Badanie krwi na obecność wirusa Epsteina-Barr pod kątem przeciwciał i PCR: jak przejść, normy

Przez opryszczkę przywykliśmy rozumieć nieestetyczne bolesne pęcherzowe wysypki na twarzy w okolicy ust, które następnie tworzą brązowe strupy. Niestety, jest to tylko jedna z twarzy wirusa opryszczki, który może występować u ludzi w 8 formach. To, co zwykle nazywamy opryszczką, to wirus typu 1 lub wirus opryszczki pospolitej. Wirus typu 2 powoduje opryszczkę narządów płciowych, typ 3 - „ospa wietrzna” i półpasiec, typ 4 - mononukleoza zakaźna i kilka innych dość niebezpiecznych patologii itp. Tę listę można kontynuować dalej, ale skupimy się na wirusie opryszczki typu 4, który jest inaczej nazywany wirusem Epsteina-Barr. Spróbujmy dowiedzieć się, czym jest wirus opryszczki typu 4, dlaczego jest niebezpieczny, kiedy i dlaczego wykonuje się test na wirusa Epsteina-Barr oraz co wskazują wyniki badań laboratoryjnych.

Czym jest wirus opryszczki typu 4?

Herpeswirus typu 4, jako jedna z odmian zakażenia herpeswirusem, został opisany 53 lata temu przez angielskiego wirusologa Michaela Epsteina. W pracy nad projektem profesorowi pomagała jego studentka Yvonne Barr. To właśnie tym osobom wirus zawdzięcza swoją nazwę. Jednak 15 lat po odkryciu wirusa jego naukową nazwę zmieniono na ludzki herpeswirus 4, a rok temu wirus nazwano ludzkim gammawirusem typu 4.

Ale czym jest wirus Epsteina-Barr? Podobnie jak każdy inny wirus, wirion (cząsteczka wirusa) wirusa opryszczki typu 4 składa się z materiału genetycznego (w tym przypadku dwuniciowego DNA) i otaczającej go otoczki białkowej (kapsydu). Ponadto wirus jest otoczony błoną, która pomaga mu łatwo wnikać do komórek gospodarza.

Każdy wirus jest formą niekomórkową, która jest czynnikiem zakaźnym i nie może rozwijać się i rozmnażać poza komórkami żywego organizmu. Za ulubione siedlisko wirusa opryszczki typu 4 uważa się komórki nabłonkowe nosogardła. Nie gardzą one również leukocytami, preferując jedną ze swoich odmian, zwaną limfocytami B. To właśnie limfocyty B aktywnie uczestniczą w zapewnianiu obrony immunologicznej organizmu. W kontakcie z antygenem, którym w naszym przypadku jest wirus opryszczki typu 4 (a raczej jego antygeny), limfocyty B wytwarzają przeciwciała (białka immunoglobulin). Można je wykryć we krwi pacjenta, przeprowadzając analizę na obecność wirusa Epsteina-Barr (EBV).

Wirus opryszczki typu 4 ma 4 antygeny, które pojawiają się w ściśle określonej kolejności:

• EA to wczesny antygen, który pojawia się na początkowym etapie choroby, gdy cząsteczki wirusa znajdują się w fazie syntezy (pierwotna ostra infekcja lub reaktywacja utajonego wirusa przy obniżonej odporności),
• VCA to antygen kapsydu zawarty w otoczce białkowej, który należy również do wczesnych antygenów, gdyż w tym okresie choroba może nie ujawnić się klinicznie,
• MA – antygen błonowy, pojawia się, gdy wirion jest już uformowany,
• EBNA – antygen jądrowy (polipeptydowy lub jądrowy) należy do późnych antygenów, przeciwciała przeciwko którym można wykryć nawet kilka miesięcy po zachorowaniu i pozostają one we krwi przez całe życie.

Wirus opryszczki typu 4 jest bardzo podstępny. Ponieważ wirus jest nieaktywny poza organizmem żywym, można się nim zarazić tylko od osoby, która jest źródłem zakażenia. I wcale nie jest konieczne, aby wykazywała wszystkie objawy choroby; zakażenie może być utajone, zamaskowane jako zwykłe zmęczenie. Na przykład zespół przewlekłego zmęczenia jest w większości przypadków związany z wirusem Epsteina-Barr.

Pojedyncze wiriony można znaleźć we krwi, ślinie, spermie, wydzielinie pochwy i tkankach różnych organów. Cząsteczki wirusa, wraz ze śliną i krwią, mogą przedostać się do otaczających nas obiektów, gdzie pozostaną nieaktywne, dopóki w jakiś sposób nie dostaną się do ludzkiego ciała. W zdecydowanej większości przypadków zakażenie następuje drogą kropelkową lub przez kontakt (poprzez całowanie). Ale wewnątrzmaciczna transmisja wirusa od matki do płodu, zakażenie podczas transfuzji krwi (jeśli krew dawcy zawierała wiriony wirusa) i kontakt seksualny są również możliwe.

