Testy na wirusa brodawczaka ludzkiego: jak wykonać, dekodowanie

Wirus brodawczaka ludzkiego stanowi poważne zagrożenie. Diagnostyka jest niezbędna do określenia szczepu zakażenia i ryzyka jego onkogenności. Takie informacje pozwalają nam na stworzenie najbardziej odpowiedniego i skutecznego planu leczenia.

Wysokiej jakości diagnostykę przeprowadza kilku specjalistów jednocześnie. Główne wskazania do badania organizmu to:

• Aktywne życie seksualne i częsta zmiana partnerów seksualnych.
• Świąd, pieczenie w okolicach narządów płciowych, nietypowa wydzielina.
• Pojawienie się nowych narośli na skórze i błonach śluzowych w postaci brodawczaków, brodawek i kłykcin kończystych.

Diagnostyka wirusa brodawczaka ludzkiego opiera się na kompleksie metod laboratoryjnych i instrumentalnych:

• Badanie wzrokowe i zbieranie wywiadu – lekarz bada dotknięte obszary i pyta, kiedy wysypka lub inne objawy HPV pojawiły się po raz pierwszy. Ocenia rodzaj i kształt nowotworów. Jeśli występują narośla anogenitalne, wykonuje się badanie szyjki macicy i uretroskopię.
• Cytologia rozmazów i zeskrobiny – jest wykonywana w celu ustalenia zmian morfologicznych na poziomie komórkowym związanych z HPV. Dokładność tej metody zależy od techniki pobierania materiału i kwalifikacji techników laboratoryjnych.
• Kolposkopia to badanie błony śluzowej w celu wykrycia subklinicznych form infekcji. Rozpoznanie potwierdza obecność następujących czynników: leukoplakii, mozaiki, nakłucia, strefy nieprawidłowych przekształceń.
• Biopsja to pobranie niewielkiej ilości chorej tkanki w celu przeprowadzenia badania mikroskopowego. Zazwyczaj wykonuje się ją, gdy istnieje podejrzenie zajęcia szyjki macicy.
• Badanie histologiczne – materiał uzyskany w wyniku biopsji wysyłany jest do badań laboratoryjnych w celu wykrycia stanów przednowotworowych i innych nieprawidłowości komórkowych.
• PCR – wykonuje się w celu identyfikacji poszczególnych typów HPV. Do diagnostyki wykorzystuje się krew, mocz, śluz i inne płyny tkankowe.
• Test Digene jest jedną z najbardziej wiarygodnych metod diagnostycznych. Posiada wysoką czułość na wirusa brodawczaka ludzkiego. Pozwala określić genotyp i jego przynależność do grupy wysoko- lub nisko-onkogennej.

Obecnie istnieje wiele metod pozwalających wykryć zakażenie wirusem HPV i określić stopień jego agresywności.

Badanie przesiewowe w kierunku wirusa brodawczaka ludzkiego

Obowiązkowym testem dla pacjentów z predyspozycjami do procesów złośliwych w organizmie jest badanie przesiewowe. Wirus brodawczaka ludzkiego jest również powodem do wykonania tego badania laboratoryjnego.

Pierwsze badanie przesiewowe zaleca się kobietom w wieku 30 lat. Analiza jest konieczna, aby wykryć nie tylko wirusa brodawczaka, ale również zapobiec erozyjnym zmianom szyjki macicy związanym z wirusem HPV.

Najczęściej pacjentom przepisuje się następujące rodzaje badań przesiewowych:

• Cytologiczny test PAP – do badania używa się zeskrobin z szyjki macicy umieszczonych w płynnym medium. Pomaga zidentyfikować onkologiczne szczepy HPV na wczesnym etapie rozwoju.
• Rozszerzony – identyfikuje genotypy o wysokiej onkogenności i ich stężenie w organizmie.
• Reakcja łańcuchowa polimerazy ma wysoką wartość diagnostyczną, gdyż pozwala na identyfikację wszystkich typów wirusa brodawczaka ludzkiego.

