Analiza mikroskopowa plwociny

Obserwacje mikroskopowe rodzimych i stacjonarnych barwionych próbek plwociny umożliwia szczegółową analizę jego struktury komórkowej, oraz w pewnym stopniu odzwierciedla charakter procesu patologicznego w płucach i oskrzelach, jej działalności, do identyfikacji różnych formacji włóknistą i krystalicznej, również mają istotną wartość diagnostyczną, i wreszcie z grubsza ocenić stan flora bakteryjna układu oddechowego (bakterioskopia).

W mikroskopie wykorzystaj natywne i malowane preparaty plwociny. Aby zbadać florę bakteryjną (bakterioskopia), wymazy plwociny są zwykle barwione przez Romanovsky'ego-Giemsę, według Grama, i do wykrywania Mycobacterium tuberculosis, ale Cilu-Nielsen.

Elementy komórkowe i włókna elastyczne

Spośród elementów komórkowych, które można wykryć w plwocinie pacjentów z zapaleniem płuc, znaczenie mają diagnostyczne właściwości nabłonka, makrofagi pęcherzykowe, leukocyty i erytrocyty.

Komórki nabłonkowe. Płaskokomórkowego nabłonka nie z jamy ustnej, nosogardzieli, fałdy głosowych i wartości diagnostyczne nagłośni, chociaż wykrywania dużej liczby komórek nabłonka płaskiego, zwykle wskazuje na niską jakość próbek plwociny dostarczona do laboratorium i śliną zawierającą znaczne zanieczyszczenie.

U pacjentów z zapaleniem płuc plwocina jest uważana za odpowiednią do badania, jeżeli przy mikroskopie z niewielkim wzrostem liczba komórek nabłonkowych nie przekracza 10 w polu widzenia. Większa liczba komórek nabłonkowych wskazuje na niedopuszczalną przewagę zawartości części jamy ustno-gardłowej w próbce biologicznej.

Makrofagi pęcherzykowe, które w niewielkich ilościach można również znaleźć w dowolnej plwocinie, są dużymi komórkami o pochodzeniu retikulofilowym z ekscentrycznie położonym dużym jądrem i obfitymi inkluzjami w cytoplazmie. Te wtrącenia mogą składać się z zaabsorbowanych makrofagiem drobnych cząstek pyłu (komórek kurzu), leukocytów i tym podobnych. Liczba makrofagów pęcherzyków płucnych wzrasta wraz z procesem zapalnym w miąższu płucnym i drogach oddechowych, w tym zapaleniem płuc.

Komórki cylindrycznie nabłonka nabłonka wyściełającego błonę śluzową krtani, tchawicy i oskrzeli. Wyglądają jak wydłużone komórki, poszerzone na jednym końcu, gdzie znajdują się jądro i rzęski. Ogniwa cylindryczne urzęsionych nabłonkowych znaleźć w każdym plwociny, jednak ich wzrost wskazuje uszkodzenie błony śluzowej oskrzeli i tchawicy (ostre i przewlekłe zapalenie oskrzeli, zapalenie oskrzeli, zapalenie tchawicy, zapalenie).

Leukocyty w małych ilościach (2-5 w polu widzenia) znajdują się w dowolnej plwocinie. W przypadku stanu zapalnego tkanki płucnej lub błony śluzowej i tchawicy oskrzeli, zwłaszcza w przypadku ropienia (zgorzel, ropień płuc, rozstrzeń oskrzeli), ich liczba jest znacznie zwiększona.

Podczas barwienia preparatów plwociny według Romanovsky'ego-Giemsy, możliwe jest różnicowanie poszczególnych leukocytów, które czasami mają ważną wartość diagnostyczną. Tak więc, przy wyraźnym zapaleniu tkanki płucnej lub błony śluzowej oskrzeli, zwiększa się zarówno całkowita liczba neutrofilowych leukocytów, jak i liczba ich zwyrodnieniowych form z fragmentacją jąder i zniszczeniem cytoplazmy.