Po wejściu do organizmu i przeniknięciu do struktur komórkowych, może minąć od 5 do 50 dni, zanim choroba się ujawni. Może się jednak nie ujawnić, przechodząc w formę utajoną, jak to ma miejsce w większości przypadków.

Tak, według badań około 90% dorosłej populacji miało infekcję opryszczki związaną z EBV przynajmniej raz w życiu. Większość ludzi nawet o tym nie wie, ponieważ ich organizm jest w stanie odeprzeć atak wirusa. Ale nie zawsze tak jest.

Jak objawia się wirus Epsteina-Barr?

Najczęściej lekarze w swojej praktyce mają do czynienia z następującymi typami zakażenia wirusem opryszczki typu 4:

• Postać przewlekła (pojawia się po ostrej fazie choroby, występują pewne ogólne objawy złego stanu zdrowia),
• Forma utajona (brak objawów, ale wirus pozostaje aktywny i uwalnia się do środowiska),
• Postać powolna (rzadziej występująca, objawy pojawiają się pojedynczo w ciągu dłuższego okresu, kończąc się zgonem pacjenta).

Ludzie zarażają się wirusem Epsteina-Barr po raz pierwszy, głównie w dzieciństwie i okresie dojrzewania. Szczyt zachorowań występuje w wieku od 14 do 18 lat.

Pierwotne zakażenie wirusowe występuje w 3 różnych formach:

• bezobjawowy (bez objawów klinicznych),
• oddechowy (objawy infekcji dróg oddechowych: gorączka, wydzielina z nosa, ogólne osłabienie itp.),
• Mononukleoza zakaźna z triadą głównych objawów: wysoka gorączka, objawy bólu gardła z żółtawymi strupami na migdałkach, powiększenie narządów, takich jak wątroba i śledziona; występuje wzrost poziomu leukocytów i powiększenie węzłów chłonnych.

Istnieje kilka możliwości wyjścia z ostrej fazy choroby:

• pełny powrót do zdrowia,
• objawy choroby ustępują, ale wirus pozostaje w organizmie i rozwija się, choć nie powoduje już zauważalnych zmian w komórkach (stan nosicielstwa),
• nie ma żadnych objawów choroby, wirus nie opuszcza organizmu, ale wykazuje też niewielką aktywność (forma utajona),
• reaktywacja wirusa z formy utajonej,
• przewlekły przebieg zakażenia (z nawrotami choroby, postać przewlekła aktywna, uogólniona z uszkodzeniem narządów i układów organizmu).

Skutkiem długiego pozostawania wirusa w organizmie może być:

• Przewlekła postać mononukleozy zakaźnej.
• Zespół hematofagocytarny: stabilna gorączka, obniżone składniki krwi (zwiększona krzepliwość), powiększenie wątroby i śledziony, krwawienie z błon śluzowych, żółtaczka (spowodowana dysfunkcją wątroby), powiększone węzły chłonne, objawy neurologiczne.
• Postać utajona z rozwojem wtórnego niedoboru odporności: hipertermia przez długi okres czasu, ogólne osłabienie, powiększenie i bolesność węzłów chłonnych, bóle mięśni i stawów, częste choroby zakaźne.
• Rozwój chorób autoimmunologicznych w postaci tocznia rumieniowatego, reumatoidalnego zapalenia stawów itp.
• Objawy zespołu przewlekłego zmęczenia z pogorszeniem ogólnego samopoczucia i sprawności.
• Uogólniona postać przewlekłego zakażenia powodująca uszkodzenie ośrodkowego układu nerwowego, mięśnia sercowego, nerek, wątroby i płuc.
• Rozwój chorób onkologicznych (białaczki limfatycznej i chłoniaków), w których obserwuje się patologiczny wzrost liczby komórek układu limfatycznego. Wirus opryszczki typu 4 nie niszczy komórek nośnikowych, ale zmusza je do aktywnego namnażania, w wyniku czego wykrywane są nowotwory z tkanki limfoidalnej.

Jak widać, wirus Epsteina-Barr nie jest tak nieszkodliwy, jak się wydaje na pierwszy rzut oka, co oznacza, że nie należy traktować go beztrosko. Ponadto wirus opryszczki typu 4 charakteryzuje się częstymi epizodami nosicielstwa wirusa i postacią utajoną, nie wspominając o różnych formach przewlekłej infekcji, kiedy osoba pozostaje źródłem infekcji, nawet tego nie podejrzewając.

W tym przypadku obecność czynnika zakaźnego w organizmie można stwierdzić wyłącznie za pomocą specjalnej analizy na obecność wirusa Epsteina-Barr, którego biomateriałem jest zazwyczaj krew.