Badanie przesiewowe w kierunku wirusa HPV wykonuje się zarówno w trakcie diagnostyki choroby, jak i w trakcie terapii oraz w celu oceny efektów leczenia.

Test na wirusa brodawczaka ludzkiego

Jeśli podejrzewa się obecność wirusa brodawczaka, wszystkim pacjentom przepisuje się zestaw procedur diagnostycznych. Analiza HPV polega na określeniu rodzaju wirusa w warunkach laboratoryjnych. Do badania wykorzystuje się różne płyny biologiczne i tkanki.

Najczęściej pobiera się wymaz z narządów płciowych do analizy. Pobranie materiału z tego obszaru jest konieczne nawet przy braku objawów wizualnych brodawczaka. Uzyskaną biopsję bada się pod mikroskopem pod kątem komórek nabłonkowych zmienionych przez wirusa. Na podstawie wyników diagnostycznych określa się rodzaj zakażenia i ryzyko jego onkogenności.

Podczas planowania ciąży obowiązkowe jest wykonanie testu na zakażenie brodawczakowate, aby ustalić przyczyny niepłodności i patologie ciąży. W takim przypadku test jest przepisywany obojgu partnerom jednocześnie. Wynika to z faktu, że wirus przenosi się podczas intymnego kontaktu. Na podstawie wyników badania lekarz może przepisać dodatkowe metody diagnostyczne i opracować plan leczenia.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]

Analiza ilościowa wirusa brodawczaka ludzkiego

Aby wykryć wirusa brodawczaka, określić jego rodzaj i stopień aktywności, przeprowadza się analizę ilościową. Istnieje kilka metod określania HPV, rozważmy je:

1. Reakcja łańcuchowa polimerazy – PCR jest standardem w diagnostyce HPV. Analiza opiera się na zwiększeniu liczby kopii wirusowego DNA w biopsji. Metoda ta pozwala na wykrywanie nawet pojedynczych typów wirusa z dużą dokładnością.
2. Test Digene – cechą charakterystyczną tej metody jest niezawodne wykrywanie genotypów o zwiększonej onkogenności. Do analizy wykorzystuje się różne płyny biologiczne i materiały.
3. Określenie obecności przeciwciał wirusowych - analiza ujawnia specyficzne białka układu odpornościowego. Każdy czynnik wirusowy, który dostaje się do organizmu, promuje produkcję unikalnych immunoglobulin. Jeśli w surowicy krwi zostaną wykryte przeciwciała przeciwko wirusowi brodawczaka ludzkiego, oznacza to infekcję organizmu.

Do przeprowadzenia analizy ilościowej wykorzystuje się krew włośniczkową (z palca), zeskrobin ze skóry i błon śluzowych oraz biopsje tkanek. Na 12 godzin przed wykonaniem testów należy zaprzestać przyjmowania leków przeciwgrzybiczych, przeciwwirusowych, przeciwdrobnoustrojowych i innych leków, w tym środków antykoncepcyjnych. W dniu diagnozy należy wziąć prysznic i dokładnie umyć okolice intymne, jeśli zostaną z nich pobrane zeskrobin. Ponadto na 2-3 dni przed zabiegiem należy powstrzymać się od stosunków płciowych.

Lekarz prowadzący interpretuje uzyskane wyniki. Lekarz bierze pod uwagę nie tylko dane z przeprowadzonej diagnostyki, ale także objawy kliniczne choroby. W przeciwnym razie wyniki mogą zostać błędnie zinterpretowane.

DNA wirusa brodawczaka ludzkiego, PCR

Jedną z najpowszechniejszych i najpewniejszych metod wykrywania DNA wirusa brodawczaka ludzkiego jest PCR. Do przeprowadzenia reakcji łańcuchowej polimerazy wykorzystuje się różne materiały biologiczne: krew, mocz, rozmazy z błony śluzowej, płyn owodniowy. Analiza pozwala ustalić obecność zakażenia, nawet jeśli jest ono utajone w organizmie.

