Test oddechowy na Helicobacter pylori: jak się przygotować, jak jest przeprowadzany, rozszyfrowanie, normy

Wielu badaczy podważa fundamentalną rolę Helicobacter pylori w patogenezie zapalenia żołądka i choroby wrzodowej, uważając, że aktywne rozmnażanie się tych bakterii rozpoczyna się na już uszkodzonej błonie śluzowej odźwiernika dwunastnicy. Jednak niezaprzeczalnym faktem jest wykrycie helikobakteriozy u prawie 90% pacjentów z wrzodami i przewlekłym zapaleniem żołądka. Ponadto eradykacja tej bakterii sprzyja szybkiej regresji choroby wrzodowej i zapewnia długi okres remisji u pacjentów z wrzodowymi zmianami żołądka i dwunastnicy. Obecność zakażenia można zdiagnozować różnymi metodami - badając rozmazy-odciski i biopsje błony śluzowej pobrane endoskopowo, określając obecność przeciwciał we krwi przeciwko Helicobacter pylori lub antygenów w kale. Bezpieczną i bardzo skuteczną metodą diagnostyczną jest test oddechowy Helicobacter pylori, który wykorzystuje jej zdolność do wytwarzania katalizatora hydrolitycznego ureazy, który przyspiesza rozkład mocznika do amoniaku i dwutlenku węgla. Badanie polega na analizie porównawczej dwóch próbek wydychanego powietrza. Pierwszą pobiera się przed pobraniem roztworu mocznika o normalnym składzie izotopowym lub z oznaczonym atomem węgla C13, drugą – po. Badanie to jest dość pouczające i daje odpowiedź na pytanie o obecność bakterii Helicobacter Pylor u pacjenta i stopień ich aktywności.

Porównania skuteczności różnych metod badania zakażenia Helicobacter przeprowadzone w ostatnich latach wykazują największą liczbę pozytywnych wyników przy wykonywaniu testu oddechowego, nawet w porównaniu z mikroskopową analizą biopsji. Eksperci tłumaczą negatywny wynik histologii lub reakcji łańcuchowej polimerazy przy pozytywnych wynikach testu ureazowego złożonością hodowli mikroorganizmu i brakiem bakterii w pobranych losowo próbkach. W końcu przy badaniu wydychanego powietrza określa się produkty odpadowe, a nie obecność samych mikroorganizmów, których po prostu nie ma w losowo wybranym biomateriale.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ]

Wskazania do zabiegu Test oddechowy na obecność Helicobacter pylori.

Badaniom podlegają pacjenci z potwierdzonym rozpoznaniem stanu zapalnego lub choroby wrzodowej przewodu pokarmowego - przełyku, żołądka i/lub dwunastnicy, z historią nawracających zakażeń Helicobacter pylori, a także członkowie rodziny osoby zakażonej.

Bóle w nadbrzuszu, dyskomfort w okolicy brzucha, zaburzenia dyspeptyczne – tego typu objawy również stanowią podstawę do skierowania pacjenta na test oddechowy z mocznikiem.

W ten sposób przeprowadza się zarówno wstępną diagnostykę zakażenia Helicobacter, jak i diagnostykę kontrolną po leczeniu.

Lekarz prowadzący, który skierował na badanie, powinien mieć informacje o tym, gdzie wykonać test oddechowy na obecność Helicobacter. Niestety, szpitale powiatowe i wiejskie przychodnie ambulatoryjne, a także niespecjalistyczne placówki medyczne, z reguły nie są wyposażone w niezbędny sprzęt do wykonania testu ureazowego. Komercyjne laboratoria i specjalistyczne kliniki gastroenterologiczne w stolicach i dużych miastach dysponują sprzętem do wykonania testu oddechowego na obecność Helicobacter. Szybkość analizy i jej dokładność zależą od wyposażenia laboratorium.

[ 4 ], [ 5 ], [ 6 ]

Przygotowanie

Aby wyniki testu były jak najbardziej informatywne i wiarygodne, pacjent musi przestrzegać szeregu zaleceń przygotowawczych. Tę analizę wydychanego powietrza wykonuje się rano na czczo. Dzień wcześniej, przed godziną dziesiątą wieczorem, wolno zjeść lekkostrawną kolację.

W dniu poprzedzającym planowane badanie nie należy włączać do diety roślin strączkowych (soi, grochu, fasoli itp.).

Przed badaniem należy na miesiąc do półtora miesiąca przed badaniem zaprzestać przyjmowania leków przeciwbakteryjnych i zmniejszających aktywność wydzielniczą.

Nie należy przyjmować leków przeciwbólowych, przeciwzapalnych ani zobojętniających kwasu żołądkowego przez pięć dni przed badaniem, a także nie należy spożywać napojów alkoholowych ani nalewek przez trzy dni.