Wskazania do zabiegu Test na obecność wirusa Epsteina-Barr.

Ponieważ zakażenie wirusem opryszczki typu 4 nie jest czasami tak łatwe do wykrycia, nie zawsze jest podejrzewane. Istnieją jednak pewne oznaki, po których lekarz może podejrzewać obecność wirusa w organizmie:

• poważnie osłabiony układ odpornościowy (na ryzyko narażeni są pacjenci zakażeni wirusem HIV i chorzy na AIDS, pacjenci po przeszczepie narządów lub chemioterapii),
• powiększenie regionalnych węzłów chłonnych w okolicy brody i potylicy głowy oraz ich bolesność, zwłaszcza jeśli obserwuje się to po transfuzji krwi lub przeszczepie narządu od dawcy.
• ostre zakażenie wirusowe układu oddechowego (ARVI), występujące na tle bardzo wysokich temperatur (38-40 stopni),
• pojawienie się objawów mononukleozy zakaźnej, która najczęściej występuje pod wpływem wirusa Epsteina-Barr.

Nawet jeśli u danej osoby nie występują wyżej wymienione objawy, specjalista może podejrzewać chorobę na podstawie wyników niektórych rutynowych badań (ogólne badanie krwi i biochemia), a także badań układu odpornościowego.

Pełna morfologia krwi w kierunku wirusa Epsteina-Barr może wykazać:

• wzrost liczby limfocytów,
• niski poziom hemoglobiny, który wskazuje na spadek poziomu czerwonych krwinek,
• zwiększona krzepliwość krwi spowodowana dużą liczbą płytek krwi,
• pojawienie się wirocytów (atypowych limfocytów o strukturze podobnej do monocytów).

Biochemiczne badanie krwi, które dostarcza informacji o stanie narządów wewnętrznych, wykaże zmiany w funkcjonowaniu wątroby i śledziony.

Badanie immunoenzymatyczne na obecność wirusa EBV może wykazać zmianę liczby określonych limfocytów, rozbieżność w liczbie immunoglobulin różnych klas (dysimmunoglobulinemia) oraz niedobór immunoglobuliny G, co wskazuje na osłabienie układu odpornościowego i jego niezdolność do powstrzymania ataku wirusa.

Takie wyniki niespecyficznych analiz mogą zaniepokoić lekarzy, ale nadal nie sposób powiedzieć, z czym dokładnie mają do czynienia. Wszystko pozostanie na etapie założeń i wstępnej diagnozy. W większości przypadków lekarze podejrzewają utajoną postać mononukleozy zakaźnej, chociaż inne patologie wirusowe (grypa, zapalenie wątroby itp.) mogą objawiać się w ten sam sposób.

Ze względu na wysoką częstość występowania zapalenia wątroby typu 4 i możliwość jego przeniesienia z matki na dziecko, test na obecność wirusa Epsteina-Barr będzie również przydatny przy planowaniu ciąży. Jeśli matka wcześniej cierpiała na infekcję, jej organizm wytworzył przeciwciała przeciwko niej. Ponowne zakażenie jest zwykle wykluczone ze względu na wytworzenie silnej odporności, a jeśli już wystąpi, nie będzie już miało skutków, które są możliwe przy pierwszym zetknięciu z wirusem. Odporność będzie hamować aktywność wirusa przez całe życie, chociaż sam wirus pozostanie wewnątrz organizmu, jak każdy z wirusów opryszczki.

Jeśli przyszła mama zarazi się wirusem opryszczki w czasie ciąży, może to doprowadzić do poronień i przedwczesnych porodów lub też wirus może mieć negatywny wpływ na wewnątrzmaciczny rozwój dziecka.

Onkolog może zlecić test EBV, jeśli podejrzewa się chłoniaka Burketta lub w celu zdiagnozowania procesów nowotworowych u osób z HIV. Terapeuta może użyć tego testu do diagnozowania zakażeń opryszczką (diagnostyka różnicowa w celu określenia rodzaju wirusa). Czasami test jest również używany do oceny skuteczności leczenia.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ]

Przygotowanie

W zależności od rodzaju badania biomateriałem do niego może być krew, ślina, mocz, plwocina, próbka płynu owodniowego, wycinek pobrany z kanału szyjki macicy lub cewki moczowej, płyn mózgowo-rdzeniowy (PMR). Najczęściej lekarze uciekają się do badania krwi, które jest uważane za najbardziej informatywne.