Zwiększenie liczby zwyrodnieniowych postaci leukocytów jest najważniejszym objawem aktywności procesu zapalnego i cięższym przebiegiem choroby.

Erytrocyty. Pojedyncze erytrocyty mogą być wykryte praktycznie i każda plwocina. Znaczący wzrost obserwuje się, gdy upośledzona jest przepuszczalność naczyń u pacjentów z zapaleniem płuc, z uszkodzeniem tkanki płucnej lub oskrzelowej, stagnacją w małym krążku krążenia, zawałem płuc itp. W dużej liczbie czerwonych krwinek w plwocinie znajdują się podczas hemoptyzy każdej genezie.

Elastyczne włókna. Należy również wspomnieć o jeszcze jednym elemencie plwocinowych włókien plastikowych, które pojawiają się w plwocinie w przypadku zniszczenia tkanki płucnej (ropień płuc, gruźlica, rozsypujący się rak płuc itp.). Elastyczne włókna prezentowane są w plwocinie w postaci cienkich dwuskładnikowych, karbikowanych włókien o dychotomicznym podziale na końcach. Pojawienie się elastycznych włókien w plwocinie u pacjentów z ciężkim zapaleniem płuc wskazuje na wystąpienie jednego z powikłań choroby - ropień tkanki płucnej. W niektórych przypadkach, podczas tworzenia ropnia płuca, elastyczne włókna w plwocinie mogą być wykryte nawet nieco wcześniej niż odpowiednie zmiany radiograficzne.

Często przy kichym zapaleniu płuc, gruźlicy, promienicy, włóknikowym zapaleniu oskrzeli w preparatach plwociny można wykryć cienkie włókna fibryny.

Oznaki aktywnego procesu zapalnego w płucach to:

1. charakter plwociny (śluzowo-ropny lub ropny);
2. wzrost liczby neutrofili w plwocinie, w tym ich postaci zwyrodnieniowych;
3. wzrost liczby makrofagów pęcherzyków płucnych (z pojedynczych skupisk kilku komórek w polu widzenia i więcej);

Pojawienie się w plwocinie elastycznych włókien wskazuje na zniszczenie tkanki płucnej i tworzenie ropnia płucnego.

Ostateczne wnioski dotyczące obecności i stopnia aktywności zapalenia i niszczenia tkanki płucnej powstają tylko wtedy, gdy porównuje się je z klinicznym obrazem choroby i wynikami innych laboratoryjnych i instrumentalnych metod badawczych.

[1], [2], [3], [4], [5]

Flora bakteryjna

Mikroskopia smugi, barwiona według Grama, a badanie flory bakteryjnej (bakterioskopii) u części pacjentów z zapaleniem płuc pozwala wstępnie ustalić najbardziej prawdopodobny czynnik wywołujący zakażenie płucne. Ta prosta metoda ekspresyjnej diagnostyki patogenu nie jest wystarczająco dokładna i powinna być stosowana wyłącznie w połączeniu z innymi (mikrobiologicznymi, immunologicznymi) metodami badania plwociny. Mikroskopia immersyjna barwionych wymazów jest czasami bardzo przydatna w przypadku nagłej selekcji i podawania odpowiedniej antybiotykoterapii. Należy jednak pamiętać o możliwości zanieczyszczenia zawartości oskrzeli mikroflory górnych dróg oddechowych i jamy ustnej, szczególnie w przypadku nieprawidłowego pobierania plwociny.

Dlatego plwocina jest uważana za odpowiednią do dalszych badań (bakteriozopii i badania mikrobiologicznego) tylko wtedy, gdy spełnia następujące warunki:

• Barwienie metodą Grama w plwocinie ujawnia dużą liczbę neutrofili (ponad 25 w polu widzenia z małym powiększeniem mikroskopu);
• Liczba komórek nabłonka, bardziej charakterystyczna dla zawartości części ustnej gardła, nie przekracza 10;
• w preparacie występuje przewaga mikroorganizmów tego samego typu morfologicznego.