Na trzy godziny przed badaniem nie należy palić tytoniu ani żuć gumy.

Przed badaniem należy dokładnie umyć zęby i wypłukać usta.

[ 7 ], [ 8 ]

Technika Test oddechowy na obecność Helicobacter pylori.

Uwaga: Podczas badania pacjent musi kontrolować wydzielanie śliny. Jeśli wystąpi dyskomfort, rurkę intubacyjną usuwa się z ust, połyka ślinę i kontynuuje badanie. Należy całkowicie wykluczyć przedostanie się śliny do rurki intubacyjnej, ponieważ w takim przypadku wyniki badania uznaje się za nieważne i badanie należy powtórzyć za około godzinę.

Pacjent umieszcza plastikową rurkę analizatora wydychanego powietrza wystarczająco głęboko w ustach i kilkakrotnie wykonuje przez nią oddech w normalnym rytmie.

Następnie rurkę usuwa się, a pacjentowi podaje się do wypicia roztwór mocznika (100 g mocznika na 50 ml wody). Następnie pacjent nadal oddycha przez rurkę bez wysiłku, z normalną intensywnością. Po upływie czasu potrzebnego na wykonanie testu analizator jest przekazywany lekarzowi, który wykonuje diagnostykę, wynik jest znany w ciągu kilku minut. Systemy diagnostyczne Helik są produkowane z rurką wskaźnikową (test wykonuje się w ciągu kwadransa), nowocześniejszy model cyfrowy to taki, w którym wynik testu pojawia się na monitorze komputera (wykonanie zajmuje dziewięć minut). Procedurę nadzoruje lekarz. Test z izotopem stabilnym węgla 13C jako składnikiem reagującym jest uważany za najdokładniejszy.

Inną metodą diagnostyczną jest określenie poziomu obciążenia par amoniaku w wydechu. Technika jest podobna, odczynnik jest tańszy (mocznik o normalnym składzie izotopowym). Jego dokładność ocenia się jako niższą. Jest jednak również dość pouczająca (około 85%).

Spośród wszystkich metod diagnostycznych test oddechowy ureazowy 13C na Helicobacter ma szereg niezaprzeczalnych zalet. Jest przeprowadzany bez uszkadzania powierzchni skóry i penetracji do środka przez naturalne otwory ciała, dlatego nawet minimalne urazy podczas manipulacji są wykluczone. Ponadto charakteryzuje się wysoką swoistością i czułością (producenci szacują te wskaźniki na ponad 83%), a także dokładnością 95-100%.

Jeśli analiza stężenia izotopu węgla C13 w tym laboratorium jest wykonywana na spektrometrze masowym w podczerwieni (laserowym), wówczas próbki wydychanego powietrza pacjenta są transportowane w hermetycznie zamkniętym pojemniku do laboratorium wyposażonego w ten sprzęt (czasem nawet za granicą). Analiza jest wykonywana w ciągu 24 godzin, ale wydychane próbki są przechowywane do 10 dni.

Lekarze stawiają analizę wydychanego powietrza na pierwszym miejscu wśród metod diagnostyki pierwotnej zakażenia Helicobacter i monitorowania skuteczności leczenia. Bardziej dokładne jest jedynie badanie cytologiczne wycinka pobranego podczas endoskopii. Jednak ta dość traumatyczna metoda nie jest zalecana wszystkim pacjentom, natomiast test oddechowy z mocznikiem można wykonać nawet u kobiet w ciąży i dzieci. Izotop węgla 13C, którym znakowany jest roztwór mocznika, jest naturalny dla organizmu człowieka. Ten stabilny nieradioaktywny izotop stanowi nieco ponad 1% całkowitej ilości węgla w powietrzu wydychanym przez człowieka, pozostała jego część występuje w postaci 12C. Obecność zakażenia i katalizatora reakcji rozszczepiania mocznika wytwarzanego przez mikroorganizmy - ureazy, pozwala na szybkie rozpoczęcie procesu hydrolizy. Dwutlenek węgla zawierający znakowany atom wchłania się do krwi i opuszcza organizm wraz z wydechami pacjenta. Światło podczerwone jest używane do badania wydychanych próbek oddechu przed i po użyciu mocznika, a analiza jest wykonywana przy użyciu spektrometru masowego lub szybkiego testu Helic. Na podstawie stosunku formy węgla C13 do C12 wyciąga się wniosek o obecności infekcji i jej nasileniu. Pierwsza wersja badania zapewnia wysoką dokładność w granicach 95-100% lub więcej, ale nie każde laboratorium dysponuje takim sprzętem. A długi proces transportu do sprzętu wyposażonego w spektrometr masowy może zniekształcić wyniki analizy.