Wiadomo, że niektóre czynniki mogą negatywnie wpłynąć na jakość i ilość biomateriału, dlatego warto dzień wcześniej przestrzegać kilku zasad:

• Zaleca się, aby wszelkie testy (zwłaszcza badania krwi) były wykonywane rano na pusty żołądek. Ostatni posiłek powinien być spożyty nie później niż 12 godzin przed pobraniem krwi, dlatego lepiej jest pić wodę do kolacji.
• Za najbardziej akceptowalny materiał do analizy wirusa Epsteina-Barr uważa się krew żylną, a przed oddaniem krwi z żyły zawsze zaleca się 15-minutowy odpoczynek, jeśli dana osoba dopiero przybyła do laboratorium,
• Aby mieć pewność, że pobranie krwi odbędzie się bez powikłań, a wyniki badania będą wiarygodne, na 12 godzin przed badaniem nie zaleca się wykonywania aktywnej pracy fizycznej, uprawiania sportu, picia alkoholu ani palenia.
• Wyniki testów mogą być również zależne od przyjmowanych leków. Należy zaprzestać przyjmowania leków co najmniej 2 dni przed testem. Jeśli nie jest to możliwe, należy poinformować pielęgniarkę laboratoryjną o przyjmowanych lekach.
• W czasie ciąży, przed wykonaniem testu na obecność wirusa EBV, wykonuje się test na toksoplazmozę, aby wykluczyć fałszywie dodatnią reakcję.
• Jeśli u dziecka poniżej 5. roku życia wykonuje się badanie krwi na obecność wirusa Epsteina-Barr, to na pół godziny przed badaniem należy podać dziecku do wypicia dużą ilość przegotowanej wody w stosunkowo małych porcjach.

Jeśli do analizy zostanie pobrany inny biomateriał, należy wcześniej omówić z lekarzem wszelkie niuanse przygotowania do analizy w zależności od użytego materiału.

[ 10 ], [ 11 ], [ 12 ]

Technika Test na obecność wirusa Epsteina-Barr.

Lekarze przypisują ważną rolę w diagnostyce opryszczki typu 4 i mononukleozy zakaźnej konkretnym testom, które pomagają zidentyfikować DNA wirusa lub unikalne przeciwciała w biomateriale pacjenta. Główne rodzaje testów laboratoryjnych stosowanych do wykrywania wirusa Epsteina-Barr w organizmie człowieka obejmują test immunoenzymatyczny (ELISA) i diagnostykę PCR. Przyjrzyjmy się bliżej istocie obu metod i cechom ich realizacji.

Test immunoenzymatyczny EBV

ELISA to badanie (analiza) krwi żylnej pacjentów w celu wykrycia przeciwciał przeciwko wirusowi Epsteina-Barr. W wyniku diagnostyki we krwi pacjentów z EBV wykrywa się immunoglobuliny typu IgG lub IgM (w sumie jest ich 5) przeciwko jednemu z 3 antygenów wirusa (wczesnemu, kapsydowemu lub jądrowemu).

Analizę przeprowadza się w laboratorium immunologicznym, gdzie pobiera się około 10 ml krwi z żyły pacjenta. Biomateriał pozostawia się następnie w temperaturze pokojowej na kwadrans, w tym czasie krew koaguluje. Skrzep jest ostrożnie oddzielany od części płynnej. Płyn jest wirowany i uzyskuje się czystą surowicę krwi. To właśnie ona jest poddawana dalszym badaniom.

Pomysł metody zrodził się na podstawie danych, że nasz organizm wytwarza specyficzne przeciwciała na każdy typ wirusa i bakterii, które wnikają do organizmu z zewnątrz. Organizm rozpoznaje je jako obce i niszczy za pomocą unikalnych przeciwciał, które mocno przylegają do antygenu.

Istota analizy ELISA opiera się na tej reakcji. Przeciwciała z dołączonymi do nich znacznikami łączą się z antygenami. Do znaczników aplikowana jest substancja, która zmienia kolor próbki, reagując ze specjalnym enzymem. Im więcej takich „łańcuchów”, tym intensywniejszy jest kolor biomateriału.

Badanie immunoenzymatyczne można wykonać trzema metodami:

• Bezpośredni test ELISA. Płyn testowy umieszcza się w studzienkach i pozostawia na około pół godziny, aby antygeny mogły przyłączyć się do ścianek studzienek. Do zaadsorbowanych antygenów dodaje się płyn z znakowanymi przeciwciałami. Po upływie wymaganego czasu (od pół godziny do 5 godzin), gdy przeciwciała zostaną wykryte i zwiążą się z antygenami, płyn jest spuszczany, studzienki są dokładnie myte i dodawany jest do nich enzym. Stężenie wirusa w jednostce krwi określa się metodą koloryzacji.
• Pośredni test ELISA. W tej metodzie do antygenów zaadsorbowanych na powierzchni studzienek dodaje się badaną surowicę krwi i znakowane przeciwciała. W rezultacie uzyskuje się 2 rodzaje więzadeł, z których niektóre są znakowane. Wynik zależy od stężenia antygenów w badanej próbce. Im więcej nieoznakowanych przeciwciał, tym mniej związków znakowanych przez enzym.