Na Grama plwociny w rozmazie czasem wystarczy, aby zidentyfikować gram pneumokoki, paciorkowce, gronkowce i Gram-ujemne grupy bakterii dobry -. Klebsiellu lanca Pfeiffer, E. Coli i innych bakterii Gram-dodatnich, w tym wypadku się niebieski, i Gram - czerwony.

Bakteryjne patogeny zapalenia płuc

Gram-dodatnie	Gram-ujemny
Pneumococcus Streptococcus pneumoniae. Streptococci Streptococcus pyogenes, Streptococcus viridans. Staphylococci: Staphylococcus aureus, Staphylococcus haemolyticus.	Klebsiellı  (Klebsiella pneumoniae) Hemophilus influenzae (Pfeiffer) Haemophilius influenzae Pseudomonas aeruginosa  (z Pseudomonas aeruginosa) Legionnella (Legionella Pneumophilia) E. Coli (Escherichia coli)

Pre rozmaz plwociny jest najprostszym sposobem weryfikacji patogenem zapalenia płuc i ma określoną wartość dla doboru optymalnej terapii antybiotykowej. Na przykład, po wykryciu rozmazów barwionych przez Gram grompolozhitelnyh dwoinek (pneumokoki) lub gronkowce zamiast antybiotyków o szerokim spektrum działania, co zwiększa ryzyko selekcji i namnażania mikroorganizmów możliwe aitibiotikorezistentnyh przypisać ukierunkowanej terapii, aktywnej przeciwko Staphylococcus lub pneumokoków. W innych przypadkach, wykrywanie dominujących flory rozmazach Gram może wskazywać na pas, który powoduje zapalenie Enterobacteriaceae, są Gram-ujemne (Klebsiella, E. Coli itd.), Co wymaga odpowiedniego przeznaczenia ukierunkowanej terapii.

Jednakże próba zakończenie, które może on czynnikiem powodującym zakażenie płuc za pomocą mikroskopu może być wykonane PAS oparte jedynie istotny wzrost bakterii w plwocinie, w stężeniu 10 ⁶ - 10 ⁷  komórek mikrobiologicznych / ml lub (II Vishnjakova). Niskie stężenia mikroorganizmów (<10 ³  m.ks / ml) są charakterystyczne dla towarzyszących mikroflory. Jeśli stężenie ciałek drobnoustrojów waha się od 10 ⁴  do 10 ⁶  m.ks / ml, nie wyklucza to etiologicznej roli tego mikroorganizmu w występowaniu zakażenia płuc, ale nie dowodzi tego.

Należy również pamiętać, że "atypowe" wewnątrzkomórkowe patogeny (mykoplazm,  legionella, chlamydia, rickettsia) nie plamią Gramma. W takich przypadkach może pojawić się podejrzenie wystąpienia "atypowej" infekcji, jeśli wymazy wykazują dysocjację pomiędzy dużą liczbą neutrofilów i wyjątkowo małą liczbą komórek drobnoustrojów.

Niestety, metoda bakteriozopii ma zazwyczaj niską czułość i swoistość. Nie wartość predykcyjna, nawet dla dobrze zobrazowanych pneumokoków, ledwie sięga 50%. Oznacza to, że w połowie przypadków metoda daje wyniki fałszywie dodatnie. Wynika to z kilku powodów, z których jedna jest fakt, że około 1/3 pacjentów przed hospitalizacją otrzymali antybiotyki, co znacznie zmniejsza skuteczność rozmazie plwociny. Ponadto, nawet w przypadku pozytywnych wyników badań, co wskazuje na wystarczająco wysokim stężeniu w rozmazie „typowe” patogeny bakteryjne (np pneumokokom), nie można całkowicie wykluczyć obecność współ-zakażenie „atypowe” wewnątrzkomórkowe patogeny (Mycoplasma, Chlamydia, Legionella).