Szybki test Helic ma niższą czułość (około 80-85%), ale jest prosty i tańszy. Może być wykonany w każdej placówce medycznej, ponieważ sprzęt jest przenośny. Odczynnikiem do testu jest roztwór amoniaku lub izotopu węgla 13C.

Normalna wydajność

Zdrowa osoba powinna mieć wynik ujemny. Jeśli zawartość izotopu węgla 13C w powietrzu wydychanym przez pacjenta nie przekracza jednego ppm (‰), jest to norma dla testu oddechowego na Helicobacter. Różnica w wynikach między pierwszym etapem (przed przyjęciem mocznika) a drugim (po przyjęciu) powinna wynosić zero lub być liczbą ujemną. Wykres pokazuje stałą wartość zawartości odczynnika względem poziomu podstawowego.

Za wynik pozytywny uważa się obecność ponad 1‰ izotopu 13C w wydychanym powietrzu, a istnieją cztery stopnie nasilenia zakażenia Helicobacter pylori. Normą dla szybkiego testu na Helicobacter jest brak różnicy między wskaźnikami przed pobraniem roztworu i w drugim etapie po jego użyciu. U pacjenta Helicobacter-dodatniego różnica przekracza zero, a na wykresie wzdłuż osi rzędnych obserwuje się wyraźny wzrost odczynnika w wydychanym powietrzu.

Wartość 1,5-3,4‰ interpretuje się jako obecność śladów bakterii, odpowiadającą najlżejszemu stopniowi skażenia. Bakterie są nieaktywne, można szybko się zregenerować.

Niski próg odpowiada poziomowi skażenia 3,5-5,4‰, natomiast poziom 5,5-6,9‰ interpretowany jest jako niski.

Aktywna faza rozmnażania patogenu odpowiada wartościom 7-14,9‰. Na tym etapie przewiduje się bardziej uporczywe leczenie i odpowiada to ciężkiemu stopniowi zakażenia.

Stopień ekstremalnie ciężki odpowiada poziomowi zaszczepienia 15‰ i wyższemu. Leczenie będzie uporczywe i długotrwałe, jednak pod warunkiem, że pacjent sumiennie przestrzega wszystkich zaleceń lekarskich, eliminacja kolonii Helicobacter Pylori jest możliwa nawet w tym przypadku.

Wynik uzyskany po badaniu na spektrometrze masowym w podczerwieni (laserowym) jest również definiowany jako porównawcza zawartość izotopów węgla C13 bas w pierwszej próbce wydechu pacjenta z C13 cont - próbką po pobraniu roztworu. Analizuje się różnicę między tymi parametrami. Wynik nie większy niż 0,3‰ (wartość graniczna) uważa się za ujemny; jeśli zostanie przekroczony, test uważa się za dodatni. Masa rozproszenia jest wprost proporcjonalna do wartości wskaźnika.

[ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]

Urządzenie do analizy

W przestrzeni postsowieckiej powszechniejsze są ekspresowe testy wydychanego powietrza pacjenta. Przeprowadzane są na miejscu i nie wymagają transportu ani przechowywania próbek. Urządzenie do szybkiej analizy może być wyposażone w rurki wskaźnikowe - z normalnym poziomem odniesienia amoniaku w wydychanym powietrzu i z wydechem pacjenta. Obecność inwazji bakteryjnej jest wskazywana przez zmianę koloru składu wskaźnikowego w rurce z analizowanym wydechem. Wzrost poziomu amoniaku w stosunku do wzorca określa się podziałką milimetrową. Wynik jest zapisywany ręcznie na formularzu analizy. Czas trwania badania wynosi kwadrans.

Bardziej nowoczesne i dokładne urządzenie do przeprowadzania testu oddechowego jest wyposażone w cyfrowy czujnik. Wynik jest oceniany przez program komputerowy i pojawia się na monitorze w formie histogramu, który można wydrukować. Urządzenia te mają specjalny ustnik, który chroni rurkę oddechową przed śliną. Test trwa dziewięć minut. Zapewnia największą dokładność.

Zaletą tego sprzętu nad innymi metodami diagnostycznymi, oprócz już odnotowanego bezpieczeństwa i braku przeciwwskazań, jest mobilność i kompaktowość, co pozwala na przeprowadzenie badania dosłownie przy łóżku pacjenta pod nadzorem personelu pielęgniarskiego. Nie ma potrzeby transportu biomateriału do laboratoriów w celu ustalenia wyników. Dane analizy nie zależą od wieku, stanu fizycznego i charakteru choroby przewodu pokarmowego.

Pacjenci, u których wykonano badanie i otrzymali jakikolwiek pozytywny wynik testu oddechowego na obecność Helicobacter, powinni bezzwłocznie udać się do lekarza i poddać się leczeniu, które pozwoli uniknąć wielu nieprzyjemnych konsekwencji.