Następnie do przemytej kompozycji dodaje się specjalny odczynnik, za pomocą którego określa się aktywność enzymatyczną kompleksów antygen-przeciwciało.

• „Kanapka”. Różni się od metody pośredniej tym, że początkowo nie antygeny, lecz przeciwciała są sorbowane na powierzchni. Dodaje się do nich roztwór zawierający badane antygeny. Po umyciu nośnika dodaje się przeciwciała z enzymatycznymi znacznikami. Nadmiar przeciwciał usuwa się ponownie i za pomocą nadtlenku wodoru uzyskuje się barwną substancję, którą bada się metodą spektrometryczną.

Tego typu analiza pozwala nie tylko zidentyfikować specyficzne przeciwciała i określić stężenie antygenów, ale także wyjaśnić stadium choroby. Faktem jest, że różne antygeny wirusa Epsteina-Barr pojawiają się na różnych etapach zakażenia wirusem opryszczki, co oznacza, że przeciwciała przeciwko nim są wytwarzane w określonym okresie choroby.

W ten sposób przeciwciała IgG przeciwko wczesnemu antygenowi (IgG EA) pojawiają się we krwi 1-2 tygodnie po zakażeniu, gdy choroba jest w fazie ostrej lub w fazie reaktywacji wirusa. Immunoglobuliny tego typu zanikają po 3-6 miesiącach. W przewlekłym przebiegu zakażenia wirusowego przeciwciała takie są szczególnie liczne, a w postaci atypowej w ogóle ich nie ma.

Przeciwciała IgG przeciwko antygenowi kapsydu (IgG VCA) również pojawiają się wcześnie, w ciągu pierwszych 4 tygodni choroby, ale ich największa liczba jest określana w drugim miesiącu zakażenia. W fazie ostrej występują u większości pacjentów, ale mogą nie pojawiać się u dzieci. W przewlekłym przebiegu choroby, zwłaszcza w okresach reaktywacji wirusa, ilość IgG VCA jest szczególnie wysoka. Przeciwciała te pozostają we krwi ludzkiej na zawsze, podobnie jak sam wirus, co wskazuje na uformowaną odporność na czynnik zakaźny.

Przeciwciała IgM przeciwko antygenowi kapsydu (IgM VCA) mogą pojawić się nawet przed pierwszymi objawami choroby. Ich stężenie (miana) jest szczególnie wysokie w pierwszych 6 tygodniach choroby. Ten typ przeciwciał jest charakterystyczny dla ostrej infekcji i reaktywacji przewlekłej infekcji. IgM VCA zanikają po 1-6 miesiącach.

Przeciwciała IgG przeciwko genowi jądrowemu (IgG EBNA) mogą wskazywać, że dana osoba wcześniej bezpośrednio zetknęła się z zakażeniem wirusem opryszczki. W ostrej fazie choroby są one wykrywane niezwykle rzadko, zwykle pojawiają się w okresie rekonwalescencji (w 3–10 miesiącu). Można je wykryć we krwi kilka lat po zakażeniu.

Wykrycie poszczególnych antygenów nie daje pełnego obrazu choroby, dlatego testy na różne przeciwciała należy wykonywać razem. Na przykład, jeśli obecne jest tylko IgM VCA, a IgG EBNA nie jest wykrywane, jest to infekcja pierwotna.

Niestety, immunoenzymatyczny test często nie wystarcza do wykrycia pierwotnego zakażenia wirusem opryszczki lub wrodzonej patologii. W tym ostatnim przypadku przeciwciała mogą w ogóle nie zostać wykryte. Jako test potwierdzający chorobę pierwotną stosuje się badanie molekularne krwi lub innego materiału biologicznego na obecność wirusa Epsteina-Barr.

Analiza PRC w kierunku wirusa Epsteina-Barr

Analizę tę wykonuje się na etapie ostrego zakażenia pierwotnego, w przeciwnym razie jej wynik będzie błędny.

Istotą metody PCR (wielowymiarowej reakcji łańcuchowej) jest to, że każdy czynnik zakaźny ma swój własny zestaw genów zawartych w cząsteczce DNA. DNA patogenu jest zawarte w biomateriale pobranym do badań w małych ilościach (same wirusy są mikroskopijnych rozmiarów), więc bardzo trudno jest ocenić sytuację. Ale jeśli przeprowadzi się konkretną reakcję, ilość materiału genetycznego znacznie wzrośnie, co umożliwi nazwanie patogenu.