Metoda bakteriozopii rozmazów plwociny, barwionych przez Grama, w niektórych przypadkach pomaga zweryfikować czynnik wywołujący zapalenie płuc, chociaż generalnie ma bardzo niską wartość predykcyjną. Nietypowe patogeny wewnątrzkomórkowe (mykoplazm, legionella, chlamydia, rickettsia) nie są w ogóle weryfikowane metodą bakteriozopii, ponieważ nie barwią Gramma.

Należy wspomnieć o możliwości diagnostyki mikroskopowej u pacjentów z zapaleniem płuc grzybiczej infekcji płucnej. Najbardziej istotne w przypadku pacjentów przyjmujących długotrwałe leczenie antybiotykami o szerokim spektrum działania, jest wykrywanie natywnego lub mikroskopii barwione plwociny Candida albicans w postaci komórek drożdży i rozgałęzienia grzybni. Oni świadczą o zmianach w mikroflory tchawiczo treści, wynikające pod wpływem antybiotykoterapii, która wymaga znacznej korekty terapii.

W niektórych przypadkach u pacjentów z zapaleniem płuc istnieje potrzeba odróżnienia istniejącej choroby płuc od gruźlicy. W tym celu należy użyć koloru mazistej Ziehl-Nielsena, który w niektórych przypadkach pozwala na identyfikację Mycobacterium tuberculosis, ale ujemny wynik takiego badania nie oznacza braku chorych na gruźlicę. Podczas barwienia plwociny według Tsil-Nielsen, prątki gruźlicy są zabarwione na czerwono, a wszystkie inne elementy plwociny są niebieskie. Gruźlicze prątki mają wygląd kału, proste lub lekko zakrzywione sztyfty o różnej długości z oddzielnymi zgrubieniami. Są one umieszczone w przygotowaniu w grupach lub pojedynczo. Wartość diagnostyczna to wykrycie w przygotowaniu nawet pojedynczych prątków gruźlicy.

Aby zwiększyć skuteczność wykrywania mikroskopowego prątków gruźlicy, należy zastosować szereg dodatkowych metod. Najbardziej powszechną z nich jest tak zwana metoda flotacji, w której homogenizowana plwocina jest wytrząsana z toluenem, ksylenem lub benzyną, z których kropelki wyskakują i wychwytują prątki. Po osiedleniu się plwociny wierzchnią warstwę pipetuje się na szkiełko. Następnie lek jest utrwalony i barwiony przez Tsilyu-Nielsena. Istnieją inne metody akumulacji (elektroforeza) i mikroskopia bakterii gruźlicy (mikroskopia luminescencyjna).

Badanie mikroskopowe (analiza) śluzu pozwala wykryć śluz, elementy komórkowe, włókniste i krystaliczne formacje, grzyby, bakterie i pasożyty.

Komórki

• Makrofagi pęcherzykowe są komórkami o pochodzeniu retikulogitocytów. Duża liczba makrofagów w plwocinie jest wykrywana w procesach przewlekłych i na etapie rozwiązywania ostrych procesów w układzie oskrzelowo-płucnym. Pęcherzykowe makrofagi zawierające hemosiderynę ("komórki defektów serca") są wykrywane z łagodnym zawałem, krwotokiem, stagnacją w małym krążku krwi. Makrofagi z kroplami lipidów są oznaką obturacyjnego procesu w oskrzelach i oskrzelikach.
• Komórki Xantom (tłuszczowe makrofagi) znajdują się w ropniu, promienicy, bąblowicy płuc.
• Komórki cylindrycznego nabłonka rzęskowego są komórkami błony śluzowej krtani, tchawicy i oskrzeli; znajdują się w zapaleniu oskrzeli, tchawicy, astmie oskrzelowej, złośliwych nowotworach płuc.
• Płaski nabłonek jest wykrywany, gdy śluza dostanie się do plwociny, nie ma znaczenia diagnostycznego.
• Leukocyty w tej lub innej ilości są obecne w dowolnej plwocinie. Duża liczba neutrofili jest wykrywana w śluzowo-ropnej i ropnej plwocinie. Eozynofile są bogate w plwocinę w astmie oskrzelowej, eozynofilowym zapaleniu płuc, uszkodzeniach płuc w głośni oraz zawałach płucnych. Eozynofile mogą pojawić się w plwocinie na gruźlicę i raka płuc. Limfocyty w dużej liczbie znajdują się w krztusieniu, a rzadziej w gruźlicy.
• Erytrocyty. Wykrycie pojedynczych krwinek czerwonych w plwocinie nie ma znaczenia diagnostycznego. Jeśli świeża krew jest obecna w plwocinie, oznacza się niezmienione erytrocyty, ale jeśli krew, która była w drogach oddechowych przez długi czas, pozostawia plwocinę, wówczas znaleziono krwinki czerwone wyługowane.
• Komórki nowotworów złośliwych znajdują się w nowotworach złośliwych.

