczące pozyskiwania i tylko linki do renomowanych serwisów medialnych, akademickich instytucji badawczych i, o ile to możliwe, recenzowanych badań medycznych. Zauważ, że liczby w nawiasach ([1], [2] itd.) Są linkami do tych badań, które można kliknąć.
Jeśli uważasz, że któraś z naszych treści jest niedokładna, nieaktualna lub w inny sposób wątpliwa, wybierz ją i naciśnij Ctrl + Enter.
Wartości odniesienia (norma) aktywności czynnika von Willebranda wynoszą 58-166%.
Czynnik von Willebranda syntetyzuje komórki śródbłonka i megakariocyty. Jest niezbędny do prawidłowej adhezji płytek krwi i ma zdolność przedłużenia okresu półtrwania czynnika VIII. Czynnik VIII krzepnięcia plazmy - antihemophilic globuliny A - krąży w krwi jako kompleks trzy podjednostki, oznaczone VIII K (jednostka koagulację), VIII-Ar (główny antygenowe znacznika) i VIII-VWF (czynnik von Willebranda wiąże się z VIII-Ar ). Uważa się, że czynnik von Willebranda, reguluje syntezę koagulacji antihemophilic globuliny A (VIII-a) i jest zaangażowana w homeostazie naczyniowej, płytek.
Choroba von Willebranda jest dziedziczną chorobą charakteryzującą się wydłużeniem czasu trwania krwawienia, zmniejszeniem aktywności kofaktora rystocetyny i zmniejszeniem aktywności krzepnięcia czynnika VIII (w różnym stopniu). Objawy kliniczne choroby są podobne do objawów w trombocytopatii. Jednak u pacjentów ze znacznym spadkiem aktywności czynnika VIII można zaobserwować krwiaki i hemartrozy.
Na podstawie badań laboratoryjnych, które pozwalają na określenie struktury i aktywności czynnika von Willebranda, rozróżnia się następujące formy choroby.
- Typ I (70% wszystkich przypadków), charakteryzuje się niewielkim rozwijanego kofaktora ristocetyny (von Willebranda), a aktywność koagulantu (VIII-k) podczas normalnej struktury makrocząsteczkowej, czynnika von Willebranda.
- Typ II: podstawą jest selektywny deficyt polimerów czynnika Willebranda o wysokiej masie cząsteczkowej spowodowany zaburzeniami struktury tego białka.
- Typ IIB wynika ze zwiększonej interakcji między czynnikiem von Willebranda i płytkami krwi, a zwiększony klirens agregatów płytek prowadzi do trombocytopenii.
- Typ III charakteryzuje się poważnym deficytem ilościowym czynnika von Willebranda, co prowadzi do klinicznie znaczącego zmniejszenia aktywności czynnika VIII (VIII-k).
Zawartość czynnika von Willebranda jest określona w tych przypadkach, w których wydłużenie czasu krwawienia, liczba płytek krwi w granicach wartości odniesienia, a nie ma żadnych oczywistych przyczyn zaburzeń płytek krwi. Aby ocenić czynnika von Willebranda ilościowego oznaczania zawartości czynnika von Willebranda (aktywność kofaktora rystocetyny-badawczych) zbadano aglutynację płytek indukowaną przez rystocetyny i antygenową strukturę czynnika von Willebranda związany z czynnikiem VIII (VIII vWF).
Oznaczanie agregacji płytek ristocetyną w osoczu służy do ilościowego oznaczenia czynnika von Willebranda. Ustalono liniową zależność między stopniem agregacji rystocyninowej a ilością czynnika von Willebranda. Metoda opiera się na zdolności tego antybiotyku (rystocetyny) do stymulacji interakcji in vitro czynnika von Willebranda z płytkową glikoproteiną Ib. W większości przypadków choroby von Willebranda dochodzi do naruszenia agregacji rystocetyny z normalną reakcją na działanie ADP, kolagenu i adrenaliny. Zakłócenie agregacji rystocetyny stwierdza się również w makrofitowej skrzeplinie z drobnoustrojami Bernarda-Souliera (brak receptorów rystocetinowych na błonie płytkowej). W celu różnicowania stosuje się test z dodatkiem normalnego osocza: przy chorobie von Willebranda po dodaniu prawidłowego osocza, agregacja rystocetyny zostaje znormalizowana, podczas gdy w zespole Bernarda-Souliera tak się nie dzieje.
Badanie można również zastosować w diagnostyce różnicowej hemofilii A (niedobór czynnika VIII) i choroby von Willebranda. W hemofilii zawartość VIII-k jest znacznie zmniejszona, a zawartość VIII-PV mieści się w normalnym zakresie. Klinicznie różnica ta przejawia się w tym, że hemofilia powoduje zwiększone krwawienie typu krwiak, aw przypadku choroby von Willebranda - krwiak.
W większości przypadków choroby von Willebranda, z wyjątkiem typu IIB, zmniejsza się aglutynacja płytek krwi wywołana ristocetyną.
Strukturę antygenową vWF związaną z czynnikiem VIII (VIII-PV) wykrywa się za pomocą różnych metod immunologicznych, a rozkład vWF według wielkości cząsteczek określa się za pomocą elektroforezy w żelu agarozowym. Testy te służą do ustalenia rodzaju choroby von Willebranda.
Badanie agregacji płytek z różnymi induktorami przeprowadza się nie tylko w celu wykrycia nieprawidłowości funkcji agregacji płytek krwi. Badanie to pozwala ocenić skuteczność terapii przeciwpłytkowej, wybrać poszczególne dawki leków i prowadzić monitorowanie leków.
[