Za pomocą jednorazowych instrumentów pobiera się materiał do badań molekularnych, który umieszcza się w specjalnym urządzeniu do analizy. Urządzeniem jest termostat ze specjalnym programem - termocyklerem lub wzmacniaczem. Urządzenie wykonuje pełny cykl PRC kilkadziesiąt razy (około 2-3 minut), który ma 3 etapy:

• Denaturacja (w temperaturze 95 stopni następuje rozdzielenie nici DNA).
• Wyżarzanie (w temperaturze 75 stopni do badanego materiału wprowadza się specjalnie przygotowane „primery” dla wirusa EBV, które wiążą się z DNA wirusa).
• Wydłużenie lub pomnożenie materiału genetycznego (do nasienia dodaje się specjalny enzym w temperaturze 72 stopni, który powoduje odtworzenie nowego łańcucha DNA, podwajając w ten sposób ilość materiału genetycznego).

Jeśli pełny cykl reakcji wielowymiarowej zostanie uruchomiony 50 razy, ilość materiału wzrośnie 100 razy. Oznacza to, że o wiele łatwiej będzie zidentyfikować patogen.

Test na obecność wirusa Epsteina-Barr u dziecka

Jak już wiemy, wirus Epsteina-Barr może powodować rozwój wielu chorób. Po przedostaniu się do organizmu człowieka pozostaje jego stałym rezydentem i tylko dobrze skoordynowana praca układu odpornościowego nie pozwala mu na aktywne pasożytowanie wewnątrz komórek.

Prawie 95% dorosłej populacji świata żyje z wirusem EBV wewnątrz, a większość z nich zetknęła się z wirusem we wczesnym dzieciństwie. Niektórzy odziedziczyli go po matce, podczas gdy inni zarażali się wirusem od rodziców i krewnych spieszących do dziecka z pocałunkami lub drogą kropelkową w przedszkolu lub szkole (choroby zakaźne tam zazwyczaj przybierają „uniwersalne” rozmiary).

Małe dzieci zazwyczaj wkładają wszystko do buzi, a najwięcej wirionów znajduje się w ślinie. A jeśli kilkoro dzieci liże tę samą zabawkę w przedszkolu, podczas gdy nauczyciele są zajęci swoimi sprawami, to nie dziwi fakt, że wirus tak aktywnie rozprzestrzenia się w dużych grupach dzieci.

EBV można śmiało nazwać chorobą dzieci i młodzieży, ponieważ do okresu dojrzewania połowa dzieci ma już wirusa w organizmie (a do 30 roku życia około 90% dorosłych). Dzieci w różnym wieku chorują na swój sposób. Do roku, gdy dziecko nie komunikuje się aktywnie z ludźmi, prawdopodobieństwo, że zachoruje, jest niewielkie. Dziecko powyżej roku, nawet jeśli nie chodzi do przedszkola, staje się bardziej towarzyskie, bawi się z rówieśnikami na ulicy, chodzi na aktywne zakupy z mamą itp., a prawdopodobieństwo zarażenia się wirusem staje się znacznie wyższe.

Ale to nie jest powód, aby zamykać dziecko w czterech ścianach. W wieku 1-3 lat choroba w zdecydowanej większości przypadków przebiega bezobjawowo, z wyjątkiem być może lekkiego wzrostu temperatury i lekkiego kataru, przypominającego przeziębienie. Okazuje się, że im wcześniej dziecko zapozna się z wirusem, tym łatwiej przebiega takie zapoznanie.

Nie jest dobrze, jeśli dziecko zachoruje bez pojawienia się przeciwciał IgG VCA we krwi, co może wskazywać, że odporność na wirusa nie została utworzona, a reaktywacja wirusa jest możliwa, gdy tylko układ odpornościowy osłabnie. Powodem jest najprawdopodobniej niedoskonałość układu odpornościowego małych dzieci, który jest w procesie kształtowania się od kilku lat.

Życie szkolne zapewnia jeszcze więcej przesłanek do choroby, szczególnie w okresie dojrzewania, gdy młodzi ludzie aktywnie praktykują całowanie. Ale u dzieci powyżej 3 roku życia choroba rzadziej przebiega bezobjawowo. W większości przypadków lekarze spotykają się z mononukleozą zakaźną z jej charakterystycznymi objawami.

Mimo że patologia może mieć długi przebieg (około 2 miesięcy), nie jest tak niebezpieczna i nie wymaga stosowania poważnych leków. Lekarze przepisują leki przeciwzapalne i przeciwwirusowe, jeśli dołączy się infekcja bakteryjna, szukają pomocy w postaci antybiotyków. Nawiasem mówiąc, penicyliny nie są w tym przypadku zalecane ze względu na to, że mogą wywołać pojawienie się wysypki skórnej.

Nie myśl, że jeśli dziecko lub nastolatek zachoruje na mononukleozę zakaźną, oznacza to, że wirus Epsteina-Barr zadomowił się w jego organizmie. Choroba ta ma inne, mniej powszechne patogeny, takie jak cytomegalowirus (wirus opryszczki typu 5). Aby zrozumieć, z czym mają do czynienia, lekarze przepisują test na obecność wirusa Epsteina-Barr i, jeśli to konieczne, inne badania laboratoryjne.