Włókna

• Włókna elastyczne pojawiają się w rozpadzie tkanki płucnej, czemu towarzyszy destrukcja warstwy nabłonkowej i uwalnianie włókien elastycznych; znajdują się w gruźlicy, ropie, bąblowicy, nowotworach w płucach.
• Włókna koronalne wykrywane są w przewlekłych chorobach płuc, takich jak gruźlica jaskrowa.
• Wypalone włókna elastyczne są włóknami elastycznymi impregnowanymi solami wapnia. Wykrywanie ich w plwocinie jest charakterystyczne dla rozpadu gruźliczego zapalenia wątroby.

Spirale, kryształy

• Spirale Kurshman powstają w spastycznym stanie oskrzeli i obecności w nich śluzu. Podczas przeciągu kaszlu, lepki śluz uwalniany jest do światła większego oskrzela, skręcając się w spiralę. Spirale Kurshman pojawiają się z astmą oskrzelową, zapaleniem oskrzeli, guzami płuc, kompresją oskrzeli.
• Kryształy Charcot-Leiden są produktami rozpadu eozynofilów. Zwykle pojawiają się w plwocinie zawierającej eozynofile; są charakterystyczne dla astmy oskrzelowej, stanów alergicznych, nacieków eozynofilowych w płucach, przywry płucnej.
• Kryształy cholesterolu pojawiają się z ropniem, bąblowicą płucną, nowotworami w płucach.
• Kryształy hematoidyny są charakterystyczne dla ropnia i zgorzeli płuc.
• Druzy promieniowca są wykrywane w promienicy płuc.
• Elementy echinokoków pojawiają się z bąblowicą płuc.
• Korki Dietrich - kawałki żółtawo-szarego koloru, o nieprzyjemnym zapachu. Składają się z detrytusu, bakterii, kwasów tłuszczowych, kropelek tłuszczu. Są typowe dla ropnia płuc i rozstrzeni oskrzeli.
• Tetrad Ehrlicha składa się z czterech elementów: zwapniałych detrytusów, zwapniałych włókien elastycznych, kryształów cholesterolu i prątków gruźlicy. Pojawia się w rozpadzie uwapnionego pierwotnego ogniska gruźliczego.

Grzybnia i pączkujące komórki grzybów pojawiają się w zmianach grzybiczych układu oskrzelowo-płucnego.

Pneumocystis występuje w pneumocystis pneumonia.

Sferule grzybów wykrywa się w kokcydioidomikozie płuc.

Larwy ascarid wykrywane są z ascariasis.

Larwy jelitowego jelita są utożsamiane z węgorczycą.

Jajka motylicy płucnej są identyfikowane z paragonimozą.

Elementy znalezione w plwocinie w astmie oskrzelowej. Kiedy astma oskrzelowa jest zwykle oddzielona niewielką ilością śluzowej, lepkiej plwociny. Makroskopowo widać spiralę Kurshmana. Kiedy badania mikroskopowe są charakterystyczne dla obecności eozynofili, cylindrycznego nabłonka, są tam kryształy Charcot-Leiden.