Zasada tej metody diagnostycznej opiera się na izolacji ludzkiego i wirusowego DNA. Każdy kwas deoksyrybonukleinowy składa się z czterech nukleotydów:

• A – adenina.
• T – tymidyna.
• G – guanina.
• C – cytozyna.

Zgodnie z zasadami genetyki mają one pewną kolejność kombinacji: A+T, G+C. Wszystkie żywe organizmy mają własne DNA, które można wyizolować. PCR rozpoznaje fragmenty patogennego DNA, izolując w ten sposób patogen.

Zalety PCR:

1. Uniwersalność – oprócz wirusa brodawczaka ludzkiego, w trakcie badania można wykryć wiele innych patogenów chorób zakaźnych.
2. Wysoka czułość – metoda oprócz wykrycia obecności wirusa, pozwala także określić jego rodzaj i inne cechy.
3. Skuteczność – niezawodnie identyfikuje wymaganą infekcję.
4. Szybkość – wyniki testu można otrzymać w ciągu 24 godzin od wykonania testu.

Przygotowanie do analizy:

• Należy zaprzestać przyjmowania tabletek antykoncepcyjnych na tydzień przed planowanym badaniem, ponieważ mogą one zaburzyć wyniki.
• Badania nie wykonuje się w trakcie miesiączki oraz przez 3 dni po jej zakończeniu.
• Należy powstrzymać się od stosunków płciowych na dwa dni przed badaniem.
• Diagnostykę wykonuje się na czczo, ostatni posiłek powinien być 12 godzin przed analizą. Można jednak pić wodę.
• W dniu wykonania testu HPV PCR nie zaleca się wykonywania zabiegów higienicznych ani korzystania z toalety w celu oddania moczu na dwie godziny przed pobraniem materiału.

Otrzymane wyniki powinien zinterpretować lekarz. Wskaźnik do 3 Lg to nieznaczne stężenie patogenu, 3-5 Lg to stężenie klinicznie istotne, a powyżej 5 Lg to wysokie. Zwykle wszystkie miana ilościowe powinny być ujemne. Jednak wyniki ujemne nie zawsze wskazują na brak choroby. Często obserwuje się to przy nieznacznym stężeniu wirusa w organizmie i gdy jest on tłumiony przez układ odpornościowy.

Pomimo wszystkich zalet, PCR ma szereg wad. Analizę należy przeprowadzać wyłącznie w nowoczesnym laboratorium, aby uniknąć fałszywych wyników. Szczególną uwagę należy zwrócić na zbieranie materiału. Tylko lekarz powinien rozszyfrować wyniki, ponieważ pozytywne wyniki mogą wystąpić po niedawnym leczeniu infekcji.

Skrobanie w celu wykrycia wirusa brodawczaka ludzkiego

Aby wykryć zakażenie genitalne HPV u mężczyzn, wykonuje się zeskrobinę, czyli test Digene. Materiał pobiera się z kanału cewki moczowej za pomocą specjalnej szczoteczki; w niektórych przypadkach tkankę pobiera się z żołędzi prącia. Przed wykonaniem testu należy wziąć prysznic i dokładnie się umyć. Naruszenie higieny osobistej negatywnie wpływa na wyniki testu.

U kobiet pobiera się zeskrobinę z szyjki macicy, jeśli podejrzewa się dysplazję, erozję i inne procesy patologiczne wywołane przez HPV. Aby pobrać materiał, lekarz usuwa upławy z pochwy i wprowadza do narządu małą szczoteczkę, obracając ją wokół osi w kanale szyjki macicy. Po wszystkich manipulacjach szczoteczkę umieszcza się w probówce z medium i wysyła do laboratorium.

Uzyskane materiały są kierowane do diagnostyki różnicowej metodą PCR, nie wykonuje się badań cytologicznych. Wyniki są gotowe po 2-3 dniach od analizy. Uzyskane dane stanowią pełną informację o typie wirusa, jego rakotwórczości i szeregu innych czynników w przebiegu choroby. Jeśli wyniki są nieprawidłowe, badanie jest wykonywane ponownie. Powtórne badania przesiewowe są konieczne w trakcie leczenia i po terapii, aby określić jej skuteczność.