Prawdą jest również, że mononukleoza zakaźna nie jest jedynym objawem EBV w dzieciństwie. Istnieją inne choroby związane z tym patogenem, ale w naszym regionie są one rzadkie.

Tak więc chłoniak Burkitta (któremu EBV zawdzięcza swoje wykrycie) występuje głównie u dzieci w krajach afrykańskich, bardzo rzadko w Ameryce, a jeszcze rzadziej w Europie (i to tylko na tle AIDS). Guz szczęki z uszkodzeniem węzłów chłonnych, nerek i innych narządów występuje u dzieci w wieku 3-8 lat.

Rak nosogardła, znaczna część innych chłoniaków, leukoplakia włochata jamy ustnej - wszystkie te schorzenia są objawami zakażenia wirusem EBV na tle znacznie obniżonej odporności, jaka występuje przy zakażeniu wirusem HIV oraz jego późniejszym stadium AIDS.

Wrodzony niedobór odporności i dodanie wirusa Epsteina-Barr to niebezpieczna mieszanka, która może doprowadzić do rozwoju zespołu proliferacyjnego u dziecka. W tym przypadku wzrost liczby limfocytów B prowadzi do pojawienia się granulek w wielu narządach, co uniemożliwia im normalne funkcjonowanie. Jest to choroba o wysokiej śmiertelności, ale nie rozwija się na tle prawidłowej odporności.

Można powiedzieć, że w dzieciństwie wirus Epsteina-Barr jest niebezpieczny głównie w przypadkach niedoboru odporności ze względu na rozwój różnych powikłań. W większości przypadków wszystko ogranicza się do mononukleozy zakaźnej. I chociaż nie wymaga ona specjalnego leczenia, lekarze nadal wolą ustalić charakter patogenu, na który dziecku przepisuje się ogólne badanie krwi, immunoenzymatyczny test i PCR.

Ponieważ w dzieciństwie najczęściej dochodzi do zakażenia pierwotnego, można ograniczyć się wyłącznie do wykonania morfologii krwi i badania PCR, co jest bardzo przydatne w przypadku pierwszego wykrycia choroby.

[ 13 ], [ 14 ], [ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ], [ 20 ], [ 21 ], [ 22 ]

Normalna wydajność

Wyniki analizy PCR są przetwarzane przez elektroforezę lub przy użyciu znakowanych „primerów”. W drugim przypadku wystarczy po prostu dodać odczynnik (chromogen) i określić kolorem, czy w próbce znajdują się wiriony. Pozytywny wynik elektroforezy jest oznaczony, gdy w badanej próbce wykryto nici DNA o różnej długości.

W okresie inkubacji choroby i bezobjawowego nosicielstwa wirusa PCR da wynik negatywny, jak również w przypadku całkowitego braku wirusa w organizmie. Na początku rozwoju pierwotnej infekcji i w jej wczesnych stadiach PCR w czasie rzeczywistym może dać zarówno wyniki pozytywne, jak i negatywne, co w żaden sposób nie wyjaśnia sytuacji.

Jednakże w trakcie trwania choroby (faza ostra), w jej przewlekłym przebiegu lub reaktywacji wirusa (zaostrzenie) i w przypadku form atypowych analiza będzie dodatnia. Jeśli osoba choruje od dłuższego czasu, a wirus w jej organizmie jest w stanie nieaktywnym, analiza PCR da wynik ujemny, tzn. przeprowadzenie tej analizy w tym okresie jest również niewłaściwe, jak również w zbyt wczesnych stadiach choroby.

Należy zaznaczyć, że dokładne wyniki tego typu badań laboratoryjnych możliwe są jedynie w przypadku zakażenia pierwotnego i braku wirionów innych wirusów.

Teraz, jeśli chodzi o test immunoenzymatyczny na wirusa Epsteina-Barr. Ma on takie same wymagania. Obecność wirusa opryszczki typu 5 lub 6, toksoplazmozy i zakażenia wirusem HIV w organizmie może zniekształcić wynik nie mniej niż niedbałe podejście do analizy lub słaba jakość użytych odczynników. W takim przypadku mogą być wymagane dodatkowe badania, biorąc pod uwagę możliwe patogeny.

Normalne wyniki testów, które wskazują na brak wirusa w organizmie, są uważane za wynik ujemny dla wszystkich 4 testów: IgG EA, IgM VCA, IgG VCA i IgG EBNA. Tak, każdy test jest wykonywany osobno, ponieważ antygeny pojawiają się w różnych okresach choroby. Czasami mogą być przepisane tylko pojedyncze testy, ale w większości przypadków wszystkie 4 testy muszą być wykonane, ale w różnych okresach choroby.

Na przykład w okresie inkubacji choroby, jak również w przypadku braku zakażenia, we krwi nie wykrywa się żadnego z 4 typów przeciwciał. Taki wynik nie może być uznany za wystarczający, ponieważ nie pozwala odróżnić osoby, która zachorowała po raz pierwszy od osoby zdrowej.

Na początku rozwoju choroby pierwotnej we krwi pojawiają się tylko przeciwciała IgM VCA. We wczesnych stadiach choroby dołączają do nich przeciwciała IgG VCA.

Ostra faza pierwotnego zakażenia przebiega z wytworzeniem trzech typów przeciwciał: IgG VCA, IgM VCA i IgG EA, przy czym wykrywa się największą liczbę przeciwciał IgG przeciwko antygenowi kapsydu. Taki sam skład przeciwciał utrzymuje się przez sześć miesięcy po ostrej fazie choroby, ale ilość IgM VCA stopniowo spada do zera.

Pół roku po zachorowaniu we krwi pojawiają się przeciwciała IgG EBNA, podczas gdy immunoglobuliny IgG EA stają się coraz mniejsze, a przeciwciała IgM VCA w ogóle nie występują.

W przewlekłych przypadkach choroby lub reaktywacji wirusa mogą występować różne wskaźniki. Najczęściej we krwi stwierdza się wszystkie 4 rodzaje przeciwciał. Może się jednak zdarzyć, że immunoglobuliny IgM VCA i IgG EBNA nie zostaną wykryte.

Do powikłań zakażenia wirusowego wywołanych procesami nowotworowymi dochodzi w przypadku braku przeciwciał IgM VCA, a immunoglobuliny IgG EBNA nie są wykrywane we wszystkich przypadkach.

Ale immunoanaliza enzymatyczna określa nie tylko obecność pewnych przeciwciał, ale także ich stężenie, co pozwala nam z większą dokładnością ocenić stadium patologii i jej możliwe konsekwencje. Nie ma potrzeby mówić tutaj o konkretnych liczbach. W końcu każde laboratorium przeprowadza analizę w jeden z możliwych sposobów, używając różnych odczynników, więc wyniki analizy różnych laboratoriów mogą się różnić w formacie cyfrowym.

Pacjent musi otrzymać formularz wskazujący wartości progowe (referencyjne). Jeśli wynik jest poniżej progu, uznaje się go za wskaźnik normalny (ujemny). Jeśli ustalona liczba jest powyżej wartości referencyjnej, wszystko wskazuje na wynik dodatni, co oznacza, że wirus żyje w organizmie. Wartość ustalonej wartości wskazuje na stadium choroby i kolonizację organizmu wirionami EBV, czyli na ciężkość patologii.

Jeśli test ELISA jest ujemny, oznacza to jedynie, że dana osoba nie miała kontaktu z wirusem EBV w przeszłości. Nie można jednak z całą pewnością stwierdzić, czy wirus jest obecnie obecny w organizmie. Ujemny wynik może być spowodowany inkubacją patogenu w organizmie i bezobjawowym nosicielstwem wirusa. Czasami, aby upewnić się, że organizm nie jest zamieszkany przez wirusa, konieczne jest przeprowadzenie drugiej serii testów po pewnym czasie.

Jeśli wynik testu ELISA na obecność wirusa Epsteina-Barr nieznacznie przekracza wartości referencyjne, wynik uznaje się za wątpliwy. Przyczyną jest najczęściej wczesny etap choroby lub obecność wirionów innego wirusa w organizmie. W takim przypadku po 2 tygodniach zaleca się powtórzenie testu na obecność wirusa EBV i ewentualnie innych patogenów.

[ 23 ], [ 24 ], [ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ], [ 30 ]

Jeśli chodzi o pytanie, ile czasu zajmuje wykonanie testu na obecność wirusa Epsteina-Barr i kiedy można spodziewać się wyników, nie ma szczególnych trudności, których można by się spodziewać. W poważnym, dobrze wyposażonym laboratorium nie trzeba będzie czekać dłużej niż 2 dni od złożenia biomateriału. W sytuacjach wymagających pilnej analizy odpowiedź można uzyskać nawet po kilku godzinach.

Test na wirusa Epsteina-Barr należy wykonać w zaufanym laboratorium, w którym są zarówno wysokiej jakości odczynniki, jak i wykwalifikowani specjaliści. W końcu test kosztuje (i to niemało, test na jeden rodzaj przeciwciał kosztuje około 150-170 UAH), a nie chciałbym otrzymać fałszywego wyniku, a potem ewentualnie skontaktować się ponownie, ale do innego laboratorium, w celu powtórzenia testu.

[ 31 ], [ 32 ], [ 33 ], [ 34 ], [ 35 ]