Rozmaz na obecność wirusa brodawczaka ludzkiego

Jeśli podczas badania ginekologicznego w okolicy narządów płciowych zostaną wykryte brodawki lub kłykciny kończyste, lekarz pobiera wymaz na obecność wirusa HPV. Lekarz przesuwa specjalną szczoteczkę po dotkniętych tkankach. Wymaz pobierany jest z kanału szyjki macicy u kobiet i z cewki moczowej u mężczyzn. Pobrany materiał biopsyjny jest wysyłany do laboratorium w celu zbadania.

W przypadku podejrzenia zakażenia wirusem brodawczaka ludzkiego stosuje się następujące rodzaje rozmazów:

• PCR – wykrywa DNA infekcji. Aby wykonać tę analizę, pobiera się zeskrobinę z cewki moczowej u mężczyzn, z pochwy i kanału szyjki macicy u kobiet. Można również użyć nasienia lub moczu.
• Testowanie Digene to badanie zebranego materiału na poziomie molekularnym. Testowanie jest różnicowaniem dwóch grup zakażeń brodawczaka w tym samym czasie - o wysokiej i niskiej onkogenności.

Powyższe badania klasyfikują wyniki do 5 typów:

1. Brak komórek atypowych.
2. Obecność zmienionych komórek na skutek procesu zapalnego.
3. Minimalna liczba komórek o nietypowej strukturze.
4. Komórki złośliwe.
5. Duża liczba komórek onkogennych.

Istnieje również klasyfikacja według systemu Bethesda. Składa się ona ze wskaźników niskiego i wysokiego stopnia zmian. W tym przypadku dekodowanie rozmazu przedstawiają następujące dane:

• NILM – nabłonek prawidłowy.
• ASCUS – zmienione komórki spowodowane dysplazją, stanem zapalnym, infekcją przenoszoną drogą płciową lub wirusem HPV.
• ASC-H – wykryto nieprawidłowości w strukturze nabłonka płaskiego. Wynik ten wskazuje na wczesne stadia onkologii lub ciężką dysplazję.
• LSIL – w rozmazie obecna jest niewielka liczba zmienionych komórek. Wskazuje na dysplazję lub wirusa brodawczaka.
• HSIL – istotne zmiany w nabłonku. Ciężka dysplazja i wyraźna onkologia. Jeśli zignorujemy ten wynik, u 7% pacjentów rozwinie się choroba złośliwa w ciągu 3-5 lat.
• AGC to nietypowy nabłonek gruczołowy. Występuje w raku macicy lub dysplazji.
• AIS – wczesne stadia onkologii.
• SIL wysokiego stopnia – rak płaskonabłonkowy.

Szybkość uzyskania wyników rozmazu zależy od wybranej metody badawczej. Z reguły dekodowanie jest gotowe w ciągu 2-3 dni.

[ 12 ], [ 13 ], [ 14 ], [ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ], [ 20 ]

Przeciwciała przeciwko wirusowi brodawczaka ludzkiego

W celu wykrycia przeciwciał przeciwko HPV wskazane jest przeprowadzenie testu immunoenzymatycznego krwi. Zasada tego badania polega na określeniu obecności immunoglobulin przeciwko czynnikowi zakaźnemu. Diagnostyka metodą ELISA wskazuje odpowiedź immunologiczną organizmu na wirusa. W zależności od wykrytych przeciwciał rozróżnia się następujące stadia choroby:

• IgM – ostre.
• IgG – stan przewlekły lub okres rekonwalescencji.
• IgA – nawrót przewlekłej infekcji.

Wyniki testu przeciwciał są gotowe po 1-3 dniach od jego wykonania. Podczas odczytywania wyników należy wziąć pod uwagę, że wirus brodawczaka ludzkiego może być pośrednim śladem, dlatego wykonuje się PCR i inne testy w celu wyjaśnienia obecności zakażenia. Ponadto ELISA nie ustala genotypu ani ryzyka rakotwórczości wirusa.

[ 21 ], [ 22 ], [ 23 ], [ 24 ], [ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ], [ 30 ]